本文關(guān)鍵詞：miR-200c對乳腺癌BT549細(xì)胞遷移及Slug表達(dá)的作用

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【摘要】：乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一,我國乳腺癌發(fā)病率占全身各種惡性腫瘤的7%~10%,部分大城市報告乳腺癌已占女性惡性腫瘤之首。根據(jù)2011年St Gallen乳腺癌分子分型共識,利用分子標(biāo)志物雌激素受體(estrogen receptor,ER)、孕激素受體(progesterone receptor,PR)和人類上皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor,Her2),將乳腺癌分為luminal A型、luminal B型、Her-2型和basal-like型,其中basal-like型乳腺癌不表達(dá)ER、PR和Her2,侵襲性強(qiáng),對內(nèi)分泌和分子治療無效。Snail是第一個被發(fā)現(xiàn)也是最重要的E-鈣粘連蛋白轉(zhuǎn)錄抑制因子,E-鈣粘連蛋白又與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)密切相關(guān)。mi R則是近幾年發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控蛋白表達(dá)的小分子RNA。本研究通過基因分析與預(yù)測發(fā)現(xiàn)mi R-200c可以與Snail超家族中的Snail2(Slug)結(jié)合,且已有研究表明mi R-200超家族在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤和前列腺癌細(xì)胞中,通過調(diào)控Slug基因,提升E-鈣粘連蛋白表達(dá),進(jìn)而抑制EMT、阻滯細(xì)胞遷移。然而,mi R-200c在basal-like型乳腺癌細(xì)胞中是否與Slug具有相關(guān)性,是否通過抑制Slug進(jìn)而提升E-鈣粘連蛋白的表達(dá),降低EMT的發(fā)生,目前還尚未見相關(guān)報道。目的本研究以basal-like型乳腺癌細(xì)胞株BT549為研究對象,將mi R-200c轉(zhuǎn)染進(jìn)入BT549細(xì)胞,探討mi R-200c與Slug基因表達(dá)的關(guān)系,以及mi R-200c對BT549細(xì)胞遷移的影響,以期為臨床診斷與治療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法1、研究對象及分組:用含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng)BT549細(xì)胞(細(xì)胞購自ATCC細(xì)胞庫),置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),取對數(shù)生長期細(xì)胞接種于6孔板,每孔接種1×105個細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分3組:mi R-200c組(轉(zhuǎn)染mi R-200c)、mi R-control組(轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒)和對照組(未轉(zhuǎn)染質(zhì)粒),每組設(shè)3個復(fù)孔。2、利用Transwell遷移試驗(yàn)和劃痕試驗(yàn),研究mi R-200c對乳腺癌BT549細(xì)胞遷移能力的影響;3、利用Real time PCR方法,檢測mi R-200c對乳腺癌BT549細(xì)胞Slug和E-鈣粘連蛋白m RNA的表達(dá)變化情況;4、利用Western blot方法,檢測mi R-200c對乳腺癌BT549細(xì)胞Slug蛋白的表達(dá)變化情況。結(jié)果1、與對照組和mi R-control組比較,mi R-200c組BT549細(xì)胞的遷移能力下降,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000);2、與對照組和mi R-control組比較,mi R-200c組BT549細(xì)胞中Slug m RNA表達(dá)降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002),而E-鈣粘連蛋白m RNA表達(dá)升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.004)。3、與對照組和mi R-control組比較,mi R-200c組BT549細(xì)胞中Slug蛋白表達(dá)量下降,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。結(jié)論mi R-200c對basal-like型乳腺癌BT549細(xì)胞中的Slug基因表達(dá)具有下調(diào)作用,進(jìn)而上調(diào)E-鈣粘連蛋白的表達(dá),是抑制乳腺癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和阻滯細(xì)胞遷移的重要因素之一。
【關(guān)鍵詞】：miR-200c Slug E-鈣粘連蛋白 乳腺癌 BT549
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.9
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 中英文縮略詞對照表10-11
• 1 引言11-15
• 2 材料與方法15-29
• 3 結(jié)果29-32
• 4 討論32-37
• 5 結(jié)論37-38
• 6 創(chuàng)新點(diǎn)38-39
• 7 總結(jié)與展望39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 綜述43-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 個人簡介及攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章59-61
• 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 Binhua P.Zhou;;Epithelial-mesenchymal transition in breast cancer progression and metastasis[J];癌癥;2011年09期

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本文編號：1037954