發(fā)布時(shí)間：2017-10-23 21:04

  本文關(guān)鍵詞：內(nèi)源性朊蛋白在結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌中的作用的研究

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【摘要】：朊蛋白(Prion protein,PrP)是朊病毒的正常型異構(gòu)體,PrP可通過(guò)構(gòu)型的改變轉(zhuǎn)化成朊病毒。前期對(duì)PrP的研究主要集中在其在朊病毒類疾病中的作用,然而PrP除在腦中表達(dá)外也廣泛的在其它組織中有表達(dá),這提示人們PrP應(yīng)該具有其它重要的生理作用。我們前期的胃癌組織芯片的數(shù)據(jù)顯示PrP在腫瘤中的表達(dá)量顯著低于癌旁組織,因而PrP有可能對(duì)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展起作用。本研究通過(guò)在PrP基因敲除小鼠(PrP-/-)和野生小鼠(WT)中構(gòu)建偶氮甲烷(AO M)與葡聚糖硫酸鈉鹽(DSS)誘導(dǎo)結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌模型對(duì)PrP在結(jié)腸癌中的作用進(jìn)行研究。在AOM/DSS聯(lián)合誘導(dǎo)的結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌模型的三種給藥方案中(AOM×6+2%DSS×1,AOM×1+O.5％DSS×3,AOM×1+1%DSSx3),均成功誘導(dǎo)出腫瘤,而且PrP-/-組小鼠在腫瘤個(gè)數(shù)上顯著高于WT組小鼠(P=0.014,0.0071和0.0086)。在DSS單獨(dú)誘導(dǎo)結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌模型的兩種給藥方案中(0.5%DSS×3.1%DSS×3),雖然低劑量(0.5%DSS)給藥方案未誘導(dǎo)出腫瘤,但組織病理學(xué)指數(shù)顯示PrP-/-小鼠較野生型小鼠(wide-type,WT)具有更嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)(P0.001)。另一種給藥方案成功誘導(dǎo)出腫瘤,而且PrP-/-組小鼠在腫瘤個(gè)數(shù)上顯著高于WT組小鼠(JP＝0.0015)。Ki-67免疫組化結(jié)果顯示兩種基因型小鼠腫瘤間的Ki-67標(biāo)記指數(shù)之間不存在顯著差異,但正常未處理PrP-/-小鼠顯著高于WT小鼠(P0.001)。上述結(jié)果顯示PrP可能在保護(hù)結(jié)腸上皮細(xì)胞防止癌變和抑制細(xì)胞增殖上具有重要作用。
【關(guān)鍵詞】：朊蛋白 葡聚糖硫酸鈉鹽 偶氮甲烷 結(jié)腸炎 結(jié)腸癌
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.35;R574.62
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-10
• 前言10-13
• 一. 實(shí)驗(yàn)材料13-20
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.2 主要試劑13-15
• 1.3 主要工作液配方15-17
• 1.4 主要儀器17-18
• 1.5 實(shí)驗(yàn)器材18-20
• 二. 實(shí)驗(yàn)方法20-32
• 2.1 實(shí)驗(yàn)小鼠的飼養(yǎng)和繁殖20
• 2.2 小鼠組織DNA的抽提20-21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)小鼠基因型的PCR鑒定21-22
• 2.4 小鼠組織蛋白抽提22-23
• 2.5 BCA法測(cè)定蛋白濃度23
• 2.6 Western Blot檢測(cè)不同組織中的PrP表達(dá)23-24
• 2.7 小鼠結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌模型的構(gòu)建24-26
• 2.8 小鼠的處死與解剖取結(jié)腸26
• 2.9 石蠟切片的制備26-27
• 2.10 HE染色27-28
• 2.11 組織病理學(xué)變化指數(shù)(Histopathological change index,HCl)評(píng)分與腫瘤病理診斷28-29
• 2.12 免疫組織化學(xué)(IHC)染色29-31
• 2.13 Ki-67標(biāo)記指數(shù)(labeling index,LI)31
• 2.14 數(shù)據(jù)分析31-32
• 三 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-48
• 3.1 實(shí)驗(yàn)小鼠的繁殖與基因型鑒定32
• 3.2 Western Blot檢測(cè)不同組織中PrP的表達(dá)32-33
• 3.3 小鼠結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌模型的構(gòu)建結(jié)果33-41
• 3.4 組織病理學(xué)變化指數(shù)(Histopathological change index,HCl)評(píng)分結(jié)果41-42
• 3.7 小鼠結(jié)腸癌HE染色與病理診斷的結(jié)果42-45
• 3.8 Ki-67免疫組化染色結(jié)果45-48
• 四 討論48-51
• 綜述51-55
• 參考文獻(xiàn)55-60
• 致謝60-61
• 附錄61-62
• 附件62-65

