本文關鍵詞：血根堿通過激活活性氧產(chǎn)生誘導頭頸癌細胞凋亡的機制研究

  更多相關文章： 雙色熒光報告系統(tǒng) 細胞凋亡 血根堿 生物發(fā)光成像

【摘要】：細胞凋亡,是程序性的細胞死亡�，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),細胞凋亡過程與多種疾病相關,但是對凋亡機制的研究還不夠深入。本文采用整合了DEVD位點的螢火蟲熒光素酶報告基因Cyclic Fluc和海腎熒光素酶報告基因PRL TK的雙色熒光報告基因系統(tǒng),對血根堿誘導的頭頸癌細胞凋亡的機制進行了一系列的研究。在14種天然化合物藥物分別與22B細胞作用后對其進行了雙色熒光檢測,推測血根堿可以誘導頭頸癌細胞凋亡。進而通過對caspase3的蛋白進行了western blot實驗確定了血根堿可使Caspase3蛋白表達增強;用不同濃度的血根堿對22B細胞進行了CCK-8細胞增殖實驗,確定血根堿濃度的升高對22B細胞增殖的影響;用流式細胞儀檢測不同濃度的血根堿作用于22B細胞后細胞凋亡的數(shù)目與血根堿濃度的關系。并研究了caspase3活性與血根堿作用濃度的關系;判斷血根堿誘導22B細胞凋亡過程的時間依賴性和藥物濃度依賴性;此外,研究了ROS與細胞凋亡過程中的作用,以及得出NF-кB細胞通路和JNK細胞通路是本凋亡過程中起調(diào)控作用的細胞通路。最后建立了裸鼠腫瘤模型,研究Cyclic Fluc在體的激活和表達。以上研究發(fā)現(xiàn)血根堿通過激活活性氧產(chǎn)生誘導頭頸癌細胞凋亡,為頭頸癌治療提供了的一種潛在藥物。
【關鍵詞】：雙色熒光報告系統(tǒng) 細胞凋亡 血根堿 生物發(fā)光成像
【學位授予單位】：西安電子科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.91
【目錄】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-9
• 符號對照表9-10
• 縮略語對照表10-13
• 第一章 前言13-31
• 1.1 頭頸癌及其現(xiàn)狀13-14
• 1.2 細胞凋亡簡介14-15
• 1.3 細胞凋亡的過程15-16
• 1.4 細胞凋亡的機制與細胞通路16-22
• 1.4.1 活性氧作用機制16-19
• 1.4.2 細胞通路19-22
• 1.5 細胞凋亡的傳統(tǒng)檢測方法22-23
• 1.6 熒光素酶報告基因23-26
• 1.7 生物發(fā)光成像26-27
• 1.7.1 生物發(fā)光成像技術的原理26
• 1.7.2 在體生物發(fā)光成像技術的應用26-27
• 1.8 血根堿27-29
• 1.8.1 血根堿簡介27
• 1.8.2 血根堿的藥理作用27-29
• 1.9 本論文的研究意義及內(nèi)容29-31
• 第二章 材料與方法31-43
• 2.1 實驗材料31
• 2.2 細菌和細胞實驗31-42
• 2.2.1 細菌接種31-32
• 2.2.2 質(zhì)粒提取與濃度測定32
• 2.2.3 細胞培養(yǎng)32-34
• 2.2.4 細胞鋪板和細胞轉(zhuǎn)染34-35
• 2.2.5 Western blot實驗35-39
• 2.2.6 Caspase3活性檢測39-40
• 2.2.7 CCK-8 細胞增殖實驗40
• 2.2.8 流式細胞術40-41
• 2.2.9 穩(wěn)定細胞系的篩選41-42
• 2.2.10 活體成像42
• 2.3 本章小結與討論42-43
• 第三章 血根堿能夠22B細胞凋亡43-51
• 3.1 Cyclic Fluc螢火蟲熒光素酶報告基因的驗證43-44
• 3.1.1 Cyclic Fluc報告基因43
• 3.1.2 Cyclic Fluc報告基因的驗證43-44
• 3.2 藥物篩選44-46
• 3.3 Caspase3蛋白表達檢測46
• 3.4 CCK-8 細胞增殖實驗46-47
• 3.5 流式細胞術47-48
• 3.6 本章小結與討論48-51
• 第四章 血根堿誘導22B細胞凋亡的機制及活體成像51-59
• 4.1 Caspase3的藥物濃度依賴性51
• 4.2 凋亡過程的藥物濃度依賴性和時間依賴性51-53
• 4.3 ROS作用機制和信號通路53-55
• 4.3.1 ROS作用機制53-54
• 4.3.2 細胞通路54-55
• 4.4 細胞凋亡的活體成像55-56
• 4.4.1 小鼠體內(nèi)成像實驗55-56
• 4.5 本章小結與討論56-59
• 第五章 總結與展望59-61
• 參考文獻61-69
• 致謝69-71
• 作者簡介71-72

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 易健;舒徐;;活性氧對細胞凋亡和增殖的調(diào)控作用[J];基礎醫(yī)學與臨床;2013年10期

2 曹東旭;元英進;;槐果堿對人紅白血病K562細胞的增殖抑制和誘導凋亡作用[J];天津科技大學學報;2006年04期

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本文編號：1032087