本文關(guān)鍵詞：BCAT1和CD147在食管鱗癌中的表達(dá)及其臨床意義

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【摘要】：研究背景：食管癌起源于食管上皮,是十分常見(jiàn)的上消化道惡性腫瘤之一。其病理組織類型主要分為食管腺癌和食管鱗癌,其中后者占90%以上。在全球惡性腫瘤譜中,食管癌的發(fā)病率位列第8,而死亡率則位列第6。WHO國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)(IARC)的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,2012年全球新發(fā)食管癌病例約45.6萬(wàn)人,死亡約40萬(wàn)人。我國(guó)為食管癌的高發(fā)地區(qū),尤其以河南、河北、江蘇等地為多。我國(guó)食管癌的發(fā)病率和死亡率分別位于惡性腫瘤的第5位和第4位,2012年我國(guó)新發(fā)食管癌病例22.3萬(wàn)人,死亡約19.7萬(wàn)人,發(fā)病和死亡人數(shù)均接近全球范圍內(nèi)的一半。目前,我們?nèi)圆磺宄彻馨┑木唧w發(fā)病機(jī)制,但現(xiàn)有研究表明酒精、煙草、肥胖、胃食管反流病以及遺傳易感性等為其危險(xiǎn)因素。由于食管癌早期癥狀常不明顯,早期診治率非常低。等到出現(xiàn)典型癥狀就診時(shí)往往已屬中晚期,雖然針對(duì)食管癌的各種治療方法已取得了明顯進(jìn)步,但是食管癌患者的生存情況并不理想,食管鱗癌的5年生存率僅為15%左右。迄今,食管鱗癌仍缺乏特異性高、效用好的分子標(biāo)記,針對(duì)食管鱗癌的靶向治療也十分有限,因此,本課題擬探索相關(guān)蛋白分子與食管鱗癌的關(guān)系,以期更深入了解食管鱗癌的生物行為,并由此為食管鱗癌的防治提供更廣泛的線索。BCAT1(branched-chain amino acid transaminase1,也被稱為ECA39)-支鏈氨基酸轉(zhuǎn)移酶1,位于人類染色體12p12.1,編碼胞質(zhì)內(nèi)支鏈氨基酸轉(zhuǎn)移酶1,該酶催化支鏈氨基酸(亮氨酸、纈氨酸和異亮氨酸)代謝的第一步反應(yīng),在BCAT1催化作用下,支鏈氨基酸將α-氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸上,從而生成相應(yīng)的支鏈酮酸以及谷氨酸。正常機(jī)體內(nèi),BCAT1主要表達(dá)于腦、脊髓及外周神經(jīng)元等組織,可能與神經(jīng)遞質(zhì)谷氨酸的生成相適應(yīng)。BCAT1在進(jìn)化過(guò)程中高度保守,早期相關(guān)研究指出BCAT1參與酵母細(xì)胞周期調(diào)控,并且能夠誘導(dǎo)哺乳動(dòng)物細(xì)胞凋亡。后續(xù)很多研究逐漸發(fā)現(xiàn)BCAT1的表達(dá)失調(diào)與人類多種疾病相關(guān)。更為重要的是,BCAT1被報(bào)道與人類多種惡性腫瘤相關(guān)。BCAT1為MYC原癌基因直接調(diào)控的下游靶基因之一,最早被發(fā)現(xiàn)于MYC發(fā)生轉(zhuǎn)位而激活的Burkitt's淋巴瘤中。此后,一系列的研究顯示BCAT1基因和/或BCAT1蛋白在多種惡性腫瘤中表達(dá)增高,包括乳腺癌、非精原細(xì)胞瘤、鼻咽癌、IDH野生型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、卵巢上皮惡性腫瘤及尿路移行上皮癌.BCAT1通過(guò)促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移發(fā)揮促癌作用,并可能是相關(guān)腫瘤預(yù)后不良的標(biāo)記。BCAT1具體的促癌機(jī)制尚不明確,現(xiàn)有證據(jù)顯示其可能參與加速癌細(xì)胞代謝,或通過(guò)與其他蛋白協(xié)同作用促進(jìn)癌細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移。有種不成熟的假說(shuō)認(rèn)為癌組織中BCAT1的表達(dá)上調(diào)能夠讓癌細(xì)胞將支鏈氨基酸作為替代能源進(jìn)行分解代謝以支持癌細(xì)胞快速增值所需的ATP及生物大分子合成。有很多研究都直接或間接地佐證了這一假設(shè),例如針對(duì)癌癥患者體內(nèi)支鏈氨基酸水平的監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤對(duì)支鏈氨基酸的攝取氧化增高,當(dāng)從外界獲取不足時(shí),機(jī)體為了維持循環(huán)內(nèi)的支鏈氨基酸平衡,往往會(huì)導(dǎo)致骨骼肌等分解加速,進(jìn)而引發(fā)體重減輕,甚至惡液質(zhì)。盡管BCAT1在迄今所報(bào)道的大部分腫瘤中均顯現(xiàn)出其促癌作用,但是,也有部分研究報(bào)道BCAT1在多數(shù)結(jié)直腸癌及早期非小細(xì)胞肺癌中呈現(xiàn)甲基化,由于基因的甲基化狀態(tài)一般提示該基因表達(dá)受抑制,似乎預(yù)示著BCAT1在多數(shù)結(jié)腸癌及早期非小細(xì)胞肺癌中呈低表達(dá)或不表達(dá)。這些研究讓BCAT1與人類惡性腫瘤的關(guān)系變得撲朔迷離,因此,有必要對(duì)BCAT1進(jìn)行更廣泛的研究以深刻揭示其在惡性腫瘤中所扮演的角色。有研究對(duì)食管鱗癌組織進(jìn)行全基因組測(cè)序時(shí)發(fā)現(xiàn)近60%的食管鱗癌伴有原癌基因MYC擴(kuò)增,并且MYC蛋白表達(dá)增強(qiáng),許多研究已從不同方面揭示了MYC能促進(jìn)食管鱗癌的惡性生物行為,癌組織中MYC過(guò)表達(dá)往往預(yù)示著患者預(yù)后不良。