本文關(guān)鍵詞：不同HER-2水平的人乳腺癌BT474細(xì)胞內(nèi)miRNAs表達(dá)譜及相關(guān)miRNAs對癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響

  更多相關(guān)文章： 乳腺腫瘤 miRNAs HER-2 hsa-miR-1827 hsa-miR-3653

【摘要】：目的:利用不同HER2水平的人乳腺癌細(xì)胞篩選出HER2相關(guān)的差異性表達(dá)譜,為mi RNAs通過參與HER2信號通路從而參與調(diào)控乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的機(jī)制提供研究基礎(chǔ)。方法:1.用脂質(zhì)體介導(dǎo)的干擾RNA技術(shù)沉默人乳腺癌細(xì)胞株BT474中HER2基因的表達(dá),應(yīng)用mi RNA基因芯片技術(shù),獲得mi RNAs在人乳腺癌細(xì)胞BT474和BT474/si RNA HER2內(nèi)的表達(dá)譜。2.篩選出具有顯著表達(dá)差異的hsa-mi R-1827和hsa-mi R-3653,應(yīng)用實時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)檢測驗證其在BT474和BT474/si RNA HER2細(xì)胞內(nèi)mi RNAs的差異性表達(dá)。3.分別轉(zhuǎn)染外源性hsa-mi R-1827 mimics和hsa-miR-3653 ASO。通過MTT法檢測細(xì)胞的增殖能力;采用Transwell侵襲實驗檢測細(xì)胞的侵襲能力;并應(yīng)用細(xì)胞劃痕實驗和Transwell遷移實驗檢測細(xì)胞的遷移能力。4.應(yīng)用生物信息學(xué)對hsa-mi R-1827和hsa-mi R-3653進(jìn)行與HER2相關(guān)的信號通路的初步預(yù)測。結(jié)果:1.mi RNAs芯片結(jié)果顯示:在人乳腺癌BT474細(xì)胞和BT474/si RNA HER2細(xì)胞內(nèi),差異表達(dá)的mi RNAs變化倍數(shù)2倍且具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),有338個mi RNAs與HER2相關(guān);其中hsa-mi R-345-3p、hsa-mi R-4292、hsa-mi R-4755-5p和hsa-mi R-1827等110個mi RNAs上調(diào),hsa-mi R-208a-3p、hsa-mi R-3074-3p、hsa-mi R-4460和hsa-mi R-3653等228個mi RNAs下調(diào)。2.應(yīng)用q RT-PCR技術(shù)檢測驗證:與細(xì)胞株BT474相比,在BT474/si RNA HER2內(nèi),hsa-mi R-1827顯著上調(diào),hsa-mi R-3653顯著下調(diào)(P0.05)。3.BT474細(xì)胞轉(zhuǎn)染hsa-mi R-1827 mimics后顯示劃痕之后24h、48h其愈合速度明顯慢于NC組,hsa-mi R-3653 ASO組劃痕愈合速度明顯慢于ASO NC組。4.BT474細(xì)胞轉(zhuǎn)染hsa-mi R-1827 mimics后細(xì)胞增殖活力與轉(zhuǎn)染NC組相比顯著下調(diào);BT474細(xì)胞轉(zhuǎn)染hsa-mi R-3653 ASO后細(xì)胞增殖活力與轉(zhuǎn)染ASO NC組相比明顯下調(diào)。5.BT474細(xì)胞轉(zhuǎn)染hsa-mi R-1827 mimics組侵出小室的細(xì)胞數(shù)與NC組相比明顯減少,而BT474細(xì)胞轉(zhuǎn)染hsa-mi R-3653 ASO組侵出小室的細(xì)胞數(shù)與ASO NC組相比明顯減少。6.生物信息學(xué)方法預(yù)測hsa-mi R-1827和hsa-mi R-3653信號通路可能與HER2直接或間接相關(guān)聯(lián)。結(jié)論:1.干預(yù)人乳腺癌細(xì)胞BT474 HER2水平可獲得mi RNA表達(dá)譜。2.下調(diào)人乳腺癌細(xì)胞BT474 HER2水平,可使hsa-mi R-1827表達(dá)上調(diào),相反,hsa-mi R-3653下調(diào)。3.hsa-mi R-1827可抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和遷移能力,hsa-mi R-3653可增強(qiáng)乳腺癌細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和遷移能力。4.生物信息學(xué)預(yù)測提示hsa-mi R-1827和hsa-mi R-3653可能通過與HER2相關(guān)信號通路調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：乳腺腫瘤 miRNAs HER-2 hsa-miR-1827 hsa-miR-3653
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 1 引言11-13
• 2 材料與方法13-28
• 3 結(jié)果28-40
• 4 討論40-46
• 6 結(jié)論46
• 7 小結(jié)46-47
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 附錄52-54
• 致謝54-55
• 綜述55-62
• 參考文獻(xiàn)60-62

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本文編號：1101422