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1 朱小玲;劉永生;張杰;吳潤(rùn);陳豪泰;姜海霞;路偉;謝慶閣;;秦川黃牛成熟朊蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2006年09期

2 杜芬;梅芳華;肖庚富;梁毅;;牛朊蛋白理化性質(zhì)分析及其多克隆抗體的制備[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年05期

3 劉雯,左O;朊蛋白及朊蛋白疾病[J];中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志;1997年06期

4 郭英;朊蛋白疾病[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2001年10期

5 孫晗;劉存歧;;重組人朊蛋白成纖維研究進(jìn)展[J];科技信息;2012年14期

6 許彩民,潘華珍;朊蛋白研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè));2001年03期

7 彭麗;胡萍萍;李原芳;;α,β,γ,δ-四(對(duì)磺苯基)卟啉與細(xì)胞型朊蛋白的體外作用研究[J];西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年03期

8 肖賽金;胡萍萍;譚克俊;甄淑君;黃承志;;肝素誘導(dǎo)人細(xì)胞型朊蛋白構(gòu)象變化的光譜表征[J];化學(xué)學(xué)報(bào);2010年10期

9 呼志斌;吳潤(rùn);劉湘濤;陳建華;趙春林;;黃牛朊蛋白原核表達(dá)產(chǎn)物的復(fù)性與活性分析[J];蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年04期

10 張杰;李朝陽(yáng);徐江;;朊蛋白在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展及展望[J];實(shí)用腫瘤雜志;2014年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 苑方重;張珠明;趙德明;;金屬離子與朊蛋白疾病[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)——第二屆中國(guó)獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集(上冊(cè))[C];2010年

2 管峰;石國(guó)慶;楊利國(guó);;乳中朊蛋白及安全性研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物繁殖學(xué)分會(huì)第十五屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2010年

3 陶利明;王志亮;;朊蛋白基因結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)畜牧獸醫(yī)生物技術(shù)學(xué)分會(huì)暨中國(guó)免疫學(xué)會(huì)獸醫(yī)免疫分會(huì)第六次研討會(huì)論文集[C];2005年

4 寧章勇;趙德明;;朊蛋白基因在金黃地鼠腦和外周組織的動(dòng)態(tài)表達(dá)定量[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分會(huì)第十三次學(xué)術(shù)討論會(huì)和中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)動(dòng)物病理生理專業(yè)委員會(huì)第十二次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2005年

5 寧章勇;趙德明;于博;孔小明;;處理重組牛朊蛋白對(duì)接種金黃地鼠腦組織朊蛋白的效應(yīng)[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分會(huì)第十四次學(xué)術(shù)研討會(huì)、中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)動(dòng)物病理生理專業(yè)委員會(huì)第十三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

6 張珠明;趙德明;;朊蛋白基因多態(tài)性與動(dòng)物傳染性海綿狀腦病[A];中國(guó)微生物學(xué)會(huì)微生物資源專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)暨第一屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2009年

7 俞國(guó)華;陳建泉;俞慧清;劉思國(guó);張愛民;陳娟;徐旭俊;沙紅英;吳友兵;張緒峰;吳國(guó)祥;徐少甫;成國(guó)祥;;通過(guò)體細(xì)胞基因打靶制備朊蛋白基因敲除山羊[A];中國(guó)生物工程學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)暨全國(guó)生物反應(yīng)器學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2006年