那么我們?cè)O(shè)想,BCAT1作為MYC直接調(diào)控的一個(gè)下游靶基因,是否可能也參與了食管鱗癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程?而目前有關(guān)BCAT1在食管鱗癌組織中的表達(dá)情況及其意義尚未見(jiàn)報(bào)道。CD147,也稱EMMPRIN,extracellular matrix metalloproteinase inducer-細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子,是一跨膜糖蛋白,為免疫球蛋白超家族成員之一。CD147是與腫瘤惡性生物行為高度相關(guān)的一個(gè)分子。大量研究證實(shí)CD147參與調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)合成及活性,在惡性腫瘤中,MMPs對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的發(fā)生起重要作用。此外,CD147是單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(MCTs)必需的組裝因子,癌細(xì)胞進(jìn)行有氧糖酵解產(chǎn)生大量乳酸,CD147參與構(gòu)成的MCTs能將過(guò)量的乳酸由細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)出去,以利于腫瘤細(xì)胞生存。同時(shí),也有研究報(bào)道,CD147能夠介導(dǎo)癌細(xì)胞發(fā)生化療抵抗。迄今,CD147已被報(bào)道在絕大多數(shù)腫瘤中表達(dá)升高,并且通過(guò)其功能作用促進(jìn)癌細(xì)胞的惡性生物行為。并且在多數(shù)腫瘤中,CD147過(guò)表達(dá)提示患者預(yù)后不良。而不多的幾項(xiàng)研究也表明CD147在食管鱗癌組織中有表達(dá),但有關(guān)其表達(dá)頻率及意義,各研究結(jié)果卻存在較大差異。惡性腫瘤最主要的特征是能夠發(fā)生轉(zhuǎn)移,食管鱗癌預(yù)后不良也與其轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)相關(guān)。綜合上述報(bào)道,BCAT1和CD147均能促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、幔襲及轉(zhuǎn)移。并且在癌細(xì)胞復(fù)雜的分子網(wǎng)絡(luò)中,BCAT1與CD147似乎存在某種關(guān)聯(lián),在乳腺癌細(xì)胞中,BCAT1和CD147的表達(dá)均可受MYC調(diào)控,并且BCAT1能夠影響CD147的表達(dá),并進(jìn)一步影響癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移。而有關(guān)BCAT1與CD147在食管鱗癌組織中的表達(dá)關(guān)聯(lián)尚未見(jiàn)報(bào)道。研究目的：(1)明確食管鱗癌、癌旁正常組織中BCAT1、CD147的表達(dá)情況及其與臨床病理學(xué)指標(biāo)間的關(guān)系；(2)初步探討食管鱗癌組織中BCAT1與CD147的表達(dá)關(guān)系。研究方法：收集2010年1月至2011年1月期間經(jīng)由胸外科手術(shù)切除,病理科存檔的食管鱗癌福爾馬林固定石蠟包埋組織標(biāo)本50例,其中29例帶有匹配癌旁正常食管上皮組織。運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)BCAT1、CD147蛋白在50例食管鱗癌組織及29例癌旁正常組織中的表達(dá),結(jié)合食管鱗癌患者的臨床病理因素(主要包括性別、年齡、分化程度、腫瘤大小、是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等)及生存期進(jìn)行分析。并對(duì)食管鱗癌組織中BCAT1、CD147的表達(dá)關(guān)系進(jìn)行分析。研究結(jié)果：1.BCAT1、CD147在食管鱗癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)情況BCAT1主要表達(dá)于癌細(xì)胞胞漿,呈棕褐色著色,CD147則主要表達(dá)于癌細(xì)胞膜,部分表達(dá)于癌細(xì)胞胞漿,呈黃褐色著色。50例食管鱗癌病例中,BCAT1表達(dá)于其中的44例,陽(yáng)性表達(dá)率為88%(44/50),其中弱陽(yáng)性20%(10/50),強(qiáng)陽(yáng)性14%(7/50),表達(dá)程度介于強(qiáng)弱兩者之間的為54%(27/50)； CD147表達(dá)于其中的38例,陽(yáng)性表達(dá)率為76%,其中呈弱陽(yáng)性表達(dá)者為16%(8/50),中等陽(yáng)性表達(dá)者為42%(21/50),強(qiáng)陽(yáng)性者為18%(9/50)；在癌組織中,我們觀察到,分化差的食管鱗癌組織中BCAT1表達(dá)強(qiáng)度傾向于更高,而在部分高-中分化癌組織中,BCAT1多表達(dá)于癌巢周邊癌細(xì)胞。CD147在高侵襲性癌組織中廣泛表達(dá),并且在侵襲前沿細(xì)胞多呈高表達(dá)。而在正常食管鱗狀上皮中,BCAT1和CD147主要表達(dá)于基底層細(xì)胞。2.