本文關(guān)鍵詞：Plk1分子信號通路在類腫瘤干細胞靜息調(diào)控中的特征分析

  更多相關(guān)文章： 鹵蟲 類腫瘤干細胞 細胞靜息 Plk1 RSK1

【摘要】：鹵蟲是一種生活在高山鹽湖、海洋高鹽等極端環(huán)境的小型甲殼動物,它在地球上出現(xiàn)已有4億年之久,在漫長的進化過程中,它的形態(tài)、生理和生化方面幾乎沒有任何改變,但為了適應惡劣的環(huán)境,鹵蟲形成了兩套生殖及胚胎發(fā)育體系：即在環(huán)境適宜的條件下,鹵蟲主要是以卵胎生模式繁殖；當條件不適宜時,鹵蟲則會產(chǎn)生由密致幾丁質(zhì)殼包被的休眠卵,這種休眠卵的細胞周期處于靜息狀態(tài)(GO期),休眠卵經(jīng)過冷凍激活后,當遇到適宜的環(huán)境條件時,細胞靜息被打破重新啟動細胞分裂,進入胚胎發(fā)育并孵化出幼體。鹵蟲細胞周期的靜息與打破為研究細胞靜息與增值調(diào)控提供了適宜的材料。先前的研究表明,P1k1與RSK1信號通路與鹵蟲休眠胚胎的形成有關(guān),并且在鹵蟲休眠卵中,P1k1和RSK1的活性都是被抑制的。為了進一步研究Plk1、RSK1信號通路與細胞的靜息和打破靜息的關(guān)系,在鹵蟲的孵化過程中,用NM(去乙�；敢种苿�)處理,人為的使細胞周期處于靜息狀態(tài),之后撤去NM,細胞靜息被打破,在這個過程中,檢測了Plk1、MEK-ERK-RSK1信號通路分子的表達特征。實驗結(jié)果表明,在用NM處理細胞靜息時,Plk1、MEK表達量很低,而去掉NM后,Plk1、MEK的表達量又開始上升。這說明P1k1和RSK1信號通路參與了鹵蟲細胞的靜息與打破靜息的調(diào)節(jié)。在類腫瘤干細胞中進一步研究了P1k1和RSK1這條信號通路在細胞靜息調(diào)控中的作用,首先在胃癌細胞系MKN45中分選得到了類腫瘤干細胞,并通過PKH26標記找到了靜息的類腫瘤干細胞。通過研究靜息類腫瘤干細胞中P1k1,MEK-ERK-RSK1信號通路分子的表達特征,發(fā)現(xiàn)與處于旺盛有絲分裂的腫瘤細胞相比,在靜息的類腫瘤干細胞中P1k1,以及RSK1信號通路分子的表達量受到了明顯的抑制,這表明P1k1和RSK1信號通路參與了類腫瘤干細胞靜息的調(diào)控。在類腫瘤干細胞中,使用P1k1的抑制劑處理,結(jié)果表明處理組的細胞生長停滯,類腫瘤干細胞無法成球,同時發(fā)現(xiàn)RSK1信號通路受到了明顯的抑制。而用RSK1抑制劑處理抑制RSK1蛋白水平時,P1k1的活性增強,這說明RSK1可以反饋的促進P1k1的表達,P1k1作為MEK-ERK-RSK1信號通路的上游調(diào)節(jié)類腫瘤干細胞的增殖。癌癥是現(xiàn)在人類面臨最多的疾病之一。傳統(tǒng)的放療,化療,手術(shù)切除等方式并不能完全治愈癌癥,研究表明,在實體瘤中存在靜息的類腫瘤干細胞,這種細胞可以抵抗放療、化療等。所以以鹵蟲為研究模型動物,研究細胞的靜息機制對于腫瘤的科學研究提供了很多新的思路和方法。
【關(guān)鍵詞】：鹵蟲 類腫瘤干細胞 細胞靜息 Plk1 RSK1
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R73-3
【目錄】：

