發(fā)布時(shí)間：2017-11-04 09:23

  本文關(guān)鍵詞：微泡在乳腺癌耐藥信息傳遞及與化療療效判斷中的價(jià)值

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【摘要】：[目的]探討微泡在乳腺癌細(xì)胞間耐藥信息的傳遞及其攜帶耐藥相關(guān)蛋白MRP1、BCRP水平與化療療效判斷中的價(jià)值。[方法]1、選用乳腺癌細(xì)胞MCF-7/WT與耐多柔比星細(xì)胞MCF-7/ADM為模型,運(yùn)用MTT法檢測(cè)兩株細(xì)胞對(duì)藥物多柔比星的IC50,激光共聚焦顯微鏡觀察多柔比星在兩株細(xì)胞內(nèi)的分布,透射電子顯微鏡觀察兩株細(xì)胞亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)-微泡及檢測(cè)微泡內(nèi)藥物；2、收集MCF-7/ADM細(xì)胞來源的微泡為研究材料,運(yùn)用共聚焦顯微鏡觀察該類微泡與MCF/WT細(xì)胞相互作用過程；運(yùn)用MTT法檢測(cè)微泡與野生細(xì)胞共培養(yǎng)后IC50變化；運(yùn)用RT-PCR、流式細(xì)胞方法分別檢測(cè)兩株細(xì)胞MRP1、BCRPmRNA與蛋白水平,兩株細(xì)胞來源的微泡攜帶MRP1、BCRPmRNA與蛋白水平,以及MCF-7/ADM細(xì)胞微泡與MCF-7/WT細(xì)胞共培養(yǎng)后MRP1、BCRPmRNA與蛋白水平。3、收集43例新輔助化療后乳腺癌患者外周血及癌組織,運(yùn)用RT-PCR、流式細(xì)胞方法檢測(cè)外周血微泡MRP1mRNA、BCRPmRNA與蛋白水平,免疫熒光檢測(cè)外周血微泡MUC1陽性率及MUC1與MRP1、BCRP共表達(dá)率,運(yùn)用熒光原位雜交技術(shù)、免疫組化技術(shù)檢測(cè)癌組織MRP1mRNA、BCRPmRNA與蛋白水平；采用RT-PCR檢測(cè)84例晚期轉(zhuǎn)移性乳腺癌姑息化療患者外周血微泡MRP1、BCRP mRNA水平,并按中位值分為高表達(dá)組和低表達(dá)組,分析MRP1mRNA、BCRP mRNA水平與PFS的相關(guān)性。[結(jié)果]1、乳腺癌MCF-7/ADM細(xì)胞IC50為21.29 μmol/L,比MCF-7/WT細(xì)胞IC50的0.053 μmol/L高400倍左右；多柔比星在MCF-7/WT細(xì)胞主要聚集在細(xì)胞核,在MCF-7/ADM細(xì)胞主要被微泡包裹并遷移至細(xì)胞膜外側(cè)出芽；透射電子顯微鏡顯示在MCF-7/ADM細(xì)胞表面存在大量微泡,而在MCF-7/WT細(xì)胞很少有微泡結(jié)構(gòu)；分離的MCF-7/ADM細(xì)胞來源的微泡內(nèi)存在大量多柔比星。2、微泡與MCF-7/WT細(xì)胞體外共培養(yǎng)呈現(xiàn)出隨著時(shí)間與數(shù)量的增加而增加；共培養(yǎng)后細(xì)胞IC50為0.954 μmol/L,升高了18倍左右;MCF-7/ADM細(xì)胞MRP1、BCRP mRNA相對(duì)水平分別為0.63±0.04、0.45±0.08,較MCF-7/WT細(xì)胞的0.26±0.07、0.21±0.05高,p0.05；MCF-7/ADM細(xì)胞MRP1、BCRP蛋白相對(duì)熒光強(qiáng)度分別為13.5±2.1、12.7±1.9較MCF-7/WT的6.5±1.2、7.2±1.4高,p0.05; MCF-7/ADM細(xì)胞微泡MRP1、BCRP mRNA相對(duì)水平分別為0.63±0.09、0.67±0.06,較MCF-7/WT細(xì)胞的0.14±0.07、0.37±0.08高,p0.05；MCF-7/ADM來源微泡表面MRP1、BCRP、Flotillin-2、MUC1蛋白相對(duì)熒光值分別為9.99±1.58、10.1±1.6、12.5±2.39、10.2±1.76較MCF-7/WT細(xì)胞來源微泡的7.10±2.13、4.3±2.1、5.24±1.49、4.17±1.62高,p0.05；MCF-7/ADM細(xì)胞來源的微泡與MCF-7/WT細(xì)胞共培養(yǎng)后,MRP1、BCRP mRNA水平升高,p0.05；共培養(yǎng)細(xì)胞MRP1、BCRP蛋白熒光強(qiáng)度分別為8.5±1.1、9.2±1.0較MCF-7/WT細(xì)胞高,p0.05。3、按RECIST標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)化療療效并分CR/PR組與SD/PD組,SD/PD組患者外周血微泡MUC1陽性率、MUC1-MRP1共表達(dá)率以及MUC1-BCRP共表達(dá)率分別是11.67±0.76%、24.35±3.52%、20.08±3.38%,均較CR/PR組的6.67±1.03%、1.74±0.75%、1.82±0.65%高,p0.05；外周血微泡內(nèi)攜帶MRP1、BCRP mRNA水平,在SD/PD組分別為0.58±0.07、0.61±0.08較CR/PR組的0.07±0.01、0.11±0.03高,p0.01；癌組織檢測(cè)MRP1、BCRP (mRNA與蛋白)同樣發(fā)現(xiàn)在SD/PD組較CR/PR組高；MRP1 mRNA與BCRP mRNA高表達(dá)組的PFS分別為3.00、2.80月較低表達(dá)組的4.66、4.00月短；Cox多因素分析示MRP1、BCRP mRNA水平是晚期轉(zhuǎn)移性乳腺癌姑息化療的獨(dú)立預(yù)后因素。[結(jié)論]乳腺癌微泡能夠包裹藥物外排保護(hù)腫瘤細(xì)胞免受化療藥物的殺傷；耐藥細(xì)胞微泡能夠攜帶MRP1、BCRP并傳遞給敏感細(xì)胞使其獲得一定得耐藥性；乳腺癌患者外周血微泡MRP1、BCRP與癌組織具有一致性,并與近期化療療效相關(guān)；微泡MRP1、BCRP mRNA水平與晚期乳腺癌姑息化療患者PFS相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.9

