本文關(guān)鍵詞：血清e(cuò)xosome中miR-221與胃癌卵巢轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究

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【摘要】：目的:Exosome是由細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的,大小約為30-140nm的膜性小囊泡,其內(nèi)含有各種類型的核酸,蛋白質(zhì),脂類物質(zhì)。Exosome內(nèi)含的miRNA-221與非編碼RNA進(jìn)行堿基配對(duì)可通過(guò)信號(hào)通路介導(dǎo)促進(jìn)上皮間質(zhì)化Epithelial-to-mesenchymal transition(EMT)使腫瘤更易發(fā)生轉(zhuǎn)移。因此檢測(cè)胃癌患者血清e(cuò)xosome內(nèi)miRNA的含量是否能作為生物學(xué)指標(biāo)來(lái)判斷胃癌分期和是否轉(zhuǎn)移,從而指導(dǎo)治療。方法:共收集2014年6月至2016年3月入住湖南省腫瘤醫(yī)院胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者血清30份(實(shí)驗(yàn)組)。入組標(biāo)準(zhǔn)為:(1)已通過(guò)胃鏡、病理活檢、超聲內(nèi)鏡、CT、B超確診為胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者;(2)未發(fā)現(xiàn)有其它的原發(fā)腫瘤;(3)患者未接受放化療、中藥治療等輔助治療;(4)非胃癌復(fù)發(fā)患者。30份未發(fā)生胃癌卵巢轉(zhuǎn)移的女性患者血清(對(duì)照組)。入組標(biāo)準(zhǔn)為:(1)已通過(guò)胃鏡活檢、超聲內(nèi)鏡、CT、B超確診為胃癌;(2)未發(fā)現(xiàn)有胃癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移;(3)未發(fā)現(xiàn)有其它的原發(fā)腫瘤;(4)患者未接受放化療、中藥治療等輔助治療;(5)非胃癌復(fù)發(fā)患者。對(duì)抽取的血清樣本于3000g離心15分鐘去除細(xì)胞或細(xì)胞碎片;將上清轉(zhuǎn)移至另一干凈的滅菌管中,加入適量的ExoQuick TC試劑;上下顛倒離心管,混勻;4℃孵育過(guò)夜(至少12小時(shí));室溫或4℃1500g離心30min,管底可見沉淀;去除上清;1500g繼續(xù)離心5min,小心去除上層的液體組分;用100-500ul buffer重懸沉淀。通過(guò)western blot檢測(cè)CD9、CD63來(lái)證實(shí)exosome提取成功。TRIzol法來(lái)對(duì)exsome中5種miRNA(miR-221、miR-376c、miR-744、miR-451、miR-486)進(jìn)行提取。然后通過(guò)PCR實(shí)驗(yàn)來(lái)對(duì)比試驗(yàn)組和對(duì)照組miRNA含量。結(jié)果:為了探究胃癌卵巢轉(zhuǎn)移與非轉(zhuǎn)移病人血清中exosome的miRNA的表達(dá)是否與胃癌卵巢轉(zhuǎn)移呈相關(guān)性,我們選取了5種在癌癥病人血清e(cuò)xosome中高表達(dá)的miRNA進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)在胃癌卵巢轉(zhuǎn)移病人相比于未發(fā)生胃癌卵巢轉(zhuǎn)移病人血清e(cuò)xosome中miR-221的含量有顯著性差異(P0.01),胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者血清e(cuò)xosome中miR-221的含量呈明顯的高表達(dá),其它exosome中內(nèi)含的miRNA如miR-376c、miR-774、miR-451和miR-486在胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者和非轉(zhuǎn)移病人血清中含量沒(méi)有顯著性差異。為了更細(xì)致分析地血清e(cuò)xosome中miR-221在不同年齡段胃癌卵巢轉(zhuǎn)移病人的差異性,將胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者按年齡分為20-40歲、40-60歲、60歲以上三組,其中20-40歲組患者相比于其他年齡段患者血清e(cuò)xosome中miR-221呈更高的表達(dá)水平。結(jié)論:1.胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者血清e(cuò)xosome中miR-221呈明顯高表達(dá)。2.血清e(cuò)xosome中miR-221有作為診斷胃癌卵巢轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)的可能。3.胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者血清e(cuò)xosome中miR-221含量還與年齡相關(guān),20-40歲患者中該指標(biāo)更高,預(yù)示著更明顯的特征。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 exosome 微小RNA-221(miR-221) 胃癌卵巢轉(zhuǎn)移的診斷 腫瘤微環(huán)境
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 主要縮略詞中英文對(duì)照索引9-12
• 第1章 緒論12-16
• 1.1 胃癌概述12-13
• 1.2 腫瘤與exosome的關(guān)系13
• 1.3 腫瘤與miRNA的關(guān)系13-16
• 第2章 材料與方法16-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本16-17
• 2.2 抗體與試劑17
• 2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器17
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法17-21
• 2.4.1exosome的提取17-18
• 2.4.2 TRIzol法提RNA18-19
• 2.4.3 定量PCR實(shí)驗(yàn)19-20
• 2.4.4 western blot20-21
• 2.5 統(tǒng)計(jì)分析21-24
• 第3章 結(jié)果24-30
• 3.1 通過(guò)檢測(cè)測(cè)CD9和CD63證實(shí)exosome提取成功24-25
• 3.2 血清e(cuò)xosome中miRNA和胃癌卵巢轉(zhuǎn)移的關(guān)系25-28
• 3.3 各年齡段胃癌卵巢轉(zhuǎn)移患者血清e(cuò)xosome中miR-221表達(dá)水平28-30
• 第4章 討論30-34
• 4.1 Exosome在胃癌中作用30
• 4.2 MiR-221在胃癌中的作用30-32
• 4.3 血清Exosome中miRNA作為診斷胃癌卵巢轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)的潛力32-33
• 4.4 展望33-34
• 第5章 結(jié)論34-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 綜述 Exsome在癌癥診斷與治療中的研究進(jìn)展40-52
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果52-54
• 致謝54