• 致謝6-8
• 摘要8-10
• Abstract10-13
• 縮略詞13-17
• 第1章 緒論17-27
• 1.1 研究背景17-26
• 1.1.1 鹵蟲概況17
• 1.1.2 鹵蟲休眠胚胎的發(fā)育過程17-18
• 1.1.3 Plk1激酶18-20
• 1.1.4 RSK1激酶20-21
• 1.1.5 腫瘤干細胞概述21-23
• 1.1.6 腫瘤干細胞的靜息23-26
• 1.2 研究目的、方法和意義26-27
• 第2章 Plk1,RSK1信號通路分子在鹵蟲細胞靜息與打破過程中的表達特征27-36
• 2.1 引言27-28
• 2.2 材料與儀器28
• 2.2.1 實驗材料28
• 2.2.2 實驗試劑28
• 2.2.3 主要儀器28
• 2.3 實驗方法28-32
• 2.3.1 去乙�；敢种苿�(NM)侵泡與移除28-29
• 2.3.2 總蛋白的提取29
• 2.3.3 Western blotting29-32
• 2.4 實驗結(jié)果32-34
• 2.4.1 鹵蟲孵化過程中的NM處理32-33
• 2.4.2 鹵蟲孵化NM處理與撤去過程中,Plk1和RSK1信號通路分子表達特征33-34
• 2.5 小結(jié)與討論34-36
• 第3章 類腫瘤干細胞的篩選及干性鑒定36-47
• 3.1 引言36-37
• 3.2 材料37
• 3.2.1 實驗材料37
• 3.2.2 主要試劑37
• 3.2.3 主要儀器37
• 3.3 實驗方法37-41
• 3.3.1 胃癌干細胞的分選37-38
• 3.3.2 類腫瘤干細胞的的再次篩選38-39
• 3.3.3 細胞培養(yǎng)39-40
• 3.3.4 細胞免疫熒光40-41
• 3.4 實驗結(jié)果41-45
• 3.4.1 類腫瘤干細胞的流式分選41-45
• 3.5 小結(jié)與討論45-47
• 第4章 類腫瘤干細胞靜息的鑒定47-55
• 4.1 引言47-48
• 4.2 材料48-49
• 4.2.1 實驗材料48
• 4.2.2 主要試劑48-49
• 4.2.3 主要儀器49
• 4.3 實驗方法49
• 4.3.1 PKH26染色方法49
• 4.3.2 細胞免疫熒光49
• 4.4 結(jié)果49-54
• 4.4.1 胃癌干細胞靜息的標記49-51
• 4.4.2 靜息類腫瘤干細胞的鑒定51-54
• 4.5 小結(jié)與討論54-55
• 第5章 Plk1,RSK1信號通路分子在靜息類腫瘤干細胞中的表達特征以及Plk1與RSK1信號通路的相互作用55-65
• 5.1 引言55-56
• 5.2 材料56-57
• 5.2.1 實驗材料56
• 5.2.2 主要試劑56-57
• 5.2.3 主要儀器57
• 5.3 實驗方法57
• 5.3.1 細胞的傳代與培養(yǎng)57
• 5.3.2 抑制劑的使用57
• 5.3.3 Western blotting57
• 5.4 實驗結(jié)果57-63
• 5.4.1 靜息類腫瘤干細胞中,Plk1和RSK1信號通路蛋白的表達特征57-60
• 5.4.2 Plk1抑制劑處理對于細胞分裂的影響60
• 5.4.3 Plk1抑制劑處理對RSK1信號通路的影響60-61
• 5.4.4 RSK1抑制劑對于Plk1的影響61-62
• 5.4.5 Plk1抑制劑和RSK1抑制劑共處理對于細胞分裂的影響62-63
• 5.5 小結(jié)與討論63-65
• 結(jié)論與展望65-66
• 1 結(jié)論65
• 2 展望65-66
• REFERENCES66-75
• 附錄一 常用試劑配制一覽表75-77
• 附錄二 作者簡歷77