食管鱗癌中BCAT1、CD 147的表達(dá)強(qiáng)弱與各臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系食管鱗癌中BCA1的表達(dá)強(qiáng)弱與食管鱗癌的分化程度、腫瘤大小(T)及腫瘤術(shù)后病理分期(pTNM)相關(guān)：BCAT1在高-中分化組的平均陽(yáng)性值為3.85±1.69,在低分化組的平均陽(yáng)性值為5.00±0.91,BCAT1在低分化組表達(dá)強(qiáng)度高于高-中分化組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值為0.009,小于0.01)；BCAT1在T1-T2組的平均陽(yáng)性值為2.57±1.90,T3組的平均陽(yáng)性值為4.10±1.42,T4組的平均陽(yáng)性值為4.54±1.61。BCAT1在T3、T4組的表達(dá)強(qiáng)度高于T1-T2組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為0.022、0.009,均小于0.05)；BCAT1在Ⅰ-Ⅱ期組平均陽(yáng)性值為3.33±1.68,在Ⅲ-Ⅳ期組平均陽(yáng)性值為4.38±1.50,BCAT1在Ⅲ-Ⅳ期組的表達(dá)強(qiáng)度高于Ⅰ-Ⅱ期組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值為0.028,小于0.05)；食管鱗癌中CD147的表達(dá)強(qiáng)弱僅與腫瘤大小(T)存在一定相關(guān)性,而與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)及腫瘤術(shù)后pTNM分期未顯現(xiàn)出相關(guān)：CD147在T1-T2組的平均陽(yáng)性值為1.86±2.55,T3-T4組的平均陽(yáng)性值為3.84±1.83,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),CD147在T3-T4組表達(dá)強(qiáng)度高于T1-T2組。3.食管鱗癌中BCAT1、CD147的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系BCAT1陰性表達(dá)組的平均生存時(shí)間為45.83月,BCAT1陽(yáng)性表達(dá)組的平均生存時(shí)間為17.49月,行Log-Rank檢驗(yàn),χ2=7.379,P=0.0070.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,BCAT1陰性表達(dá)組的平均生存時(shí)間高于BCAT1陽(yáng)性表達(dá)組。而在BCAT1表達(dá)弱陽(yáng)性組、中等陽(yáng)性組及強(qiáng)陽(yáng)性組間,平均生存時(shí)間未呈現(xiàn)出趨勢(shì)差異。CD147陰性表達(dá)組的平均生存時(shí)間為40.83月,CD147陽(yáng)性表達(dá)組的平均生存時(shí)間為14.43月,行Log-Rank檢驗(yàn),χ2=17.105,P=0.0000.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,CD147陰性表達(dá)組的平均生存時(shí)間高于CD147陽(yáng)性表達(dá)組。而在CD147表達(dá)弱陽(yáng)性組、中等陽(yáng)性組及強(qiáng)陽(yáng)性組間,平均生存時(shí)間未呈現(xiàn)出趨勢(shì)差異。用Cox Regression模型進(jìn)行單因素風(fēng)險(xiǎn)分析,篩選出BCAT1表達(dá)、CD147表達(dá)、腫瘤大小、腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移五個(gè)臨床病理參數(shù),將上述病理參數(shù)納入多因素分析時(shí),結(jié)果顯示只有腫瘤術(shù)后pTNM分期和CD147表達(dá)可作為食管鱗癌預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子,食管鱗癌分期高的(Ⅲ-Ⅲ期)患者死亡風(fēng)險(xiǎn)為分期低(Ⅰ-Ⅱ期)的患者的2.505倍(95%CI:1.264～4.963); CD147表達(dá)陽(yáng)性患者死亡風(fēng)險(xiǎn)為表達(dá)陰性患者的1.304倍(95%CI：1.097-1.551)。4.食管鱗癌中BCAT1和CD147的表達(dá)關(guān)系本課題中,相關(guān)性分析并未顯示出BCAT1和CD147兩者表達(dá)具有相關(guān)性(P0.05)。研究結(jié)論：1.BCAT1和CD147在多數(shù)食管鱗癌中表達(dá),提示其在食管鱗癌的發(fā)展過(guò)程中可能具有重要作用；2.食管鱗癌中BCAT1的表達(dá)與腫瘤去分化程度、腫瘤大小及腫瘤術(shù)后病理分期呈正相關(guān),BCATl表達(dá)與患者的生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)；3.食管鱗癌中CD147的表達(dá)與腫瘤大小呈正相關(guān),CD147表達(dá)與患者的生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān),CD147的表達(dá)為食管鱗癌患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素。
【關(guān)鍵詞】：食管鱗癌 BCAT1 CD147 轉(zhuǎn)移 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.1
【目錄】：

