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FOXM1在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖和遷移侵襲能力的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-11-03 16:07

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【摘要】:[目的]探討FOXM1基因在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)情況及其臨床意義。通過轉(zhuǎn)染FOXM1干擾短發(fā)夾RNA(shRNA)下調(diào)結(jié)腸癌細(xì)胞中FOXM1基因的表達(dá),探究FOXM1對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞增殖,遷移及侵襲能力的影響,為結(jié)腸癌的分子靶向治療提供理論依據(jù)。[方法]采用免疫組織化學(xué)方法檢測87例結(jié)直腸癌組織及癌旁正常的結(jié)直腸組織中FOXM1基因的蛋白表達(dá)情況,然后分析FOXM1的表達(dá)水平與臨床病理特征之間的相互關(guān)系。利用定量PCR及蛋白免疫印跡法(Western Blot)挑選出FOXM1高表達(dá)的結(jié)腸癌細(xì)胞株,設(shè)計(jì)靶向下調(diào)FOXM1的shRNA并轉(zhuǎn)入FOXM1高表達(dá)結(jié)腸癌細(xì)胞中,利用克隆體形成實(shí)驗(yàn)、四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及遷移侵襲實(shí)驗(yàn)檢測下調(diào)FOXM1基因?qū)Y(jié)腸癌細(xì)胞增殖,遷移及侵襲能力的影響;利用定量PCR及Western blot檢測結(jié)腸癌細(xì)胞中FOXM1基因及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)移相關(guān)標(biāo)志物的mRNA含量及蛋白表達(dá)水平。[結(jié)果]1.在87例結(jié)腸癌組織中,FOXM1表達(dá)中等陽性及強(qiáng)陽性52例,陰性及弱陽性35例,強(qiáng)陽性表達(dá)率59.8%,在配對(duì)的癌旁正常結(jié)直腸組織中,FOXM1表達(dá)中等陽性及強(qiáng)陽性23例,陰性及弱陽性64例,陽性表達(dá)率26.4%,統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),說明FOXM1在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常結(jié)直腸組織。臨床病理相關(guān)性分析顯示:FOXM1的高表達(dá)與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤的復(fù)發(fā)明顯相關(guān)(P0.001),而與病人的年齡,性別,腫瘤的大小,腫瘤的位置,TNM分期及腫瘤的分化程度無關(guān)(P0.05)。2.定量PCR及Western Blot結(jié)果顯示FOXM1在結(jié)腸癌細(xì)胞系SW620中高表達(dá);下調(diào)SW620細(xì)胞中FOXM1基因的表達(dá)后,顯著抑制了細(xì)胞的增殖,克隆體形成,遷移與侵襲能力。此外,FOXM1表達(dá)水平的下調(diào)逆轉(zhuǎn)SW620細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化形態(tài)的獲得,同時(shí)伴隨著EMT相關(guān)標(biāo)志物中E-cadherin表達(dá)的上調(diào),Vimentin與Snail表達(dá)的下降。[結(jié)論]FOXM1在結(jié)腸癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織,表明FOXM1可能參與促進(jìn)結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展;下調(diào)FOXM1的表達(dá)可以顯著抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖能力;FOXM1可能通過上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化通路調(diào)節(jié)結(jié)腸癌細(xì)胞的遷移與侵襲過程,FOXM1可能成為結(jié)直腸癌治療的有效靶點(diǎn)
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R735.35

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