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉麗萍;腫瘤誘導細胞獲得分離[J];國外醫(yī)學.藥學分冊;2003年05期

2 NellBoyce ,陶然;腫瘤干細胞:惡性腫瘤的種子[J];世界科學;2003年12期

3 任樂榮,劉玉琴;腫瘤干細胞研究進展[J];四川腫瘤防治;2004年01期

4 劉坤;腫瘤干細胞的研究現(xiàn)狀[J];國外醫(yī)學.口腔醫(yī)學分冊;2004年02期

5 邵世宏,姚運紅;干細胞、腫瘤干細胞與腫瘤的關(guān)系[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學;2005年03期

6 劉雨瀟,楊繼建,張惠茹,竇忠英;干細胞與腫瘤研究進展[J];中國農(nóng)學通報;2005年06期

7 鐘明媚,陳飛虎;腫瘤干細胞的研究進展[J];安徽醫(yī)藥;2005年08期

8 鐘明媚,陳飛虎,樊嘉祿;腫瘤干細胞與腫瘤治療[J];醫(yī)學與哲學;2005年08期

9 孫建聰,曾波航;腫瘤干細胞研究進展[J];廣州醫(yī)學院學報;2005年03期

10 周思朗;張積仁;;腫瘤干細胞[J];腫瘤防治研究;2005年11期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 胡以平;;關(guān)于腫瘤干細胞問題的一些思考[A];中國環(huán)境誘變劑學會第14屆學術(shù)交流會議論文集[C];2009年

2 甄紅英;王淑玲;;力達霉素抑制腫瘤干細胞的作用機制研究[A];2009醫(yī)學前沿論壇暨第十一屆全國腫瘤藥理與化療學術(shù)會議論文集[C];2009年

3 金潤銘;;腫瘤干細胞及其生物學特點[A];基因開啟未來：新時代的遺傳學與科技進步——湖北省遺傳學會第八次代表大會暨學術(shù)討論會論文摘要匯編[C];2009年

4 羅丁三;;基于中醫(yī)藥視角下的腫瘤干細胞研究進展[A];甘肅省中醫(yī)藥學會2013年學術(shù)年會論文集[C];2013年

5 陸士新;;腫瘤干細胞及其對腫瘤治療理念的影響[A];第三屆中國腫瘤內(nèi)科大會教育集暨論文集[C];2009年

6 湯永民;;腫瘤干細胞及其靶向治療[A];中國抗癌協(xié)會第七屆全國小兒腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2007年

7 張宏權(quán);;腫瘤干細胞與腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移[A];第九屆全國腫瘤轉(zhuǎn)移學術(shù)大會暨2011年黑龍江省醫(yī)學會腫瘤學年會報告集[C];2011年

8 吳沛宏;高飛;顧仰葵;;現(xiàn)代腫瘤微創(chuàng)治療進展[A];中國(第七屆)腫瘤微創(chuàng)治療學術(shù)大會暨世界影像導引下腫瘤微創(chuàng)治療學會成立籌備大會論文匯編[C];2011年

9 周凱旋;艾軍;單保恩;;腫瘤干細胞研究:一個漫長且不尋常的旅程[A];第十四屆中國科協(xié)年會第17分會場：環(huán)境危害與健康防護研討會論文集[C];2012年

10 譚亞軍;侯啟明;張庶民;;腫瘤干細胞研究的問題和進展[A];2012年中國藥學大會暨第十二屆中國藥師周論文集[C];2012年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 潘文;腫瘤干細胞為癌癥治療帶來新曙光[N];中國醫(yī)藥報;2006年

2 本版編輯邋海上飛魚 葛秋芳 王艷紅;揪出腫瘤的“元兇”——腫瘤干細胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2007年