• 摘要3-9
• ABSTRACT9-18
• 引言18-26
• 實(shí)驗(yàn)材料26-29
• 1. 組織標(biāo)本及一般資料26-27
• 2. 主要儀器設(shè)備及耗材27-28
• 3. 主要試劑28-29
• 實(shí)驗(yàn)原理及方法步驟29-33
• 1. 實(shí)驗(yàn)原理29
• 2. 方法步驟29-32
• 3. 結(jié)果判讀32
• 4. 統(tǒng)計(jì)分析方法32-33
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-46
• 1. 病理標(biāo)本的復(fù)診結(jié)果33
• 2. BCAT1、CD147在食管鱗癌組織和癌旁正常組織中的表達(dá)情況33-39
• 3. 食管鱗癌中,BCAT1和CD147兩者表達(dá)的相關(guān)性39-40
• 4. 生存分析40-46
• 討論46-56
• 1. 支鏈氨基酸轉(zhuǎn)移酶147-52
• 2. CD147(也稱為EMMPRIN-細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子)52-55
• 3. 食管鱗癌中BCAT1與CD147的表達(dá)關(guān)聯(lián)55-56
• 總結(jié)及展望56-57
• 1. 結(jié)論56
• 2. 本研究的局限性和存在的不足56
• 3. 展望56-57
• 參考文獻(xiàn)57-68
• 綜述68-78
• 參考文獻(xiàn)74-78
• 攻讀碩士期間成果78-79
• 致謝79-80

