發(fā)布時間：2017-10-23 06:20

  本文關(guān)鍵詞：miR-143降低DNMT3B表達(dá)提高肝細(xì)胞癌對阿霉素的敏感性

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【摘要】：背景與目的:化療是治療肝癌主要手段,肝細(xì)胞癌對化療藥物產(chǎn)生耐藥導(dǎo)致化療的失敗。腫瘤耐藥機(jī)制仍然未明確,近年來mi RNA為耐藥機(jī)制的研究開辟了新的思路。本研究旨在構(gòu)建肝細(xì)胞癌耐阿霉素的耐藥細(xì)胞株模型,分析耐阿霉素細(xì)胞株和親本細(xì)胞株之間mi R-143、DNMT3B和MDR1等表達(dá)差異,進(jìn)一步探討mi R-143在調(diào)控肝細(xì)胞癌耐阿霉素的作用機(jī)制,本研究希望有助于臨床逆轉(zhuǎn)肝癌耐阿霉素提高患者生存率。方法:低劑量持續(xù)加量誘導(dǎo)法構(gòu)建耐藥細(xì)胞株SMMC-7721/ADM;MTT檢測親本細(xì)胞與耐藥細(xì)胞的IC50值及耐藥系數(shù)(RI);細(xì)胞計(jì)數(shù)法計(jì)算倍增時間;倒置顯微鏡觀察形態(tài)學(xué)差異;熒光定量PCR檢測DNMT3B、MDR1、Bcl-2、Bax m RNA及mi R-143的表達(dá)量;Western blot法檢測DNMT3B蛋白表達(dá)量。耐藥細(xì)胞株SMMC-7721/ADM中脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染mi R-143 mimics;MTT法檢測轉(zhuǎn)染前后耐藥細(xì)胞IC50值及耐藥系數(shù)(RI);Transwell檢測細(xì)胞的遷移變化;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的凋亡率;熒光定量PCR檢測DNMT3B和MDR1 m RNA表達(dá)量;Western blot檢測DNMT3B蛋白表達(dá)量。結(jié)果:成功構(gòu)建耐3.0μg/m L阿霉素的肝細(xì)胞癌耐藥株SMMC-7721/ADM;與親本細(xì)胞相比較,耐藥細(xì)胞株IC50值升高(p0.05);生長增殖緩慢(p0.05);mi R-143表達(dá)量降低(p0.05),DNMT3B、MDR1、Bax、Bcl-2的m RNA表達(dá)量升高(p0.05);耐藥細(xì)胞中DNMT3B蛋白表達(dá)量升高(p0.05)。耐藥細(xì)胞轉(zhuǎn)染mi R-143 mimics后,IC50值降低(p0.05);侵襲能力下降(p0.05);凋亡增加(p0.05);DMT3B和MDR1m RNA表達(dá)量下降(p0.05);DNMT3B的蛋白表達(dá)量下降(p0.05)。結(jié)論:通過低劑量持續(xù)加量誘導(dǎo)法成功構(gòu)建的耐藥細(xì)胞株SMMC-7721/ADM符合耐藥細(xì)胞模型;耐藥細(xì)胞株中mi R-143可能通過降低DNMT3B的表達(dá)量,提升耐藥細(xì)胞對阿霉素的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：肝細(xì)胞癌 阿霉素 miR-143 DNMT3B 腫瘤細(xì)胞耐藥
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-11
• 實(shí)驗(yàn)材料11-13
• 實(shí)驗(yàn)方法13-25
• 結(jié)果25-34
• 討論34-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 致謝42-43
• 附錄A 英文縮略詞43-44
• 附錄B 主要試劑配制44-45
• 附錄C 個人簡歷及發(fā)表文章45-46
• 附錄D 綜述46-55
• 參考文獻(xiàn)52-55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：1081946