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1 王東關(guān);孫善珍;王振光;王霞;;腫瘤exosome誘導(dǎo)特異性T殺傷細(xì)胞的研究[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年02期

2 王東關(guān);孫善珍;王振光;施琳;王霞;;腫瘤exosome誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性T細(xì)胞的特異性殺傷作用[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年02期

3 張?jiān)谠?李希德;劉葉;王志侖;潘祥林;;肺癌細(xì)胞裂解物負(fù)載對(duì)樹突狀細(xì)胞分泌的exosome誘導(dǎo)抗腫瘤作用的影響[J];山東醫(yī)藥;2011年31期

4 薩仁高娃;吳巖;肖文華;;exosome與腫瘤免疫治療的研究進(jìn)展[J];感染.炎癥.修復(fù);2008年03期

5 金錚;于金錄;楊Pr;李超;黃海燕;;膠質(zhì)瘤來(lái)源exosome的鑒定及其蛋白質(zhì)組成研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2010年09期

6 杜嘉瑞;張路遙;楊洪發(fā);別黎;徐惠勇;陳立兵;鞠硯;;膠質(zhì)瘤細(xì)胞來(lái)源exosome的鑒定及其蛋白組成研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2008年01期

7 張堯;張家摸;何百成;羅春麗;吳小候;;腎癌細(xì)胞來(lái)源exosome的制備和免疫相關(guān)蛋白組成的初步研究[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2010年01期

8 元小寧;朱運(yùn)峰;;外泌體(Exosome)及其在腫瘤調(diào)控中的作用[J];中國(guó)生物工程雜志;2013年08期

9 沈宜;向自武;陳國(guó)慶;謝瑩珊;鄭維萍;;As_2O_3聯(lián)合H_(22)源exosome的抗腫瘤作用研究[J];激光雜志;2009年04期

