本文關鍵詞：miR-143降低DNMT3B表達提高肝細胞癌對阿霉素的敏感性

  更多相關文章： 肝細胞癌 阿霉素 miR-143 DNMT3B 腫瘤細胞耐藥

【摘要】：背景與目的:化療是治療肝癌主要手段,肝細胞癌對化療藥物產(chǎn)生耐藥導致化療的失敗。腫瘤耐藥機制仍然未明確,近年來mi RNA為耐藥機制的研究開辟了新的思路。本研究旨在構建肝細胞癌耐阿霉素的耐藥細胞株模型,分析耐阿霉素細胞株和親本細胞株之間mi R-143、DNMT3B和MDR1等表達差異,進一步探討mi R-143在調(diào)控肝細胞癌耐阿霉素的作用機制,本研究希望有助于臨床逆轉肝癌耐阿霉素提高患者生存率。方法:低劑量持續(xù)加量誘導法構建耐藥細胞株SMMC-7721/ADM;MTT檢測親本細胞與耐藥細胞的IC50值及耐藥系數(shù)(RI);細胞計數(shù)法計算倍增時間;倒置顯微鏡觀察形態(tài)學差異;熒光定量PCR檢測DNMT3B、MDR1、Bcl-2、Bax m RNA及mi R-143的表達量;Western blot法檢測DNMT3B蛋白表達量。耐藥細胞株SMMC-7721/ADM中脂質體法轉染mi R-143 mimics;MTT法檢測轉染前后耐藥細胞IC50值及耐藥系數(shù)(RI);Transwell檢測細胞的遷移變化;流式細胞術檢測細胞的凋亡率;熒光定量PCR檢測DNMT3B和MDR1 m RNA表達量;Western blot檢測DNMT3B蛋白表達量。結果:成功構建耐3.0μg/m L阿霉素的肝細胞癌耐藥株SMMC-7721/ADM;與親本細胞相比較,耐藥細胞株IC50值升高(p0.05);生長增殖緩慢(p0.05);mi R-143表達量降低(p0.05),DNMT3B、MDR1、Bax、Bcl-2的m RNA表達量升高(p0.05);耐藥細胞中DNMT3B蛋白表達量升高(p0.05)。耐藥細胞轉染mi R-143 mimics后,IC50值降低(p0.05);侵襲能力下降(p0.05);凋亡增加(p0.05);DMT3B和MDR1m RNA表達量下降(p0.05);DNMT3B的蛋白表達量下降(p0.05)。結論:通過低劑量持續(xù)加量誘導法成功構建的耐藥細胞株SMMC-7721/ADM符合耐藥細胞模型;耐藥細胞株中mi R-143可能通過降低DNMT3B的表達量,提升耐藥細胞對阿霉素的敏感性。
【關鍵詞】：肝細胞癌 阿霉素 miR-143 DNMT3B 腫瘤細胞耐藥
【學位授予單位】：蚌埠醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-8
• 前言8-11
• 實驗材料11-13
• 實驗方法13-25
• 結果25-34
• 討論34-37
• 結論37-38
• 參考文獻38-42
• 致謝42-43
• 附錄A 英文縮略詞43-44
• 附錄B 主要試劑配制44-45
• 附錄C 個人簡歷及發(fā)表文章45-46
• 附錄D 綜述46-55
• 參考文獻52-55

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 Wanqing Chen;Rongshou Zheng;Hongmei Zeng;Siwei Zhang;Jie He;;Annual report on status of cancer in China, 2011[J];Chinese Journal of Cancer Research;2015年01期

2 韓競男;魯昊騁;梁靜;;DNA甲基化與癌癥[J];中國生物化學與分子生物學報;2012年02期

3 熊堯;周黎明;;microRNA與腫瘤化療耐藥的關系[J];四川生理科學雜志;2011年04期

4 唐妮;張艱;杜永平;;姜黃素通過下調(diào)miR-186~*促進人肺腺癌細胞A549/DDP凋亡[J];中國肺癌雜志;2010年04期

，

本文編號：1081946