本文關(guān)鍵詞：血根堿通過激活活性氧產(chǎn)生誘導(dǎo)頭頸癌細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 雙色熒光報(bào)告系統(tǒng) 細(xì)胞凋亡 血根堿 生物發(fā)光成像

【摘要】：細(xì)胞凋亡,是程序性的細(xì)胞死亡。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞凋亡過程與多種疾病相關(guān),但是對凋亡機(jī)制的研究還不夠深入。本文采用整合了DEVD位點(diǎn)的螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因Cyclic Fluc和海腎熒光素酶報(bào)告基因PRL TK的雙色熒光報(bào)告基因系統(tǒng),對血根堿誘導(dǎo)的頭頸癌細(xì)胞凋亡的機(jī)制進(jìn)行了一系列的研究。在14種天然化合物藥物分別與22B細(xì)胞作用后對其進(jìn)行了雙色熒光檢測,推測血根堿可以誘導(dǎo)頭頸癌細(xì)胞凋亡。進(jìn)而通過對caspase3的蛋白進(jìn)行了western blot實(shí)驗(yàn)確定了血根堿可使Caspase3蛋白表達(dá)增強(qiáng);用不同濃度的血根堿對22B細(xì)胞進(jìn)行了CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),確定血根堿濃度的升高對22B細(xì)胞增殖的影響;用流式細(xì)胞儀檢測不同濃度的血根堿作用于22B細(xì)胞后細(xì)胞凋亡的數(shù)目與血根堿濃度的關(guān)系。并研究了caspase3活性與血根堿作用濃度的關(guān)系;判斷血根堿誘導(dǎo)22B細(xì)胞凋亡過程的時(shí)間依賴性和藥物濃度依賴性;此外,研究了ROS與細(xì)胞凋亡過程中的作用,以及得出NF-кB細(xì)胞通路和JNK細(xì)胞通路是本凋亡過程中起調(diào)控作用的細(xì)胞通路。最后建立了裸鼠腫瘤模型,研究Cyclic Fluc在體的激活和表達(dá)。以上研究發(fā)現(xiàn)血根堿通過激活活性氧產(chǎn)生誘導(dǎo)頭頸癌細(xì)胞凋亡,為頭頸癌治療提供了的一種潛在藥物。
【關(guān)鍵詞】：雙色熒光報(bào)告系統(tǒng) 細(xì)胞凋亡 血根堿 生物發(fā)光成像
【學(xué)位授予單位】：西安電子科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.91
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 符號(hào)對照表9-10
• 縮略語對照表10-13
• 第一章 前言13-31
• 1.1 頭頸癌及其現(xiàn)狀13-14
• 1.2 細(xì)胞凋亡簡介14-15
• 1.3 細(xì)胞凋亡的過程15-16
• 1.4 細(xì)胞凋亡的機(jī)制與細(xì)胞通路16-22
• 1.4.1 活性氧作用機(jī)制16-19
• 1.4.2 細(xì)胞通路19-22
• 1.5 細(xì)胞凋亡的傳統(tǒng)檢測方法22-23
• 1.6 熒光素酶報(bào)告基因23-26
• 1.7 生物發(fā)光成像26-27
• 1.7.1 生物發(fā)光成像技術(shù)的原理26
• 1.7.2 在體生物發(fā)光成像技術(shù)的應(yīng)用26-27
• 1.8 血根堿27-29
• 1.8.1 血根堿簡介27
• 1.8.2 血根堿的藥理作用27-29
• 1.9 本論文的研究意義及內(nèi)容29-31
• 第二章 材料與方法31-43
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料31
• 2.2 細(xì)菌和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)31-42
• 2.2.1 細(xì)菌接種31-32
• 2.2.2 質(zhì)粒提取與濃度測定32
• 2.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)32-34
• 2.2.4 細(xì)胞鋪板和細(xì)胞轉(zhuǎn)染34-35
• 2.2.5 Western blot實(shí)驗(yàn)35-39
• 2.2.6 Caspase3活性檢測39-40
• 2.2.7 CCK-8 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)40
• 2.2.8 流式細(xì)胞術(shù)40-41
• 2.2.9 穩(wěn)定細(xì)胞系的篩選41-42
• 2.2.10 活體成像42
• 2.3 本章小結(jié)與討論42-43
• 第三章 血根堿能夠22B細(xì)胞凋亡43-51
• 3.1 Cyclic Fluc螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因的驗(yàn)證43-44
• 3.1.1 Cyclic Fluc報(bào)告基因43
• 3.1.2 Cyclic Fluc報(bào)告基因的驗(yàn)證43-44
• 3.2 藥物篩選44-46
• 3.3 Caspase3蛋白表達(dá)檢測46
• 3.4 CCK-8 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)46-47
• 3.5 流式細(xì)胞術(shù)47-48
• 3.6 本章小結(jié)與討論48-51
• 第四章 血根堿誘導(dǎo)22B細(xì)胞凋亡的機(jī)制及活體成像51-59
• 4.1 Caspase3的藥物濃度依賴性51
• 4.2 凋亡過程的藥物濃度依賴性和時(shí)間依賴性51-53
• 4.3 ROS作用機(jī)制和信號(hào)通路53-55
• 4.3.1 ROS作用機(jī)制53-54
• 4.3.2 細(xì)胞通路54-55
• 4.4 細(xì)胞凋亡的活體成像55-56
• 4.4.1 小鼠體內(nèi)成像實(shí)驗(yàn)55-56
• 4.5 本章小結(jié)與討論56-59
• 第五章 總結(jié)與展望59-61
• 參考文獻(xiàn)61-69
• 致謝69-71
• 作者簡介71-72

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 易健;舒徐;;活性氧對細(xì)胞凋亡和增殖的調(diào)控作用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2013年10期

2 曹東旭;元英進(jìn);;槐果堿對人紅白血病K562細(xì)胞的增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用[J];天津科技大學(xué)學(xué)報(bào);2006年04期

，

本文編號(hào)：1032087