本文關(guān)鍵詞：siRNA干擾NBS1基因表達(dá)聯(lián)合順鉑對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231增殖、凋亡和周期的影響

  更多相關(guān)文章： 三陰性乳腺癌 NBS1 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡 順鉑

【摘要】：目的探討siRNA敲低NBS1基因表達(dá)聯(lián)合順鉑對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231增殖、凋亡和周期的影響。方法收集長(zhǎng)海醫(yī)院和瑞金醫(yī)院2001年至2011年間收治的乳腺癌患者,共收集乳腺癌標(biāo)本138例、正常癌旁乳腺組織97例,制作成組織芯片后,使用免疫組化方法明確NBS1蛋白在乳腺癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)情況。使用卡方檢驗(yàn)比較乳腺癌組織組與癌旁組織組中NBS1蛋白陽(yáng)性表達(dá)的比例。通過(guò)構(gòu)建NBS1干擾質(zhì)粒和陰性空載質(zhì)粒,并通過(guò)腺病毒載體感染三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞,蛋白印跡法明確NBS1基因表達(dá)受抑制情況；CCK-8法檢測(cè)干擾NBS1表達(dá)后順鉑對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞體外增殖能力的影響；流式細(xì)胞法檢測(cè)感染后實(shí)驗(yàn)組和陰性對(duì)照組MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡和周期情況。結(jié)果免疫組化結(jié)果顯示,乳腺癌組織組和癌旁正常組織組的NBS1表達(dá)的陽(yáng)性率分別是80.43%和15.46%,乳腺癌組織中NBS1的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于癌旁組織,經(jīng)卡方檢驗(yàn)p0.05,兩者陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。蛋白印跡法檢測(cè)結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)組NBS1蛋白表達(dá)水平明顯低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P0.05);CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,同時(shí)在順鉑的作用下,與陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖能力明顯受到抑制(P0.05)；流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組聯(lián)合順鉑與陰性對(duì)照組聯(lián)合順鉑相比凋亡率上升(P0.05)；流式細(xì)胞儀測(cè)定周期結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組聯(lián)合順鉑乳腺癌細(xì)胞出現(xiàn)G1期蓄積以及細(xì)胞進(jìn)入M期和G2期發(fā)生阻滯。結(jié)論敲低NBS1基因的表達(dá)可以抑制三陰性乳腺癌細(xì)胞增殖,并促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡。
【關(guān)鍵詞】：三陰性乳腺癌 NBS1 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡 順鉑
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.9
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 縮略詞表7-9
• 前言9-16
• 參考文獻(xiàn)14-16
• 第一部分 NBS1基因在乳腺癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及NBS1-siRNA干擾載體的構(gòu)建和篩選16-35
• 材料及方法16-28
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-32
• 討論32-35
• 第二部分 干擾NBS1基因表達(dá)聯(lián)合順鉑對(duì)三陰性乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞增殖、凋亡和周期的影響35-45
• 材料及方法35-40
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-42
• 討論42-45
• 參考文獻(xiàn)45-47
• 全文小結(jié)47-48
• 綜述 p16基因與乳腺癌關(guān)系的研究進(jìn)展48-56
• 參考文獻(xiàn)54-56
• 已發(fā)表文章56-57
• 致謝57

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1126035