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 范虹;TRPC6通道對(duì)食管鱗癌的增殖及放療增敏作用的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

2 王娜娜;RACK1在食管鱗癌預(yù)后及進(jìn)展中的作用及與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的相關(guān)性研究[D];山東大學(xué);2015年

3 孟慧;miR-330-3p和miR-26b在食管鱗癌中的功能及其調(diào)控機(jī)制探討[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 周韶梅;miR-100在食管鱗癌中的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];北京工業(yè)大學(xué);2015年

5 曾薇;食管鱗癌中Survivin對(duì)NF-κB p65調(diào)控機(jī)制的研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊宏麗;PRKDC、XRCC4多態(tài)性與中國(guó)安陽(yáng)地區(qū)食管鱗癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)性研究[D];山東大學(xué);2015年

7 崔瑤;STAT3對(duì)缺氧誘導(dǎo)食管鱗癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的調(diào)控作用[D];鄭州大學(xué);2016年

8 楊璇;miR-1207-5p對(duì)食管鱗癌發(fā)生的影響[D];鄭州大學(xué);2016年

9 江亞南;T-LAK細(xì)胞來(lái)源的蛋白激酶(TOPK)在食管鱗癌增殖中的功能研究[D];鄭州大學(xué);2016年

10 寧忠華;系統(tǒng)性炎癥和臨床病理因素對(duì)食管鱗癌的預(yù)后影響[D];蘇州大學(xué);2016年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 范玉宏;Caveolin-1在食管鱗癌浸潤(rùn)進(jìn)展中的作用研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張廣釗;抗感染治療對(duì)兔舌VX-2鱗癌炎癥組織中MMP9、VEGF表達(dá)的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年

3 周瑩;c-met siRNA轉(zhuǎn)染對(duì)食管鱗癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2016年

4 閆坤;擴(kuò)散峰度成像與宮頸癌病理學(xué)特征相關(guān)性的初步探索[D];蘭州大學(xué);2016年

5 蔡履娟;EGFR、Her-2及c-Fos在食管鱗癌中的表達(dá)及意義[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

6 韓煌煌;JWA等基因多態(tài)性與食管鱗癌發(fā)生及預(yù)后相關(guān)性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

7 夏海峰;癌基因RMP在食管鱗癌中的表達(dá)及與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及EMT相關(guān)性研究[D];蘇州大學(xué);2016年

8 陳增超;TCR免疫組庫(kù)對(duì)食管鱗癌免疫治療的指導(dǎo)研究[D];山東大學(xué);2016年

9 韓利會(huì);術(shù)前全身炎癥反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)在食管鱗癌中的臨床價(jià)值[D];山東大學(xué);2016年

10 賀璐璐;食管鱗癌KYSE150細(xì)胞與M_2型巨噬細(xì)胞對(duì)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的協(xié)同影響[D];鄭州大學(xué);2016年

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本文編號(hào)：1079092