發(fā)布時間：2017-10-19 23:16

  本文關(guān)鍵詞：miR-125b在胃癌中的功能機(jī)制及其對順鉑化療敏感性的影響

  更多相關(guān)文章： miR-125b 胃癌 化療敏感性 HER2

【摘要】：背景：胃癌是胃粘膜上皮和腺上皮發(fā)生的惡性腫瘤,屬消化系統(tǒng)常見腫瘤之一,是一類死亡率極高的惡性腫瘤。目前化療是胃癌的重要治療手段,順鉑(DDP)是治療胃癌最常用的化療藥物之一,但在化療期間易出現(xiàn)耐藥性。因此,尋找一種化療增敏劑對改善胃癌化療效果具有非常重要的意義。MicroRNA (miRNA)是一類長度大約為20nt左右的小RNA分子,其通過發(fā)揮致癌或抑癌因子的角色,在包括胃癌在內(nèi)的多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中均發(fā)揮重要作用。已有研究證實(shí)，miRNA參與調(diào)節(jié)腫瘤的化療耐藥過程,為開辟新的化療增敏劑提供了一個新的思路。本課題組根據(jù)胃癌及癌旁正常組織樣本的芯片結(jié)果,經(jīng)過系統(tǒng)分析后確定,胃癌組織中存在多個有明顯表達(dá)差異的]miRNAs,我們從中挑選出下調(diào)較明顯的miR-125b進(jìn)一步研究。目的：探討microRNA-125b (miR-125b)在胃癌中的作用機(jī)制及其對化療藥物DDP的影響。方法：收集經(jīng)術(shù)后病理確診為胃癌的胃癌組織標(biāo)本和癌旁正常組織標(biāo)本，采用熒光實(shí)時定量PCR法檢測miR-125b在胃癌組織和癌旁正常組織中的相對表達(dá)情況。在胃癌細(xì)胞系中,采用細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測miR-125b過表達(dá)組和陰性對照(NC)組胃癌細(xì)胞遷移、侵襲能力的差異,采用細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測兩組胃癌細(xì)胞的增殖能力及其受DDP處理后的增殖能力差異。結(jié)果：miR-125b的表達(dá)水平在胃癌組織中較癌旁正常組織明顯下調(diào)。在胃癌細(xì)胞系中,過表達(dá)組較NC組的細(xì)胞遷移、侵襲和增殖能力明顯下降,且受DDP處理后的增殖能力也顯著下降。在對miR-125b表達(dá)量與患者臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析中發(fā)現(xiàn),miR-125b表達(dá)與胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HER2表達(dá)及患者的總生存期有一定相關(guān)性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：miR-125b在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中,發(fā)揮了重要的抑癌作用,它抑制了胃癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移,并增加胃癌細(xì)胞對化療藥物DDP的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：miR-125b 胃癌 化療敏感性 HER2
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中英文縮略詞表7-8
• 中文摘要8-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-22
• 一、實(shí)驗(yàn)材料15-16
• 1、細(xì)胞系15
• 2、胃組織標(biāo)本15
• 3、藥品、血清、培養(yǎng)基及添加劑15
• 4、miRNA mimic15
• 5、試劑盒及主要生化試劑15-16
• 6、Taqman探針16
• 7、儀器及設(shè)備16
• 8、生物信息學(xué)分析軟件16
• 二、實(shí)驗(yàn)方法16-21
• 1、細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)16-19
• 1.1 細(xì)胞的生長條件16-17
• 1.2 細(xì)胞復(fù)蘇17
• 1.3 細(xì)胞傳代17
• 1.4 細(xì)胞凍存17
• 1.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染17-18
• 1.6 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)18
• 1.7 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)18
• 1.8 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)18
• 1.9 DDP處理胃癌細(xì)胞18-19
• 2、蘇木素-伊紅染色(H&E染色)19
• 3、細(xì)胞或組織內(nèi)提取總RNA、逆轉(zhuǎn)錄、Taqman stem-loop RT-qPCR19-21
• 3.1 Trizol法提取總RNA19-20
• 3.2 RNA質(zhì)量的檢測20
• 3.3 miRNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA20-21
• 3.4 DNA質(zhì)量的檢測21
• 3.5 Taqman stem-loop RT-PCR21
• 三、統(tǒng)計學(xué)分析21-22
• 結(jié)果22-35
• 一、miR-125b在胃癌組織中的表達(dá)22-23
• 1、miR-125b在胃癌組織中的芯片分析22
• 2、miR-125b在胃癌組織中的差異表達(dá)22-23
• 二、miR-125b與臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析23-27
• 1、miR-125b的表達(dá)水平與胃癌患者臨床數(shù)據(jù)的相關(guān)性分析24-26
• 2、miR-125b表達(dá)與胃癌患者無進(jìn)展生存時間(PFS)、總生存期(OS)的相關(guān)性分析26-27
• 三、miR-125b在胃癌細(xì)胞系中的表達(dá)27-29
• 1、miR-125b在胃癌細(xì)胞系中的差異表達(dá)27-28
• 2、檢驗(yàn)miR-125b的轉(zhuǎn)染效率28-29
• 四、miR-125b在胃癌細(xì)胞系中的功能實(shí)驗(yàn)29-32
• 1、過表達(dá)miR-125b對細(xì)胞增殖的影響30
• 2、過表達(dá)miR-125b對細(xì)胞遷移的影響30-31
• 3、過表達(dá)miR-125b對細(xì)胞侵襲的影響31-32
• 五、miR-125b對DDP的化療增敏作用32-34
• 1、miR-125b起化療增敏作用時的DDP濃度32-33
• 2、miR-125b對DDP起化療增敏作用的時間33-34
• 六、miR-125b靶基因的預(yù)測與分析34-35
• 1、miR-125b靶基因的預(yù)測34
• 2、胃癌組織HER2表達(dá)水平與miR-125b表達(dá)量的相關(guān)性分析34-35
• 討論35-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-46
• 文獻(xiàn)綜述46-58
• 參考文獻(xiàn)53-58
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章情況58-59
• 致謝59

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本文編號：1063891