本文關(guān)鍵詞：SCIN在胃癌干細胞自我更新及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用

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【摘要】：胃癌是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,發(fā)病率及致死率均較高,嚴重危害著人類的健康,高發(fā)于東歐、東亞和南美等地區(qū)。近年的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,胃癌的死亡率位于惡性腫瘤相關(guān)死亡原因的第二位。盡管各種各樣的治療方法均在逐步完善,包括手術(shù)治療、化學(xué)治療和生物治療等,但這并未使患者的遠期生存率得以顯著延長,最根本的原因主要還是因為胃癌侵襲轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性,而我們對于胃癌侵襲轉(zhuǎn)移的機制的認識仍不夠深入。因此,加深對其機制的探討是當前研究最緊迫的主題。腫瘤干細胞(cancer stem cells,CSCs)這一新近理論的提出,使研究者們在深入研究胃癌發(fā)生發(fā)展的道路上打開了新思路。之前,我們小組已通過無血清成球培養(yǎng)的方法成功分離/富集胃癌干細胞(gastric cancer stem cells,GCSCs),并證明其擁有高度的自我更新和侵襲轉(zhuǎn)移能力,說明GCSCs是胃癌自我更新及侵襲轉(zhuǎn)移的細胞學(xué)基礎(chǔ)。前期我們通過基因表達譜芯片分析發(fā)現(xiàn),與普通胃癌貼壁細胞比較,GCSCs中與細胞形態(tài)和運動功能密切相關(guān)的肌切蛋白(scinderin,SCIN)表達顯著上調(diào)。因此,我們進一步研究了SCIN在GCSCs自我更新及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及可能存在的分子機制,并且探討了SCIN在胃癌標本中表達水平的臨床意義。我們的結(jié)果提示SCIN可望為胃癌診療提供新的標志物和靶點。主要研究方法、結(jié)果及結(jié)論如下:1.SCIN在胃癌組織中的表達及其臨床意義(1)采用免疫組化染色法檢測188例胃癌標本中SCIN表達,發(fā)現(xiàn)56%(105/188)的胃癌標本中SCIN呈高表達,其表達水平與患者的年齡(P=0.840)、性別(P=0.220)和腫瘤細胞分化程度(P=0.483)無顯著相關(guān)性,而與腫瘤的浸潤深度(P=0.011)及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.024)密切相關(guān)。(2)采用Kaplan-Meier方法計算患者生存率與SCIN的相關(guān)性,結(jié)果顯示SCIN高表達的患者預(yù)后較SCIN低表達者差(P0.001),提示SCIN可以作為判斷胃癌患者預(yù)后的指標。2.沉默SCIN抑制胃癌干細胞的自我更新能力(1)應(yīng)用q RT-PCR和Western blot技術(shù),我們選擇了在胃癌細胞中SCIN表達較高,且與胃癌干細胞比較其表達有顯著差異的胃癌細胞系MGC803和原代細胞XN0422,進一步構(gòu)建慢病毒穩(wěn)定干擾SCIN基因表達的細胞。(2)與對照組(mock)細胞相比,SCIN沉默后,細胞的平板克隆形成能力、成球能力及裸鼠皮下成瘤能力均受到一定程度的抑制(P0.05)。3.沉默SCIN抑制胃癌細胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力(1)應(yīng)用活細胞工作站觀察細胞的遷移能力,Transwell-matrigel侵襲實驗檢測細胞的侵襲能力,結(jié)果顯示,SCIN沉默后,細胞的遷移能力和侵襲能力均受到顯著抑制。(P0.05)(2)通過裸鼠皮下成瘤實驗和腹腔轉(zhuǎn)移實驗檢測SCIN沉默對胃癌細胞在體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響,結(jié)果顯示,雖然SCIN敲低與否均能形成皮下移植瘤并發(fā)生腹腔轉(zhuǎn)移,但與對照相比,SCIN敲低細胞形成的移植瘤體積顯著減小且重量明顯減輕,此外,腹腔轉(zhuǎn)移瘤數(shù)目顯著少于對照組,MGC803和XN0422 mock細胞轉(zhuǎn)移瘤數(shù)分別為19.67±2.33和32.67±4.74,SCIN敲低細胞的轉(zhuǎn)移瘤數(shù)分別為10.00±1.29和15.83±2.00,P0.05。本文的主要結(jié)論如下:SCIN的表達水平與胃癌患者的生存期呈負相關(guān),可用于判斷臨床預(yù)后;SCIN的表達降低可抑制胃癌干細胞的自我更新能力;SCIN的表達水平與胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：胃癌 SCIN 腫瘤干細胞 自我更新 侵襲轉(zhuǎn)移
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 縮略覽表4-5
• Abstract5-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 SCIN在人胃癌組織中的表達及其臨床意義12-19
• 2.1 材料與方法12-15
• 2.2 結(jié)果15-18
• 2.3 討論18
• 2.4 小結(jié)18-19
• 第三章 肌切蛋白在胃癌干細胞自我更新中的作用19-36
• 3.1 材料與方法19-30
• 3.2 結(jié)果30-34
• 3.3 討論34-35
• 3.4 小結(jié)35-36
• 第四章 肌切蛋白在調(diào)控胃癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移中的作用36-42
• 4.1 材料與方法36-38
• 4.2 結(jié)果38-40
• 4.3 討論40-41
• 4.4 小結(jié)41-42
• 全文總結(jié)42-43
• 參考文獻43-47
• 文獻綜述 肌切蛋白的研究進展47-52
• 參考文獻50-52
• 攻讀碩士期間撰寫和發(fā)表論文情況52-53
• 致謝53

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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本文編號：1079435