單中心連續(xù)100例肺癌術(shù)后EGFR基因突變檢測結(jié)果分析
本文關(guān)鍵詞:單中心連續(xù)100例肺癌術(shù)后EGFR基因突變檢測結(jié)果分析
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【摘要】:目的:收集單中心連續(xù)100例肺癌根治術(shù)后患者的組織病理標(biāo)本,進(jìn)行EGFR基因突變檢測。本研究探討原發(fā)性支氣管肺癌表皮生長因子受體(EGFR)基因突變特點(diǎn)(突變位點(diǎn)及頻率),及其與臨床特征(病理類型、性別、吸煙情況、臨床分期、分化程度)的關(guān)系。方法:收集湖南省腫瘤醫(yī)院胸外二科連續(xù)100例原發(fā)性支氣管肺癌住院患者的手術(shù)標(biāo)本,經(jīng)福爾馬林溶液固定及石蠟包埋后,切取10-15片石蠟包埋白片。依據(jù)順序流程采用二甲苯及不同濃度梯度的乙醇溶液脫蠟。按QIAamp DNA FFPE Tissue試劑盒的說明書步驟進(jìn)行DNA提取。B-500超微量分光光度計測定DNA純度,依A260/A2801.8的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行樣本質(zhì)控。采用EGFR基因突變檢測試劑盒對樣本的EGFR 18、19、20、21號外顯子進(jìn)行PCR擴(kuò)增并測序。測序采用PyroMark Q24焦磷酸測序儀進(jìn)行。將測得的序列與Genbank中EGFR基因野生型標(biāo)準(zhǔn)序列進(jìn)行對比。確定突變位點(diǎn)及位點(diǎn)突變頻率后,將所得結(jié)果進(jìn)行匯總,并用卡方檢驗(yàn)對突變與臨床特征的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。P0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:100例中檢測到EGFR基因突變33例(33%,33/100),其中外顯子19號位突變19例;外顯子21號位突變14例,未檢測到其他位點(diǎn)突變患者。腺癌突變32例(47.76%,32/67);鱗癌突變1例(4.17%,1/24);其余病理類型均未檢測到突變。男性突變率為16.39%(10/61),女性突變率為58.97%(23/39),χ2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同性別的突變率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.0000130.05);既往吸煙的患者突變9例(15.52%,9/58),不吸煙者突變24例(57.14%,24/42),吸煙組與不吸煙組的突變率有統(tǒng)計學(xué)差異(P=0.0000150.05);女性不吸煙腺癌患者有22例發(fā)生突變(70.97%,22/31)。臨床分期I、II、III、IV期突變率分別為41.30%(19/46)、26.32%(5/19)、20.83%(5/24)、57.14%(4/7)。分化程度上,高分化、高中分化、中分化、中低分化、低分化突變率分別為57.14%(4/7)、55.00%(11/20)、32.35%(11/34)、14.29%(3/21)、28.57%(4/14)。結(jié)論:EGFR突變主要集中在外顯子19和21號位,EGFR基因突變與病理類型、性別和吸煙史相關(guān),與臨床分期無關(guān),與病理分化程度似可見相關(guān)性。揭示EGFR基因突變特點(diǎn)以及與臨床特征的關(guān)系有助于在臨床中推薦可能出現(xiàn)EGFR突變患者進(jìn)行基因檢測,使這部分患者有可能在TKI靶向藥物中獲益。
【關(guān)鍵詞】:肺癌 表皮生長因子受體 EGFR突變 焦磷酸測序
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R734.2
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-11
- 第1章 引言11-13
- 第2章 材料和方法13-19
- 2.1 標(biāo)本收集與臨床資料統(tǒng)計13
- 2.2 實(shí)驗(yàn)步驟13-17
- 2.2.1 標(biāo)本獲取與固定13
- 2.2.2 組織樣本石蠟包埋13-14
- 2.2.3 脫蠟及DNA提取14-15
- 2.2.4 RT-PCR擴(kuò)增15-16
- 2.2.5 焦磷酸測序16-17
- 2.3 統(tǒng)計學(xué)分析17-19
- 第3章 結(jié)果19-23
- 3.1 病例臨床特征19
- 3.2 EGFR基因突變特點(diǎn)19
- 3.3 EGFR基因突變與臨床特征的關(guān)系19-23
- 3.3.1 EGFR基因突變與病理類型的關(guān)系19
- 3.3.2 EGFR基因突變與性別及吸煙史的關(guān)系19-20
- 3.3.3 EGFR基因突變與分期及分化程度的關(guān)系20-23
- 第4章 討論23-27
- 第5章 結(jié)論27-29
- 參考文獻(xiàn)29-35
- 第6章 綜述 EGFR-TKI 術(shù)前新輔助靶向治療35-43
- 參考文獻(xiàn)40-43
- 攻讀碩士期間的科研成果43-45
- 致謝45
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:1130840
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