8 楊秀進(jìn);楊利峰;趙德明;;牛、羊、人等六種朊蛋白的全真表達(dá)、純化及復(fù)性方法的研究[A];第四屆全國(guó)微生物資源學(xué)術(shù)暨國(guó)家微生物資源平臺(tái)運(yùn)行服務(wù)研討會(huì)論文集[C];2012年

9 趙德明;;動(dòng)物傳染性海綿狀腦病研究進(jìn)展[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)病理學(xué)分會(huì)第十三次學(xué)術(shù)討論會(huì)和中國(guó)病理生理學(xué)會(huì)動(dòng)物病理生理專業(yè)委員會(huì)第十二次學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2005年

10 陳豪泰;張杰;劉永生;吳潤(rùn);;羊與麝朊蛋白基因的序列差異[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2006學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 通訊員 劉克元 特約記者 徐雅金;重組朊蛋白可抑制“瘋牛病”傳播[N];健康報(bào);2013年

2 ;美國(guó)“新牛”不染瘋牛病[N];天津日?qǐng)?bào);2007年

3 本文由香港麥迪信醫(yī)學(xué)出版有限公司供稿;“垃圾處理”系統(tǒng)失靈[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 寧璐璐;朊蛋白錯(cuò)誤折疊和聚集機(jī)制的分子動(dòng)力學(xué)模擬研究[D];蘭州大學(xué);2015年

2 宮彬彬;N-端23-30位氨基酸對(duì)朊蛋白胞吞、抗氧化功能及繁殖影響的研究[D];吉林大學(xué);2011年

3 寧章勇;朊蛋白基因表達(dá)與傳染性海綿狀腦病發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

4 張吉斌;抗—牛朊蛋白單鏈抗體檢測(cè)系統(tǒng)的構(gòu)建、表征與應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

5 張杰;哺乳動(dòng)物朊蛋白與疊朊的原核表達(dá)及牛朊蛋白單抗制備[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2006年

6 周拯;大分子擁擠環(huán)境中朊蛋白錯(cuò)誤折疊機(jī)制研究[D];武漢大學(xué);2009年

7 胡萍萍;基于朊蛋白—核酸適配子相互作用的朊蛋白定量生物學(xué)研究[D];西南大學(xué);2014年

8 吳潤(rùn);偶蹄動(dòng)物朊蛋白基因結(jié)構(gòu)特征及其重組蛋白抗原性的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

9 刁小龍;雞朊蛋白參與DF-1細(xì)胞增殖粘附的功能研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

10 梅芳華;牛、鼠、兔朊蛋白理化性質(zhì)比較及朊蛋白的互作蛋白KCTD1的分析[D];武漢大學(xué);2014年

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1 施沖旭;PRRSV的分離鑒定及其對(duì)Marc-145細(xì)胞型朊蛋白表達(dá)影響的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

2 孫紅玉;α-聚賴氨酸提高谷朊蛋白酶促交聯(lián)及其膜材料性能的研究[D];江南大學(xué);2015年

3 張寶紅;過(guò)氧釩配合物抑制朊蛋白淀粉樣肽的纖維形成[D];中北大學(xué);2016年

4 鞏昌國(guó);內(nèi)源性朊蛋白在結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)腸癌中的作用的研究[D];華東師范大學(xué);2016年

5 羅鵬;雞朊蛋白的抗血清制備及其在神經(jīng)系統(tǒng)中的分布[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

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8 馬俊俊;利用酵母雙雜交系統(tǒng)確定細(xì)胞型朊蛋白與浮艦蛋白相互作用的分子區(qū)域[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

9 梅國(guó)勇;朊蛋白與信號(hào)蛋白14-3-3β相互作用的研究[D];安徽理工大學(xué);2009年

10 彭麗;基于核酸適配子和納米顆粒的朊蛋白檢測(cè)及活細(xì)胞標(biāo)記成像研究[D];西南大學(xué);2011年

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