本文關(guān)鍵詞：鹽霉素對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞體外增殖和凋亡的影響

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【摘要】：目的探討鹽霉素是否具有抑制人宮頸癌Hela細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)其凋亡的作用,并從分子水平研究鹽霉素對(duì)Hela細(xì)胞生長可能的調(diào)控機(jī)制方法(1)將培養(yǎng)后的人宮頸癌Hela細(xì)胞以每孔5000個(gè)細(xì)胞濃度種入雙96孔板,培養(yǎng)24小時(shí)后,分別隨機(jī)選取12孔,其中一組為空白對(duì)照組,余九組加入鹽霉素,濃度分別為0、0.375、1.5、6、12、24、48、96、120μg/m L,其中0μg/m L組為陰性對(duì)照組,通過酶標(biāo)儀測(cè)出藥物作用24h、48h、72h的OD值,繪制出抑制率與鹽霉素濃度和作用時(shí)間的關(guān)系圖;(2)根據(jù)上述結(jié)果,篩選出細(xì)胞接近IC50的鹽霉素濃度,分別為6、12、24μg/m L三組,同上法設(shè)對(duì)照組,將2ml細(xì)胞濃度為5×105/ml的細(xì)胞接種于6孔板上,培養(yǎng)24h以后,分別向各孔加入濃度為0、6、12、24μg/m L鹽霉素,24h后收集細(xì)胞,離心固定,PI染色,流式細(xì)胞儀測(cè)出各組細(xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡率;(3)同上分組法,將10ml細(xì)胞濃度為5×106/ml的細(xì)胞懸液分別加入到5塊培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)24h后,分別向各培養(yǎng)皿加入濃度為0、6、12、24μg/m L鹽霉素,24h后提取各組細(xì)胞總蛋白,Western Blot法檢測(cè)Bax、Bcl-2、caspase-3基因表達(dá)。結(jié)果(1)cck-8法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),0.375-120μg/mL的濃度范圍內(nèi)的鹽霉素作用Hela細(xì)胞24-72h后,細(xì)胞增殖抑制率由0.89%上升至96.35%,鹽霉素對(duì)Hela細(xì)胞增殖的抑制作用與鹽霉素濃度及作用時(shí)間呈正相關(guān)關(guān)系,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)鹽霉素干預(yù)24小時(shí)后的Hela細(xì)胞凋亡情況。發(fā)現(xiàn)Hela細(xì)胞凋亡率由(11.15±0.70)%上升至(45.1±0.21)%。且凋亡率隨濃度增加而呈線性上升,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)流式細(xì)胞儀檢測(cè)鹽霉素干預(yù)24小時(shí)后的Hela細(xì)胞周期分布情況。發(fā)現(xiàn)當(dāng)鹽霉素濃度由6μg/m L升高為24μg/m L時(shí),處于G0/G1期的細(xì)胞由(59.56±0.93)%升高至(74.31±0.57)%,且鹽霉素濃度越高對(duì)G0/G1期的阻滯越明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),處于G2期和S期的變化無明顯規(guī)律;(4)Western Blot法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),藥物組Bcl-2蛋白表達(dá)明顯低于陰性對(duì)照組,且與濃度負(fù)相關(guān),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),Bax蛋白和Caspase-3蛋白表達(dá)明顯高于陰性對(duì)照組,且與濃度呈正相關(guān),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論(1)鹽霉素對(duì)人宮頸癌細(xì)胞Hela的體外增殖有較強(qiáng)的抑制效應(yīng),且具有良好的濃度依賴性和時(shí)間依賴性;(2)鹽霉素可誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡,其機(jī)制可能是通過增強(qiáng)bax、caspase-3基因的表達(dá)、減少bcl-2基因的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：鹽霉素 Hela細(xì)胞抑制率 Bax Bcl-2 caspase-3
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.33
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 主要縮略英文索引9-11
• 前言11-13
• 實(shí)驗(yàn)材料13-15
• 實(shí)驗(yàn)方法15-21
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-37
• 討論37-43
• 結(jié)論43-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 文獻(xiàn)綜述: 子宮頸癌的治療前景51-57
• 參考文獻(xiàn)54-57
• 碩士期間發(fā)表的論文57-59
• 致謝59

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 鄒向陽;李連宏;;細(xì)胞周期調(diào)控與腫瘤[J];國際遺傳學(xué)雜志;2006年01期

2 ;Expression of Fas ligand and Caspase-3 contributes to formation of immune escape in gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2003年07期

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本文編號(hào)：1092601