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1 游向東,周穎,單江,劉伊麗;蛋白微泡聲學(xué)造影劑在缺血再灌注心肌中排空現(xiàn)象及其機(jī)制的探討[J];中華超聲影像學(xué)雜志;2003年06期

2 李彬,萬明習(xí),王素品;納米包膜造影微泡在脈沖超聲場(chǎng)中的瞬態(tài)非線性特性研究[J];聲學(xué)學(xué)報(bào);2004年06期

3 張群霞,王志剛,冉海濤,李曉東,鄭元義,景香香;不同超聲強(qiáng)度及微泡對(duì)基因和組織作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華超聲影像學(xué)雜志;2005年04期

4 張虎,王宏宇;微泡和超聲 從診斷到治療[J];中國(guó)民康醫(yī)學(xué);2005年08期

5 魏倕;謝志行;;帶球殼微泡和空化氣泡的超聲特性研究[J];聲學(xué)技術(shù);2007年03期

6 楊莉;劉政;左松;譚開彬;高云華;付赤學(xué);李秋穎;;脂膜微泡結(jié)合凝血酶原復(fù)合物的制備[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志;2007年05期

7 劉學(xué)兵;王志剛;許川山;夏新蜀;張勇;李攀;冉海濤;譚勇;;一種新型載光敏劑的微泡制備及其基本物理特性研究[J];激光雜志;2008年05期

8 朱蔚;周翔;羅燕;彭玉蘭;田野;王冬梅;柳曉軍;李珂;莊華;解慧琪;;“流動(dòng)的肺泡?”——超聲諧振微泡定向增加組織局部供氧的理論研究[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2012年10期

9 李彬,萬明習(xí);納米包膜造影微泡的小波檢測(cè)技術(shù)研究[J];聲學(xué)學(xué)報(bào);2005年05期

10 徐亞麗;高云華;劉政;譚開彬;付赤學(xué);;微泡超聲爆破助溶血栓機(jī)制的離體研究[J];中華超聲影像學(xué)雜志;2006年04期

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2 張群霞;王志剛;冉海濤;李曉東;鄭元義;景香香;;不同超聲強(qiáng)度及微泡對(duì)基因和組織作用的實(shí)驗(yàn)研究[A];第九屆全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 姜學(xué)平;程茜;錢夢(mèng)，

本文編號(hào)：1138809