發(fā)布時(shí)間：2017-11-15 05:08

  本文關(guān)鍵詞：乳腺癌MCF-7抗原負(fù)載的DC聯(lián)合CIK細(xì)胞對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞株體內(nèi)外作用的研究

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【摘要】：背景:乳腺癌是目前導(dǎo)致女性癌癥死亡的主要原因之一。目前,針對(duì)乳腺癌的臨床手段主要為手術(shù)、放療、化療、內(nèi)分泌治療以及分子靶向治療等多種治療方式。雖然乳腺癌總體治療效果很好,但有部分患者在接受規(guī)范化治療后,仍會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移,所以對(duì)于乳腺癌的長(zhǎng)線治療仍然是一項(xiàng)具有挑戰(zhàn)性的工作,尋找新的乳腺癌治療策略刻不容緩。近年來(lái),逐步有研究發(fā)現(xiàn)以抗原—抗體免疫反應(yīng)著手,通過(guò)調(diào)節(jié)抗腫瘤的免疫反應(yīng)可以利用免疫系統(tǒng)鑒別和消滅腫瘤的能力,從而避免腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,但其于乳腺癌治療方面并沒(méi)有被完全認(rèn)識(shí)。本實(shí)驗(yàn)擬利用提取乳腺癌MCF-7凍融抗原,聯(lián)合來(lái)源于健康人外周血的DC與CIK細(xì)胞,并共同作用于乳腺癌MCF-7細(xì)胞,觀察其在對(duì)于乳腺癌細(xì)胞活性,侵襲能力及細(xì)胞種植成瘤方面的影響。目的:通過(guò)對(duì)健康人外周血來(lái)源的DC進(jìn)行乳腺癌MCF-7凍融抗原負(fù)載,聯(lián)合CIK細(xì)胞作用,觀察其在對(duì)于乳腺癌細(xì)胞活性、侵襲能力及細(xì)胞種植成瘤能力的影響,從而為乳腺癌新型細(xì)胞免疫治療提供依據(jù)。方法:采用循環(huán)凍融法制備人乳腺癌MCF-7無(wú)菌凍融抗原。在嚴(yán)格無(wú)菌條件下采取健康人50ml外周靜脈血,采用梯度密度區(qū)帶離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),通過(guò)細(xì)胞因子rh GM-CSF和rh IL-4定向誘導(dǎo),中間分組加入凍融抗原進(jìn)行負(fù)載后運(yùn)用TNF-α促進(jìn)DC細(xì)胞成熟,并通過(guò)rh IFN-γ、rh IL-2誘導(dǎo)成熟的CIK細(xì)胞,兩種細(xì)胞分組聯(lián)合作用。以普通乳腺癌MCF-7細(xì)胞做對(duì)照,用CCK8、Transwell方法及裸鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn),聯(lián)合腫瘤細(xì)胞種植皮下成瘤,分析抗原負(fù)載后對(duì)乳腺癌細(xì)胞毒作用的改變、細(xì)胞侵襲能力及成瘤能力的影響,最終評(píng)估MCF-7細(xì)胞凍融抗原負(fù)載的DC聯(lián)同CIK細(xì)胞在乳腺癌治療中的作用。結(jié)果:(1)乳腺癌細(xì)胞可于反復(fù)凍融狀態(tài)下發(fā)生裂解并釋放抗原。(2)CCK8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在DC細(xì)胞聯(lián)合CIK細(xì)胞對(duì)乳腺癌細(xì)胞的體外殺傷作用中,DCM CF-7+CIK組在各效靶比下對(duì)于乳腺癌MCF-7細(xì)胞e笊鄙寺示罡，

本文編號(hào)：1188458