本文關(guān)鍵詞：GM130對胃癌細(xì)胞O—糖基化及細(xì)胞粘附能力的影響

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【摘要】：目的:初步探討沉默高爾基體基質(zhì)蛋白130(Golgi Matrix Protein130,GM130)基因?qū)ξ赴┘?xì)胞MKN-45 O-糖基化及細(xì)胞粘附能力的影響。方法:通過siRNA干擾胃癌細(xì)胞中GM130的表達(dá)水平,用Lipofectamine 2000將GM130-siRNA轉(zhuǎn)染入MKN-45細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為GM130-si RNA組、陰性對照組和空白對照組。分別用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western Blot檢測轉(zhuǎn)染后各組中GM130、N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(Polypeptide N-acetyl galactosaminyl transferase 2,ppGal NAc-T2)、核心1β3半乳糖基轉(zhuǎn)移酶(core 1 synthase,glycoprotein-N-acetylgalactosamine3-β-galactosyltransferase1,C1Gal-T1)、β-半乳糖α-2,3-唾液酸轉(zhuǎn)移酶1(beta-galactoside alpha-2,3-sialyltransferase,ST3Gal-1)mRNA和蛋白表達(dá)的變化。應(yīng)用凝集素流式細(xì)胞術(shù)檢測三組細(xì)胞中α2,3唾液酸殘基糖鏈結(jié)構(gòu)的表達(dá)變化�；|(zhì)膠粘附實(shí)驗(yàn)和腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞粘附能力。結(jié)果:實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western Blot結(jié)果顯示GM130基因與蛋白水平明顯受到抑制,表明轉(zhuǎn)染成功;GM130-siRNA組C1Gal-T1、ST3Gal-1的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯降低(P均0.05),ppGalNAc-T2在三組中無明顯變化(P0.05),α2,3唾液酸糖鏈結(jié)構(gòu)的表達(dá)量降低(P0.05),細(xì)胞粘附能力下降(P0.05)。結(jié)論:在MKN-45細(xì)胞中,下調(diào)GM130后,可能通過下調(diào)C1Gal-T1、ST3Gal-1的表達(dá)影響胃癌細(xì)胞O-糖基化,降低腫瘤細(xì)胞粘附能力。
【關(guān)鍵詞】：GM130 RNA干擾 胃癌 糖基化 粘附
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-23
• 2 結(jié)果23-29
• 3 討論29-31
• 全文小結(jié)31-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 文獻(xiàn)綜述35-43
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 致謝43-44
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文44

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本文編號：1051910