本文關(guān)鍵詞：大鼠尿液中蝶呤類化合物及氨基酸分析新方法的研究

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【摘要】：國內(nèi)外文獻(xiàn)表明,蝶呤類化合物及氨基酸對生物體新陳代謝有著重要的意義,人體體液中蝶呤類化合物或氨基酸含量的變化,有可能為癌癥的早期診斷提供重要的參考價值。本文從生物體中蝶呤類化合物和氨基酸的分析技術(shù)、樣品前處理以及兩者與疾病相關(guān)性研究等方面進(jìn)行了綜述。在此基礎(chǔ)上,建立了同時測定蝶呤類化合物和氨基酸的離子色譜熒光法和高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法,然后采用離子色譜熒光法對大鼠膀胱癌模型組和對照組進(jìn)行尿液分析,尋找可能的膀胱癌腫瘤標(biāo)志物。其主要研究成果如下:1.建立了大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的離子色譜熒光分析法。大鼠尿液利用三氯乙酸除蛋白后,采用MCX固相萃取小柱進(jìn)行凈化,然后用離子色譜熒光法進(jìn)行測定。3種物質(zhì)的儀器檢出限分別為0.08,0.3和0.002μmol/L,加標(biāo)回收率在71.2%~121.7%之間,RSD小于11.7%。2.建立了大鼠尿液中黃蝶呤、異黃蝶呤、蝶呤-6-羧酸、酪氨酸和色氨酸的高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)的分析方法。大鼠尿液除去蛋白后,稀釋50倍直接進(jìn)樣分析,采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法消除基質(zhì)的影響。5種物質(zhì)的儀器檢出限分別為1.6,1.5,2.2,0.9和1.0 ng/m L,加標(biāo)回收率在89.0%~107.0%之間,RSD在0.30%~5.19%之間。3.將離子色譜熒光法應(yīng)用于對照組和膀胱癌模型組大鼠尿液中色氨酸、酪氨酸和蝶呤-6-羧酸的同時測定。測定結(jié)果顯示3種物質(zhì)在膀胱癌發(fā)生發(fā)展過程中呈現(xiàn)出不同的發(fā)展趨勢,其中色氨酸和蝶呤-6-羧酸有可能成為膀胱癌潛在的標(biāo)志物。
【關(guān)鍵詞】：黃蝶呤 異黃蝶呤 蝶呤-6-羧酸 酪氨酸 色氨酸 大鼠尿液 膀胱癌模型 離子色譜 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R730.43
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第一章 緒論9-28
• 1.1 前言9-10
• 1.2 蝶呤類化合物的研究現(xiàn)狀10-20
• 1.2.1 蝶呤類化合物概述10-11
• 1.2.2 蝶呤類化合物分析方法研究進(jìn)展11-18
• 1.2.3 臨床應(yīng)用18-20
• 1.3 氨基酸類化合物研究現(xiàn)狀20-23
• 1.3.1 氨基酸類化合物概況20
• 1.3.2 氨基酸類化合物分析方法20-22
• 1.3.3 臨床應(yīng)用22-23
• 1.4 本文研究的主要內(nèi)容23
• 參考文獻(xiàn)23-28
• 第二章 離子色譜熒光法同時測定大鼠尿液中的色氨酸、酪氨酸和蝶呤6羧酸28-39
• 2.1 引言28
• 2.2 實驗部分28-30
• 2.2.1 儀器與試劑28-29
• 2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制29
• 2.2.3 色譜條件29
• 2.2.4 尿樣前處理29-30
• 2.3 結(jié)果與討論30-37
• 2.3.1 淋洗液的選擇30-31
• 2.3.2 熒光檢測波長的選擇31
• 2.3.3 干擾實驗31-32
• 2.3.4 凈化方法的選擇32
• 2.3.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限32-33
• 2.3.6 回收率和精密度實驗33-35
• 2.3.7 樣品的測定35-37
• 2.4 結(jié)論37
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 第三章 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定大鼠尿液中可能的五種癌癥標(biāo)志物39-54
• 3.1 引言39
• 3.2 實驗部分39-41
• 3.2.1 儀器與試劑39-40
• 3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制40
• 3.2.3 樣品前處理40
• 3.2.4 色譜條件40
• 3.2.5 質(zhì)譜條件40-41
• 3.3 結(jié)果與討論41-52
• 3.3.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化41-47
• 3.3.2 色譜條件的選擇及優(yōu)化47-48
• 3.3.3 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢測限48-49
• 3.3.4 回收率與精密度試驗49-51
• 3.3.5 樣品的測定51-52
• 3.4 結(jié)論52
• 參考文獻(xiàn)52-54
• 第四章 大鼠尿液中酪氨酸、色氨酸和蝶呤6羧酸含量隨膀胱癌發(fā)展變化的研究54-65
• 4.1 引言54
• 4.2 實驗部分54-56
• 4.2.1 儀器與試劑54-55
• 4.2.2 大鼠膀胱癌模型的建立55
• 4.2.3 MIR掃描檢查55
• 4.2.4 色譜條件55
• 4.2.5 尿樣前處理55-56
• 4.3 結(jié)果與討論56-63
• 4.3.1 大鼠模型膀胱癌階段的確定56-57
• 4.3.2 尿樣分析57-63
• 4.4 結(jié)論63
• 參考文獻(xiàn)63-65
• 致謝65-66
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果66

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 萬益群,張云偉,郭嵐;紙色譜分離-熒光檢測法測定人體尿液中的黃蝶呤[J];分析科學(xué)學(xué)報;2004年04期

2 王慶山;;腫瘤早期診斷方法與應(yīng)用的進(jìn)展[J];中國冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2007年01期

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本文編號：1028181