本文關(guān)鍵詞：mTORC2抑制致肝癌細胞周期阻滯及MDR1下調(diào)

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【摘要】：哺乳動物雷帕霉素受體(mTOR)在人類肝細胞肝癌(HCC)中異�；罨�,在肝癌腫瘤生成及化療耐藥方面起著至關(guān)重要的作用。雷帕霉素作用于哺乳動物雷帕霉素受體復(fù)合物1(mTORCl),在肝癌中不僅能起到抗腫瘤作用,而且能增強肝癌細胞對細胞毒性藥物的敏感性。然而,mTORCl抑制引起的負反饋作用會導(dǎo)致蛋白激酶B (PKB/AKT)的激活,因此同時針對mTORCl和mTORC2的抑制可能可以起到更好的抗腫瘤效應(yīng)。 本研究通過體內(nèi)和體外實驗,探究mTORCl/2雙重抑制劑OSI-027和多柔比星聯(lián)合治療肝癌時的相互作用及其機制。我們發(fā)現(xiàn)OSI-027可同時下調(diào)mTORCl和mTORC2底物的磷酸化,包括4E-BP1. p70S6K及AKT(Ser473),抑制肝癌細胞的增殖；OSI-027處理或沉默mTORC2基因均可導(dǎo)致肝癌細胞發(fā)生G0/G1期細胞周期阻滯。相反,雷帕霉素處理或沉默mTORCl基因會導(dǎo)致AKT (Ser473)磷酸化水平的上調(diào),對肝癌細胞則幾乎沒有抗增殖作用。體外實驗中,OSI-027通過下調(diào)多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MDR1)的表達,與多柔比星協(xié)同殺傷肝癌細胞；在裸鼠異種移植物模型中,OSI-027與多柔比星可以起到類似的協(xié)同抗肝癌作用。此外,我們還發(fā)現(xiàn)OSI-027所致的細胞周期阻滯及MDR1下調(diào)中均依賴AKT的活性。 本研究為諸如OSI-027之類的mTORCl/2雙重抑制劑作為單藥或與細胞毒性藥物聯(lián)合治療肝細胞肝癌提供了依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：肝細胞肝癌 HCC OSI-027 哺乳動物雷帕霉素受體 mTOR 蛋白激酶B AKT 細胞周期 多藥耐藥相關(guān)蛋白1 MDR1
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstracts7-9
• 插圖和附表清單9-10
• 縮略詞表10-14
• 1 前言14-16
• 2 研究材料與方法16-20
• 2.1 細胞系與細胞培養(yǎng)16
• 2.2 實驗試劑和抗體16
• 2.3 細胞活力和增殖檢測16-17
• 2.4 胞凋亡和周期分析17
• 2.5 藥物聯(lián)合指數(shù)分析17
• 2.6 RNA干擾實驗17-18
• 2.7 實時熒光定量PCR18
• 2.8 WESTERN BLOT免疫印跡18
• 2.9 體內(nèi)實驗18-20
• 3 結(jié)果20-33
• 3.1 OSI-027對肝癌細胞存在劑量依賴性的生長抑制作用20-21
• 3.2 OSI-027同時抑制肝癌細胞MTORC1和MTORC2信號通路21-23
• 3.3 OSI-027誘導(dǎo)肝癌細胞出現(xiàn)周期阻滯23-25
• 3.4 G_0/G_1期周期阻滯源于MTORC2抑制25-26
• 3.5 OSI-027逆轉(zhuǎn)多柔比星誘導(dǎo)的MDR1上調(diào)與多柔比星起協(xié)同作用26-31
• 3.6 OSI-027和多柔比星聯(lián)用有效抑制肝癌異種移植物的腫瘤生長31-32
• 3.7 OSI-027誘導(dǎo)肝癌細胞周期阻滯及MDR1下調(diào)依賴AKT活性32-33
• 4 討論33-37
• 5 結(jié)論37-38
• 參考文獻38-44
• 綜述44-58
• 參考文獻52-58
• 作者簡歷58

【共引文獻】

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1 吳窮;李玉梅;汪蕊;談q，

本文編號：1040862