本文關(guān)鍵詞：苯并（a）芘對(duì)幽門螺桿菌CagA的影響及對(duì)胃上皮細(xì)胞增殖的影響

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【摘要】：目的胃癌是目前全世界最常見的惡性腫瘤之一。幽門螺桿菌是胃癌發(fā)生最主要的危險(xiǎn)因素,幽門螺桿菌陽性者胃癌發(fā)生的危險(xiǎn)是幽門螺桿菌陰性者的3-6倍。苯并(a)芘(BaP)是一種常見環(huán)境致癌物,已有研究表明長期吃燒烤、油炸類食物以及吸煙均是胃癌的危險(xiǎn)因素。研究表明燒烤、油炸食品與幽門螺桿菌感染關(guān)系密切,長期食用燒烤食品者幽門螺桿菌感染率更高。本實(shí)驗(yàn)的目的是研究BaP對(duì)幽門螺桿菌增殖能力及其毒力因子表達(dá)的影響,并將BaP和幽門螺桿菌共同作用于胃粘膜上皮細(xì)胞GES-1,檢測(cè)對(duì)GES-1細(xì)胞增殖活性的影響。為幽門螺桿菌與環(huán)境因素在導(dǎo)致胃癌過程中是否有協(xié)同作用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法在幽門螺桿菌培養(yǎng)過程中加入不同濃度BaP (0.2,0.5,1.0,2.0 μmol/L),并設(shè)置空白對(duì)照組(BaP 0.0 μmol/L)及二甲基亞砜(DMSO)溶質(zhì)對(duì)照組。設(shè)置三個(gè)時(shí)間點(diǎn)(24,48,72 h)。分別檢測(cè)各濃度組及時(shí)間點(diǎn)幽門螺桿菌增殖能力變化；RT-PCR檢測(cè)幽門螺桿菌CagA mRNA表達(dá)水平。將幽門螺桿菌稀釋菌液100μL按不同細(xì)菌/細(xì)胞比(MOI 20：1,50：1,100：1,200：1,400：1)以及將不同濃度BaP溶液10 μL(0.2,0.5,1.0,2.0μmol/L)分別作用于GES-1細(xì)胞24 h；將各濃度BaP及幽門螺桿菌稀釋菌液(MOI 20：1)共同作用于GES-1細(xì)胞24 h。最后用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力。結(jié)果BaP能促進(jìn)幽門螺桿菌增殖。BaP1.0 μmol/L、2.0μmol/L在24h對(duì)幽門螺桿菌增殖的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。各濃度組BaP在48、72 h對(duì)幽門螺桿菌增殖的影響均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。BaP能促進(jìn)幽門螺桿菌CagA mRNA表達(dá)。在24、48 h,隨著濃度的增加,CagA表達(dá)相應(yīng)增加；在72 h,隨著BaP濃度增加CagA的表達(dá)逐漸減低,與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。幽門螺桿菌對(duì)GES-1細(xì)胞增殖活性的影響隨著MOI的不同明顯不同,在MOI 20：1,50：1,100：1時(shí),幽門螺桿菌促進(jìn)GES-1細(xì)胞增殖,與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。當(dāng)MOI繼續(xù)增大時(shí)(200：1,400：1)GES-1細(xì)胞增殖率逐漸下降,在MOI 400：1時(shí)出現(xiàn)抑制增殖。BaP呈濃度依賴性促進(jìn)GES-1細(xì)胞增殖。當(dāng)幽門螺桿菌(MOI 20：1)和BaP共同作用于GES-1細(xì)胞,隨著BaP濃度的升高,GES-1細(xì)胞增殖率并沒有逐漸升高,但各濃度組同單純幽門螺桿菌組相比仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。另外,在BaP濃度為0.2,0.5μmol/L,GES-1細(xì)胞增殖率同未加幽門螺桿菌菌液的BaP組相比,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論BaP能以時(shí)間、濃度依賴方式促進(jìn)幽門螺桿菌增殖和CagA mRNA表達(dá)。幽門螺桿菌和BaP共同作用于GES-1細(xì)胞,對(duì)GES-1細(xì)胞增殖有協(xié)同促進(jìn)作用。BaP可能增加幽門螺桿菌相關(guān)胃癌的風(fēng)險(xiǎn)。
【關(guān)鍵詞】：幽門螺桿菌 苯并(a)芘 胃癌 增殖 CagA
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 前言9-13
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法13-23
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 2.2 主要實(shí)驗(yàn)用液配制14-16
• 2.3 幽門螺桿菌培養(yǎng)與檢測(cè)16-17
• 2.4 幽門螺桿菌與苯并(a)芘共培養(yǎng)17-18
• 2.5 幽門螺桿菌總RNA提取及濃度測(cè)定18
• 2.6 RT-PCR檢測(cè)幽門螺桿菌CagA mRNA表達(dá)18-20
• 2.7 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)20-22
• 2.8 統(tǒng)計(jì)方法及制圖22-23
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-29
• 3.1 幽門螺旋桿菌的培養(yǎng)和鑒定23-24
• 3.2 苯并(a)芘對(duì)幽門螺桿菌增殖的影響24-25
• 3.3 苯并(a)芘對(duì)幽門螺桿菌毒力因子CagA mRNA表達(dá)的影響25-27
• 3.4 BaP和幽門螺桿菌對(duì)GES-1細(xì)胞增殖活性的影響27-29
• 第四章 討論29-32
• 第五章 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-40
• 文獻(xiàn)綜述40-50
• 參考文獻(xiàn)45-50
• 縮略語表50-51
• 在學(xué)期間的研究成果51-52
• 致謝52

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