3 潘文;腫瘤干細胞：為根治癌癥帶來新曙光[N];中國醫(yī)藥報;2007年

4 記者 葉芳 通訊員 黃金娟;化療可刺激普通腫瘤細胞變腫瘤干細胞[N];廣東科技報;2009年

5 記者 藍建中;滅腫瘤干細胞有望根治癌癥[N];新華每日電訊;2013年

6 香港麥迪信醫(yī)學出版有限公司供稿;腫瘤干細胞將成治癌新靶點[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2003年

7 記者 楊帆　實習生 楊周;“腫瘤干細胞研究”在渝實施[N];重慶日報;2009年

8 何雷;“973”計劃腫瘤干細胞項目啟動[N];健康報;2009年

9 記者 陳楓　通訊員 黃金娟 陳捚;廣東院士研究成果將影響癌癥治療策略[N];南方日報;2009年

10 高凡;化療或是癌癥復發(fā)根源[N];科學導報;2009年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊孟選;荷載腫瘤干細胞抗原的樹突細胞疫苗聯(lián)合糖脂類分子治療小鼠結(jié)腸癌的實驗研究[D];復旦大學;2014年

2 林鋮;人miR-489靶向p38α誘導腫瘤細胞自噬[D];浙江大學;2015年

3 孫翠翠;雙聯(lián)芐類化合物Riccardin D的抗腫瘤作用及機制研究[D];山東大學;2015年

4 孫蓉;納米載體同步輸送藥物用于腫瘤干細胞治療的研究[D];中國科學技術(shù)大學;2015年

5 趙志舉;miR-221對正常乳腺和乳腺腫瘤干細胞調(diào)控的研究[D];中國科學技術(shù)大學;2015年

6 蔡啟亮;CD44+腫瘤干/祖細胞在前列腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用和機制研究[D];天津醫(yī)科大學;2015年

7 劉紅;宮頸癌干細胞的分選及放療抵抗機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2016年

8 侯春英;MET-PI3K-Akt信號通路介導miRNA-31調(diào)控肺腺癌腫瘤干細胞功能[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2016年

9 李文新;靶向腫瘤干細胞“Akt-Oct4”調(diào)控通路的小分子藥物初步研究[D];浙江大學;2016年

10 葛春蕾;miR-942活化Wnt/β-catenin通路促進ESCC腫瘤干細胞干性的作用研究[D];昆明醫(yī)科大學;2015年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 邱暢;CD44聯(lián)合Prpc作為胃癌干細胞的初步研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

2 何文婷;載索拉非尼及蘿卜硫素介孔二氧化硅脂質(zhì)納米粒聯(lián)用體外抗腫瘤細胞與腫瘤干細胞作用研究[D];福建中醫(yī)藥大學;2015年

3 毛驍麗;穿膜肽聯(lián)合鹽霉素磷脂膠束靶向腫瘤干細胞的實驗研究[D];福建中醫(yī)藥大學;2015年

4 劉靜雯;脂質(zhì)納米粒介導的基因與化藥聯(lián)合治療乳腺癌腫瘤干細胞的研究[D];浙江大學;2016年

5 蔡璐;桑葉提取物（SangA）抗鼻咽癌活性研究[D];南方醫(yī)科大學;2013年

6 楊俊嶺;喉癌TU177細胞系中CD133~+CD44~+腫瘤干細胞分選及特性分析[D];山西醫(yī)科大學;2016年

7 李振華;Oct4自噬性降解促進腫瘤干細胞分化的分子機制[D];暨南大學;2016年

8 張哲;CD24在原發(fā)性非小細胞肺癌中的表達及臨床意義[D];鄭州大學;2016年

9 鄭帥;甲狀腺未分化癌耐藥和轉(zhuǎn)移中腫瘤干細胞和上皮細胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化作用的研究[D];南京醫(yī)科大學;2014年

10 王冬;乳腺癌腫瘤干細胞組蛋白甲基化的圖譜特征[D];中國科學院北京基因組研究所;2016年

，

本文編號：1114750