發(fā)布時(shí)間：2017-10-28 06:13

  本文關(guān)鍵詞：一種新型噻唑烷化合物誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡及其作用機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 噻唑烷化合物 YFZ-38 A549細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 Caspase酶

【摘要】：研究背景及目的:肺癌是威脅人類健康的惡性腫瘤之一,因肺癌而死亡的癌癥患者每年都有所上升。目前,肺癌的治療手段主要是化療,大多化療藥物有較大的毒副作用,且在治療后期容易引起耐藥。因此,尋找一種新型的肺癌化療藥物十分關(guān)鍵。近年來的研究發(fā)現(xiàn),噻唑烷化合物能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡,在癌癥的治療方面已有一定的應(yīng)用。鑒于噻唑烷化合物的抗腫瘤活性,本研究選擇一種新型的噻唑烷化合物YFZ-38,研究其對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞的作用機(jī)制,以期為肺癌的治療提供一定的理論依據(jù)。研究方法:建立裸鼠肺癌的移植瘤模型,觀察新型噻唑烷化合物YFZ-38對(duì)體內(nèi)腫瘤的抑制作用;以不同濃度的YFZ-38作用于體外培養(yǎng)的A549細(xì)胞,并用XTT法檢測(cè)細(xì)胞的存活率,分析其對(duì)A549細(xì)胞的抑制作用;采用倒置相差顯微鏡和熒光顯微鏡下觀察YFZ-38誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化,ELISA法檢測(cè)YFZ-38誘導(dǎo)的凋亡率,分析新型噻唑烷化合物YFZ-38對(duì)A549細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用;Caspase酶活檢測(cè)和ELISA法檢測(cè)YFZ-38對(duì)細(xì)胞凋亡的影響,Fas、mFasL和sFasL的檢測(cè)以及ZB4作用下細(xì)胞存活率的檢測(cè)等,分析YFZ-38誘導(dǎo)A549細(xì)胞的凋亡途徑。研究結(jié)果:新型噻唑烷化合物YFZ-38能抑制裸鼠皮下腫瘤的生長,且表現(xiàn)出時(shí)間與劑量依賴性;XTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示YFZ-38能抑制A549細(xì)胞增殖且有一定的劑量依賴性,而對(duì)正常的細(xì)胞毒性較小;細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示2.8μM/L的YFZ-38處理A549細(xì)胞48h可觀察到細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;ELISA法檢測(cè)結(jié)果顯示2.8μM/L和5.6μM/L的YFZ-38處理A549細(xì)胞能使核小體水平顯著增加,即能夠誘導(dǎo)A549細(xì)胞的凋亡,有一定的時(shí)間和劑量依賴性;對(duì)凋亡機(jī)制的研究表明YFZ-38能誘導(dǎo)A549細(xì)胞的凋亡,凋亡的途徑可能與線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及Fas有關(guān)。結(jié)論:1.YFZ-38能夠抑制體內(nèi)外A549細(xì)胞的增殖;2.YFZ-38能夠誘導(dǎo)A549細(xì)胞的凋亡;3.YFZ-38誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡的途徑可能與線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及Fas有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：噻唑烷化合物 YFZ-38 A549細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 Caspase酶
【學(xué)位授予單位】：曲阜師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一部分 前言8-14
• 1.1 研究背景8-13
• 1.1.1 肺癌概述8
• 1.1.2 噻唑烷化合物研究進(jìn)展8-9
• 1.1.3 細(xì)胞周期9-11
• 1.1.3.1 概述9
• 1.1.3.2 細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)9-10
• 1.1.3.3 細(xì)胞周期調(diào)控與腫瘤10-11
• 1.1.4 細(xì)胞凋亡11-13
• 1.1.4.1 概述11-12
• 1.1.4.2 細(xì)胞凋亡的信號(hào)通路12-13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙饬x13-14
• 第二部分 實(shí)驗(yàn)操作14-29
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料14-20
• 2.1.1 細(xì)胞系14
• 2.1.2 抗腫瘤藥物14
• 2.1.3 主要試劑14
• 2.1.4 主要儀器14-15
• 2.1.5 主要溶液及試劑配方15-20
• 2.1.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑15-17
• 2.1.5.2 細(xì)胞存活率檢測(cè)試劑17-18
• 2.1.5.3 細(xì)胞凋亡檢測(cè)所用試劑18-20
• 2.1.5.4 細(xì)胞內(nèi)Fas/FasL蛋白檢測(cè)所用試劑20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法20-28
• 2.2.1 YFZ-38的體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)20
• 2.2.2 A549細(xì)胞的傳代20-21
• 2.2.3 A549細(xì)胞的凍存21
• 2.2.4 A549細(xì)胞的復(fù)蘇及培養(yǎng)21-22
• 2.2.5 XTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率22
• 2.2.6 倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)22-23
• 2.2.7 蘇木精-伊紅實(shí)驗(yàn)檢測(cè)觀察形態(tài)學(xué)變化23-24
• 2.2.8 吉姆薩染色實(shí)驗(yàn)24-25
• 2.2.9 熒光顯微鏡觀察細(xì)胞核片段化25
• 2.2.10 Nucleosome ELISA檢測(cè)核小體水平25-26
• 2.2.11 Caspase試劑盒檢測(cè)酶活性26
• 2.2.12 細(xì)胞凋亡的ELISA檢測(cè)26-27
• 2.2.13 Fas、mFasL、sFasL的ELISA檢測(cè)27
• 2.2.14 Fas抑制劑ZB4作用下細(xì)胞存活率及其凋亡率的檢測(cè)27-28
• 2.3 數(shù)據(jù)處理28-29
• 第三部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論29-42
• 3.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-39
• 3.1.1 YFZ-38對(duì)體內(nèi)腫瘤生長的抑制作用29
• 3.1.2 XTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞存活率29
• 3.1.3 倒置相差顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)觀察29
• 3.1.4 HE染色檢測(cè)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化29
• 3.1.5 吉姆薩染色實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡形態(tài)29-30
• 3.1.6 熒光顯微鏡觀察細(xì)胞核片段化30
• 3.1.7 Nucleosome ELISA檢測(cè)核小體水平30
• 3.1.8 Caspase試劑盒檢測(cè)酶活性30
• 3.1.9 ELISA法檢測(cè)caspase酶抑制劑對(duì)YFZ-38誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡的影響30
• 3.1.10 Fas、mFasL、sFasL的檢測(cè)30-31
• 3.1.11 Fas抑制劑ZB4作用下細(xì)胞存活率及其凋亡率的檢測(cè)31-39
• 3.2 討論39-42
• 3.2.1 YFZ-38能抑制體內(nèi)外A549細(xì)胞的增殖39
• 3.2.2 YFZ-38誘導(dǎo)A549細(xì)胞的凋亡39-40
• 3.2.3 YFZ-38誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡機(jī)制的初步研究40-42
• 第四部分 結(jié)論與展望42-43
• 4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論42
• 4.2 展望42-43
• 附錄43-44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 致謝48

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 趙旭,宋宇彤,李福才;中心體異常相關(guān)基因的腫瘤學(xué)研究進(jìn)展[J];中國腫瘤;2003年07期

，

本文編號(hào)：1106979