本文關(guān)鍵詞：OSW-1與線粒體DNA缺失對(duì)肝癌細(xì)胞PI3K信號(hào)通路的影響

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【摘要】：目的：探討OSW-1與線粒體DNA缺失對(duì)肝癌細(xì)胞PI3K信號(hào)通路的影響。方法：1、以SK-Hep-1細(xì)胞為對(duì)照組,建立線粒體DNA缺失的p0-SK-Hep-1細(xì)胞模型(實(shí)驗(yàn)組2),使用熒光實(shí)時(shí)定量PCR芯片比較兩組細(xì)胞PI3K信號(hào)通路的表達(dá)差異。2、OSW-1干預(yù)SK-Hep-1 (實(shí)驗(yàn)組1)ρ0-SK-Hep-1(實(shí)驗(yàn)組3)細(xì)胞24小時(shí)后,使用熒光實(shí)時(shí)定量PCR芯片比較兩組細(xì)胞P13K信號(hào)通路的表達(dá)差異。結(jié)果：1、SK-Hep-1細(xì)胞線粒體DNA缺失后細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中基因：CASP9、 CD14、FOXO1、GJA1、GRB2、HSPB1、IGF1、MAPK3、PDPK1、PRKCA、 RPS6KA1、TLR4、TSC2表達(dá)上調(diào)；APC、CTNNB1表達(dá)下調(diào)。2、OSW-1作用于SK-Hep-1細(xì)胞后細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中基因：FOS、GRB2、HSPB1、IRAK1、PDPK1、PRKCA、PRKCB、TLR4、TOLLIP、TSC2表達(dá)上調(diào)；APC、IGF1、IRS1、PDGFRA、PTPN11、SHC1表達(dá)下調(diào)。3、OSW-作用pO-SK-Hep-1細(xì)胞后細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中基因：AKT1、CDC42、CDKN1B、FASLB、IRAK1、IRS1、PDGFRA、PDK2、PIK3R2、 PRKCB、SHC1、TIRAP、TOLLIP等表達(dá)上調(diào)。BAD、EIF2AK2、FOXO1、 IGF1、PABPC1、PAK1、PDK1、PDPK1、PIK3CG、RAC1、RASA1、RHOA、 SOS1、TLR4、WASL等表達(dá)下調(diào)。4、OSW-1作用于SK-Hep-1細(xì)胞組、OSW-1作用ρ0-SK-Hep-1細(xì)胞組都表達(dá)上調(diào)的基因有IRAK1、PRKCB;表達(dá)下調(diào)有IGF1、APC。結(jié)論：1、OSW-1和線粒體DNA缺失均能影響SK-Hep-1細(xì)胞P3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路基因的表達(dá)。2、OSW-1靶向作用于SK-Hep-1細(xì)胞的線粒體,抑制其功能。3、OSW-1靶向抑制肝癌細(xì)胞IGF-1-PI3K-AKT信號(hào)傳導(dǎo)通路；Grb2-p85-AKT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路；IRS1-PI3K-AKT-GLUT-4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路；PI3K-AKT-TSC1/TSC2-mTOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路；TLR4-PI3K-AKT細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,從而抑制肝癌細(xì)胞生長、增殖、能量代謝。
【關(guān)鍵詞】：肝癌 OSW-1 PI3K信號(hào)通路 實(shí)時(shí)定量PCR芯片
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 縮略語表9-11
• 第一章 前言11-15
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料與方法15-27
• 2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 2.3 實(shí)驗(yàn)耗材和儀器16-17
• 2.4 實(shí)驗(yàn)溶液及培養(yǎng)基的配制17-18
• 2.5 SK-Hep-1細(xì)胞培養(yǎng)18-20
• 2.6 ρ~0SK-Hep-1細(xì)胞的培養(yǎng)和制備20-21
• 2.7 WST-8法繪制SK-Hep-1和p~0SK-Hep-1細(xì)胞生長曲線21
• 2.8 OSW-1對(duì)SK-Hep-1和p~0SK-Hep-1細(xì)胞PI3K信號(hào)通路基因表達(dá)水平的定21-25
• 2.9 采用ΔΔCt方法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析25-26
• 2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理26-27
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-32
• 3.1 OSW-1抑制SK-Hep-1細(xì)胞生長并致其死亡27
• 3.2 生長缺陷鑒定27-28
• 3.3 WST-8法繪制生長曲線28-29
• 3.4 變性瓊脂糖凝膠電泳檢測實(shí)驗(yàn)細(xì)胞RNA的純度29-30
• 3.5 OSW-1對(duì)SK-Hep-1細(xì)胞的PI3K信號(hào)傳導(dǎo)通路中基因表達(dá)的影響30
• 3.6 mtDNA缺失對(duì)SK-Hep-1細(xì)胞的PI3K信號(hào)傳導(dǎo)通路中基因表達(dá)的影響30-31
• 3.7 OSW-1對(duì)p~0SK-Hep-1細(xì)胞的PI3K信號(hào)傳導(dǎo)通路中基因表達(dá)的影響31-32
• 第四章 討論32-41
• 第五章 結(jié)論41-42
• 參考文獻(xiàn)42-47
• 致謝47-48
• 綜述48-55
• 綜述參考文獻(xiàn)53-55

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