10 耿建;金潔;陳龍邦;;以exosome為基礎(chǔ)的腫瘤免疫治療研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2006年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 秦霞;邱峰;;近年來(lái)國(guó)內(nèi)外關(guān)于exosome研究的文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)分析[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

2 張琳;鄭桂娜;萬(wàn)宇峰;郭一鳴;魏盼盼;郭金虎;;exosome復(fù)合物對(duì)生物鐘基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控研究[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進(jìn)步推動(dòng)中國(guó)西部經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展——2011年中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)大會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

3 顧麗亞;惠杰;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞exosome對(duì)自身心肌分化及抗凋亡實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)心血管病學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2013年

4 孫禎;宋亞軍;黃赤兵;;大鼠腸系膜淋巴結(jié)和外周淋巴結(jié)固有exosome的制備[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

5 徐保鋒;黃海燕;關(guān)毅;吳宣萱;;膠質(zhì)瘤源性exosome的研究進(jìn)展[A];2011中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

6 Hong-Wei Wang;;Alternative pathways of RNA recruitment in yeast exosome revealed by single particle electron microscopy[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告一[C];2014年

7 ;Characterations and functions of exosome[A];2012全國(guó)臨床微生物與感染免疫學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

8 孫禎;黃赤兵;;各淋巴組織源性exosome的收集方法比較的研究[A];2012中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2012年

9 宋亞軍;黃赤兵;;探討小鼠腸系膜淋巴結(jié)exosome對(duì)外周血T細(xì)胞增殖的影響[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

10 卜寧;孫秉中;李奇靈;于華;;K562細(xì)胞分泌的exosome電鏡標(biāo)本的制備及觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王汝霖;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源exosome對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 呂林懋;心肌成纖維細(xì)胞來(lái)源的exosome在血管緊張素-2誘導(dǎo)的心肌肥大中的作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

3 胡藝冰;腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞分泌exosome增強(qiáng)腫瘤干細(xì)胞化療耐藥性研究[D];華中科技大學(xué);2015年

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5 紀(jì)潤(rùn)璧;MSC及其exosome在胃炎/癌微環(huán)境中的作用與機(jī)制研究[D];江蘇大學(xué);2015年

6 樓國(guó)華;攜帶miRNA的間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體抗肝癌研究[D];浙江大學(xué);2016年

7 應(yīng)后群;非編碼RNA作為CRC風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、療效預(yù)后判斷和臨床診斷標(biāo)志物研究[D];東南大學(xué);2016年

8 卜寧;慢性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞分泌的exosome的抗白血病作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

9 王東關(guān);負(fù)載exosome的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗舌鱗癌效應(yīng)的研究[D];山東大學(xué);2006年

10 彭澎;卵巢癌患者腹水來(lái)源exosome對(duì)機(jī)體抗卵巢癌免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究及其蛋白質(zhì)組成分析[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

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1 周葉;冠心病人血清外泌體miRNA表達(dá)譜分析[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

2 劉振方;CD151在直腸癌組織及尿液exosome小體中表達(dá)的對(duì)比研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 王碩;外周血exosome中miRNA在肝癌中的臨床意義[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

4 呂浩;不同預(yù)處理方法對(duì)MSCs分泌的exosomes免疫調(diào)節(jié)功能影響的研究[D];蘇州大學(xué);2015年

5 廖克曼;miR-150*通過(guò)修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的exosome影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖凋亡的相關(guān)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊燕;X-射線照射后A549細(xì)胞釋放的exosome對(duì)同源細(xì)胞及巨噬細(xì)胞功能的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 朱迎星;尿液exosome分離方法研究[D];江蘇大學(xué);2016年

8 余勝超;惡性瘧原蟲exosome-like催化亞基的鑒定與降解特性分析[D];吉林大學(xué);2016年

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