本文關鍵詞：乳腺癌MCF-7抗原負載的DC聯(lián)合CIK細胞對乳腺癌MCF-7細胞株體內(nèi)外作用的研究

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【摘要】：背景:乳腺癌是目前導致女性癌癥死亡的主要原因之一。目前,針對乳腺癌的臨床手段主要為手術、放療、化療、內(nèi)分泌治療以及分子靶向治療等多種治療方式。雖然乳腺癌總體治療效果很好,但有部分患者在接受規(guī)范化治療后,仍會出現(xiàn)復發(fā)轉移,所以對于乳腺癌的長線治療仍然是一項具有挑戰(zhàn)性的工作,尋找新的乳腺癌治療策略刻不容緩。近年來,逐步有研究發(fā)現(xiàn)以抗原—抗體免疫反應著手,通過調(diào)節(jié)抗腫瘤的免疫反應可以利用免疫系統(tǒng)鑒別和消滅腫瘤的能力,從而避免腫瘤復發(fā)和轉移,但其于乳腺癌治療方面并沒有被完全認識。本實驗擬利用提取乳腺癌MCF-7凍融抗原,聯(lián)合來源于健康人外周血的DC與CIK細胞,并共同作用于乳腺癌MCF-7細胞,觀察其在對于乳腺癌細胞活性,侵襲能力及細胞種植成瘤方面的影響。目的:通過對健康人外周血來源的DC進行乳腺癌MCF-7凍融抗原負載,聯(lián)合CIK細胞作用,觀察其在對于乳腺癌細胞活性、侵襲能力及細胞種植成瘤能力的影響,從而為乳腺癌新型細胞免疫治療提供依據(jù)。方法:采用循環(huán)凍融法制備人乳腺癌MCF-7無菌凍融抗原。在嚴格無菌條件下采取健康人50ml外周靜脈血,采用梯度密度區(qū)帶離心法分離外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),通過細胞因子rh GM-CSF和rh IL-4定向誘導,中間分組加入凍融抗原進行負載后運用TNF-α促進DC細胞成熟,并通過rh IFN-γ、rh IL-2誘導成熟的CIK細胞,兩種細胞分組聯(lián)合作用。以普通乳腺癌MCF-7細胞做對照,用CCK8、Transwell方法及裸鼠體內(nèi)實驗,聯(lián)合腫瘤細胞種植皮下成瘤,分析抗原負載后對乳腺癌細胞毒作用的改變、細胞侵襲能力及成瘤能力的影響,最終評估MCF-7細胞凍融抗原負載的DC聯(lián)同CIK細胞在乳腺癌治療中的作用。結果:(1)乳腺癌細胞可于反復凍融狀態(tài)下發(fā)生裂解并釋放抗原。(2)CCK8實驗結果顯示:在DC細胞聯(lián)合CIK細胞對乳腺癌細胞的體外殺傷作用中,DCM CF-7+CIK組在各效靶比下對于乳腺癌MCF-7細胞e笊鄙寺示罡，

本文編號：1188458