發(fā)布時(shí)間：2017-10-22 17:40

  本文關(guān)鍵詞：SCIN在胃癌干細(xì)胞自我更新及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用

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【摘要】：胃癌是消化系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,發(fā)病率及致死率均較高,嚴(yán)重危害著人類(lèi)的健康,高發(fā)于東歐、東亞和南美等地區(qū)。近年的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,胃癌的死亡率位于惡性腫瘤相關(guān)死亡原因的第二位。盡管各種各樣的治療方法均在逐步完善,包括手術(shù)治療、化學(xué)治療和生物治療等,但這并未使患者的遠(yuǎn)期生存率得以顯著延長(zhǎng),最根本的原因主要還是因?yàn)槲赴┣忠u轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性,而我們對(duì)于胃癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制的認(rèn)識(shí)仍不夠深入。因此,加深對(duì)其機(jī)制的探討是當(dāng)前研究最緊迫的主題。腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cells,CSCs)這一新近理論的提出,使研究者們?cè)谏钊胙芯课赴┌l(fā)生發(fā)展的道路上打開(kāi)了新思路。之前,我們小組已通過(guò)無(wú)血清成球培養(yǎng)的方法成功分離/富集胃癌干細(xì)胞(gastric cancer stem cells,GCSCs),并證明其擁有高度的自我更新和侵襲轉(zhuǎn)移能力,說(shuō)明GCSCs是胃癌自我更新及侵襲轉(zhuǎn)移的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)。前期我們通過(guò)基因表達(dá)譜芯片分析發(fā)現(xiàn),與普通胃癌貼壁細(xì)胞比較,GCSCs中與細(xì)胞形態(tài)和運(yùn)動(dòng)功能密切相關(guān)的肌切蛋白(scinderin,SCIN)表達(dá)顯著上調(diào)。因此,我們進(jìn)一步研究了SCIN在GCSCs自我更新及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及可能存在的分子機(jī)制,并且探討了SCIN在胃癌標(biāo)本中表達(dá)水平的臨床意義。我們的結(jié)果提示SCIN可望為胃癌診療提供新的標(biāo)志物和靶點(diǎn)。主要研究方法、結(jié)果及結(jié)論如下:1.SCIN在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義(1)采用免疫組化染色法檢測(cè)188例胃癌標(biāo)本中SCIN表達(dá),發(fā)現(xiàn)56%(105/188)的胃癌標(biāo)本中SCIN呈高表達(dá),其表達(dá)水平與患者的年齡(P=0.840)、性別(P=0.220)和腫瘤細(xì)胞分化程度(P=0.483)無(wú)顯著相關(guān)性,而與腫瘤的浸潤(rùn)深度(P=0.011)及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.024)密切相關(guān)。(2)采用Kaplan-Meier方法計(jì)算患者生存率與SCIN的相關(guān)性,結(jié)果顯示SCIN高表達(dá)的患者預(yù)后較SCIN低表達(dá)者差(P0.001),提示SCIN可以作為判斷胃癌患者預(yù)后的指標(biāo)。2.沉默SCIN抑制胃癌干細(xì)胞的自我更新能力(1)應(yīng)用q RT-PCR和Western blot技術(shù),我們選擇了在胃癌細(xì)胞中SCIN表達(dá)較高,且與胃癌干細(xì)胞比較其表達(dá)有顯著差異的胃癌細(xì)胞系MGC803和原代細(xì)胞XN0422,進(jìn)一步構(gòu)建慢病毒穩(wěn)定干擾SCIN基因表達(dá)的細(xì)胞。(2)與對(duì)照組(mock)細(xì)胞相比,SCIN沉默后,細(xì)胞的平板克隆形成能力、成球能力及裸鼠皮下成瘤能力均受到一定程度的抑制(P0.05)。3.沉默SCIN抑制胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力(1)應(yīng)用活細(xì)胞工作站觀(guān)察細(xì)胞的遷移能力,Transwell-matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力,結(jié)果顯示,SCIN沉默后,細(xì)胞的遷移能力和侵襲能力均受到顯著抑制。(P0.05)(2)通過(guò)裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)和腹腔轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SCIN沉默對(duì)胃癌細(xì)胞在體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,結(jié)果顯示,雖然SCIN敲低與否均能形成皮下移植瘤并發(fā)生腹腔轉(zhuǎn)移,但與對(duì)照相比,SCIN敲低細(xì)胞形成的移植瘤體積顯著減小且重量明顯減輕,此外,腹腔轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目顯著少于對(duì)照組,MGC803和XN0422 mock細(xì)胞轉(zhuǎn)移瘤數(shù)分別為19.67±2.33和32.67±4.74,SCIN敲低細(xì)胞的轉(zhuǎn)移瘤數(shù)分別為10.00±1.29和15.83±2.00,P0.05。本文的主要結(jié)論如下:SCIN的表達(dá)水平與胃癌患者的生存期呈負(fù)相關(guān),可用于判斷臨床預(yù)后;SCIN的表達(dá)降低可抑制胃癌干細(xì)胞的自我更新能力;SCIN的表達(dá)水平與胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 SCIN 腫瘤干細(xì)胞 自我更新 侵襲轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 縮略覽表4-5
• Abstract5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 SCIN在人胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義12-19
• 2.1 材料與方法12-15
• 2.2 結(jié)果15-18
• 2.3 討論18
• 2.4 小結(jié)18-19
• 第三章 肌切蛋白在胃癌干細(xì)胞自我更新中的作用19-36
• 3.1 材料與方法19-30
• 3.2 結(jié)果30-34
• 3.3 討論34-35
• 3.4 小結(jié)35-36
• 第四章 肌切蛋白在調(diào)控胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用36-42
• 4.1 材料與方法36-38
• 4.2 結(jié)果38-40
• 4.3 討論40-41
• 4.4 小結(jié)41-42
• 全文總結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 文獻(xiàn)綜述 肌切蛋白的研究進(jìn)展47-52
• 參考文獻(xiàn)50-52
• 攻讀碩士期間撰寫(xiě)和發(fā)表論文情況52-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 Kang Li;Zeng Dan;Yu-Qiang Nie;;Gastric cancer stem cells in gastric carcinogenesis,progression,prevention and treatment[J];World Journal of Gastroenterology;2014年18期

2 吳姍;馬晶晶;姜旖;馬小玲;范文;程文俊;;卵巢上皮性癌中肌切蛋白的表達(dá)及其臨床意義[J];實(shí)用婦產(chǎn)科雜志;2013年07期

3 Ismail Gomceli;Baris Demiriz;Mesut Tez;;Gastric carcinogenesis[J];World Journal of Gastroenterology;2012年37期

4 賴(lài)章超;宋鑫;;肌切蛋白的結(jié)構(gòu)與功能多樣性[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2012年07期

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本文編號(hào)：1079435