本文關(guān)鍵詞：2型谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶過表達(dá)對乳腺癌MCF-7細(xì)胞耐藥性的影響及機(jī)制探討

  更多相關(guān)文章： Ⅱ型谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶 過表達(dá) 乳腺癌 耐藥 阿霉素

【摘要】：目的：探討2型轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TG2)過表達(dá)對乳腺癌MCF-7細(xì)胞化療耐藥的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法：1.以TG2慢病毒過表達(dá)載體構(gòu)建轉(zhuǎn)染細(xì)胞,設(shè)3組：TG2組即轉(zhuǎn)染過表達(dá)TG2組、CON組即不轉(zhuǎn)染空白組、NC組即轉(zhuǎn)染陰性對照組。各組在培養(yǎng)基中培養(yǎng)。轉(zhuǎn)染72h后,以嘌呤霉素lug/ml持續(xù)篩選5天,熒光顯微鏡觀察慢病毒的感染效率。熒光定量PCR檢測各組的TG2的mRNA表達(dá)量,Western-blot技術(shù)檢測各組中TG2蛋白的表達(dá)情況。2各組細(xì)胞都用阿霉素處理培養(yǎng),用MTT法檢測阿霉素對各組細(xì)胞處理后的半數(shù)致死率(IC50),細(xì)胞流式檢測各組的凋亡情況。3、進(jìn)一步用Western-blot技術(shù)檢測各組中凋亡相關(guān)蛋白BCL-2、 capase-3,以及PAKT/AKT的表達(dá)情況。4、用TG2抑制劑MDC處理TG2組后檢測TG2、BCL-2、Capase-3,以及PAKT/AKT表達(dá)和ICso情況。結(jié)果：1、TG2組、CON組、NC組比較,TG2組的TG2轉(zhuǎn)錄mRNA和蛋白表達(dá)比CON組和NC組水平明顯升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2、MTT結(jié)果顯示TG2組ICso為(40.7±3.56)ug/ml,與CON組(17.4 ±1.45) ug/ml和NC組(22.7±2.0) ug/ml比較差異有統(tǒng)計學(xué)(P0.05)。FCM顯示TG2組的凋亡率為(38.50±5.50)%,與CON組(87.4±12.5)%和NC(53.1±4.7)%組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、Western-blot結(jié)果顯示,TG2組比CON組Capase-3的表達(dá)下降,而BCL-2、AKT/P-AKT表達(dá)上升(P0.05)。與NC組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)4、經(jīng)過TG2抑制劑MDC處理TG2組的AKT表達(dá)降低差異有統(tǒng)計學(xué)意(P0.05),而BCL-2、Capase-3差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),但隨MDC濃度增加在一定范圍內(nèi)對阿霉素的ICso值下降有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：1、乳腺癌MCF-7細(xì)胞中TG2的過表達(dá)會使其阿霉素耐藥性增加,并且可以被其抑制劑抑制。2、TG2增加乳腺癌耐藥性可能是通過下調(diào)Capase-3的表達(dá)和上調(diào)BCL-2、AKT/PAKT分子發(fā)揮作用。
【關(guān)鍵詞】：Ⅱ型谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶 過表達(dá) 乳腺癌 耐藥 阿霉素
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 個人簡歷3-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-13
• 材料與方法13-33
• 1.實驗材料13-17
• 技術(shù)路線圖17-18
• 2.實驗方法18-33
• 實驗結(jié)果33-46
• 討論46-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 附錄：縮略詞中英文對照表57-59
• 綜述59-71
• 參考文獻(xiàn)67-71
• 致謝71-73
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文73

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1072762