粉防己堿對胃癌細(xì)胞MGC 803的增殖抑制作用及其機(jī)制研究
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【摘要】:背景胃癌是最常見的惡性消化道腫瘤之一,雖然全世界范圍內(nèi)胃癌的發(fā)病率有下降的趨勢,然而,在大多數(shù)亞洲國家胃癌的發(fā)病率依然高居不下。我國是胃癌的高發(fā)地區(qū)之一,胃癌在惡性腫瘤中發(fā)病率占第二位,死亡率占第三位,嚴(yán)重影響著我國人民的生活質(zhì)量。因此,胃癌的防治依然是我國亟待解決的醫(yī)療問題;熓俏赴┲委煹闹匾侄,主要用于不適宜手術(shù)的患者以及術(shù)后防治復(fù)發(fā)。然而由于胃癌發(fā)病機(jī)制的復(fù)雜性以及化療藥物的嚴(yán)重不良反應(yīng)和耐藥性的產(chǎn)生,化療的效果受到了嚴(yán)重的影響。因此,尋找顯著療效的化療藥物仍具有重要的意義。近年來,粉防己堿作為化療藥物在腫瘤治療中的應(yīng)用逐漸被大家所關(guān)注。目的本文以粉防己堿為研究對象,研究粉防己堿對體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞株MGC803的抑制作用及其機(jī)制,探討粉防己堿在胃癌化療中的作用。方法MTT法考察粉防己堿對胃癌細(xì)胞株MGC 803的增殖抑制作用并計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50);結(jié)晶紫染色法考察粉防己堿對胃癌細(xì)胞株MGC 803形成克隆能力的影響;Hoechst 33258染色法觀察粉防己堿處理MGC 803細(xì)胞后細(xì)胞核的形態(tài);利用AnnexinV-FITC/PI染色法,流式細(xì)胞儀檢測粉防己堿對胃癌細(xì)胞株MGC 803細(xì)胞凋亡的影響;PI染色法,流式細(xì)胞儀檢測粉防己堿對胃癌細(xì)胞株MGC 803細(xì)胞周期分布的影響;JC-1熒光染色法考察粉防己堿對胃癌MGC 803細(xì)胞線粒體膜電位的影響;DCFH-DA熒光探針染色法檢測粉防己堿對胃癌細(xì)胞株MGC 803細(xì)胞內(nèi)活性氧含量的影響;Transwell法考察粉防己堿對胃癌細(xì)胞株MGC 803細(xì)胞的遷移能力的影響;Western blot分析粉防己堿對胃癌MGC 803細(xì)胞體外抑制作用的機(jī)制。結(jié)果(1)MTT結(jié)果顯示,粉防己堿在體外能抑制人胃癌MGC 803細(xì)胞的增殖并呈時(shí)間和濃度依賴性。(2) 克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,粉防己堿抑制胃癌MGC 803細(xì)胞的單細(xì)胞增殖能力。(3)Hoechst 33258染色結(jié)果顯示,粉防己堿處理胃癌MGC 803細(xì)胞后,隨著藥物濃度的增大,細(xì)胞核逐漸出現(xiàn)固鎖、濃染的現(xiàn)象,預(yù)示著凋亡的發(fā)生。(4)流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,粉防己堿能濃度依賴性地誘導(dǎo)胃癌MGC 803細(xì)胞發(fā)生凋亡。(5)流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示,粉防己堿誘導(dǎo)了胃癌MGC 803細(xì)胞發(fā)生G2/M期周期阻止并具有濃度依賴性。(6) JC-1染色結(jié)果顯示,粉防己堿處理導(dǎo)致了胃癌MGC 803細(xì)胞線粒體膜電位的下降。(7) DCFH-DA染色結(jié)果顯示,粉防己堿處理后胃癌細(xì)胞MGC 803細(xì)胞內(nèi)的活性氧含量上升。(8) Transwell結(jié)果顯示,粉防己堿抑制了胃癌細(xì)胞MGC 803的遷移能力。(9) Western blot結(jié)果顯示,粉防己堿作用于胃癌MGC 803細(xì)胞后,上調(diào)了p53、 Bax和cleaved-PARP的蛋白表達(dá)水平,下調(diào)了Bcl-2、N-cadherin的蛋白表達(dá)量。結(jié)論粉防己堿能抑制胃癌MGC 803細(xì)胞的增殖和遷移,可能是潛在的胃癌化療藥物。
【關(guān)鍵詞】:粉防已堿 胃癌 凋亡 遷移 活性氧
【學(xué)位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.2
【目錄】:
- 摘要5-7
- Abstract7-12
- 前言12-13
- 材料與方法13-31
- 結(jié)果31-42
- 討論42-45
- 小結(jié)45-46
- 參考文獻(xiàn)46-51
- 文獻(xiàn)綜述 粉防己堿研究進(jìn)展51-61
- 參考文獻(xiàn)57-61
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況61-62
- 致謝62-63
- 個(gè)人簡歷63
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