本文關(guān)鍵詞：3T3、MCF-7和B16細(xì)胞的電化學(xué)行為

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【摘要】：目的通過應(yīng)用電化學(xué)方法對(duì)人體內(nèi)乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、黑色素瘤細(xì)胞(B16)以及小鼠成纖維細(xì)胞(3T3)進(jìn)行研究,考察了不同分泌時(shí)間對(duì)三種細(xì)胞電化學(xué)信號(hào)的影響,建立一種能夠區(qū)分正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的電化學(xué)方法。在三種細(xì)胞的裂解液中分別加入黃嘌呤氧化酶(XOD),采用電化學(xué)方法對(duì)細(xì)胞中的四種嘌呤:腺嘌呤(A)、鳥嘌呤(G)、黃嘌呤(X)和次黃嘌呤(H)含量進(jìn)行測定。方法本文選取細(xì)胞3T3、MCF-7、B16作為模型細(xì)胞,采用電化學(xué)循環(huán)伏安法對(duì)三種細(xì)胞進(jìn)行電化學(xué)測試,采用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)三種細(xì)胞的電化學(xué)循環(huán)伏安曲線進(jìn)行歸屬;并應(yīng)用電化學(xué)方法檢測不同分泌時(shí)間三種細(xì)胞電化學(xué)信號(hào)的變化情況,同時(shí)對(duì)三種細(xì)胞中腺嘌呤、鳥嘌呤、黃嘌呤和次黃嘌呤的含量進(jìn)行測定。結(jié)果在細(xì)胞分泌實(shí)驗(yàn)中,3T3細(xì)胞在分泌60分鐘時(shí),電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ達(dá)到最大值;MCF-7細(xì)胞在分泌40分鐘時(shí),電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ達(dá)到最大值;B16細(xì)胞在分泌50分鐘時(shí),電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ達(dá)到最大值。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出:腫瘤細(xì)胞的分泌能力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞。在對(duì)3T3、MCF-7以及B16細(xì)胞中四種嘌呤含量的定量分析試驗(yàn)中,加入黃嘌呤氧化酶后,三種細(xì)胞的電化學(xué)信號(hào)PeakⅠ和PeakⅡ均減小了,并產(chǎn)生了尿酸峰。通過對(duì)PeakⅠ和PeakⅡ原有的量和減少的量進(jìn)行減法計(jì)算,既得三種細(xì)胞中四種嘌呤的含量。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)采用電化學(xué)法考察不同分泌時(shí)間對(duì)三種細(xì)胞電化學(xué)信號(hào)的變化,建立電化學(xué)方法探索正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的區(qū)別。并在三種細(xì)胞的細(xì)胞裂解液中加入黃嘌呤氧化酶,建立采用電化學(xué)方法檢測細(xì)胞中四種嘌呤含量的方法。
【關(guān)鍵詞】：小鼠成纖維細(xì)胞(3T3) 人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7) 黑色素瘤細(xì)胞(B16) 黃嘌呤氧化酶(XOD) 電化學(xué)
【學(xué)位授予單位】：佳木斯大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R73-3
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 前言10-11
• 第1章 文獻(xiàn)綜述11-18
• 1.1 腫瘤細(xì)胞的特點(diǎn)11
• 1.2 正常細(xì)胞變?yōu)槟[瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)換過程11-12
• 1.3 細(xì)胞電化學(xué)法在細(xì)胞中嘌呤檢測方面的應(yīng)用12-15
• 1.3.1 細(xì)胞中嘌呤含量的檢測方法12-13
• 1.3.2 細(xì)胞電化學(xué)的應(yīng)用13-15
• 1.4 黃嘌呤氧化酶15-18
• 第2章 細(xì)胞 3T3、MCF-7 和 B16 的電化學(xué)伏安檢測18-29
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器18-19
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器18
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑18
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)材料18-19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-22
• 2.2.1 容器的預(yù)處理19
• 2.2.2 細(xì)胞完全培養(yǎng)基的配制19
• 2.2.3 PBS緩沖溶液的配制19-20
• 2.2.4 胰酶的配置20
• 2.2.5 細(xì)胞的培養(yǎng)20-21
• 2.2.6 嘌呤標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制21
• 2.2.7 電極的制備21
• 2.2.8 電化學(xué)檢測條件21
• 2.2.9 電化學(xué)測定系統(tǒng)21
• 2.2.10 3T3、B16、MCF-7 細(xì)胞裂解液的伏安行為檢測21
• 2.2.11 3T3、B16、MCF-7 細(xì)胞裂解液經(jīng)酶氧化后的伏安行為檢測21-22
• 2.3 結(jié)果與討論22-28
• 2.3.1 四種嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品的電化學(xué)行為22-23
• 2.3.2 3T3細(xì)胞的電化學(xué)行為23-25
• 2.3.3 MCF-7 細(xì)胞的電化學(xué)行為25-26
• 2.3.4 B16細(xì)胞的電化學(xué)行為26-28
• 2.4 小結(jié)28-29
• 第3章 3T3、B16、MCF-7 細(xì)胞分泌不同時(shí)間的電化學(xué)行為29-34
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器29-30
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器29
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑29
• 3.1.3 實(shí)驗(yàn)材料29-30
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法30
• 3.2.1 不同分泌時(shí)間 3T3、B16、MCF-7 細(xì)胞懸浮液的伏安行為檢測30
• 3.3 結(jié)果與討論30-33
• 3.3.1 3T3細(xì)胞分泌的電化學(xué)行為30-31
• 3.3.2 MCF-7 細(xì)胞分泌的電化學(xué)行為31-32
• 3.3.3 B16細(xì)胞分泌的電化學(xué)行為32-33
• 3.4 小結(jié)33-34
• 第4章 HPLC法檢測 3T3、B16、MCF-7 細(xì)胞裂解液上清液的研究34-40
• 4.1 儀器與材料34
• 4.1.1 儀器34
• 4.1.2 試驗(yàn)試劑34
• 4.1.3 材料34
• 4.2 試驗(yàn)34-35
• 4.2.1 配制流動(dòng)相34
• 4.2.2 配制標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)存液34-35
• 4.2.3 細(xì)胞樣品的收集及處理35
• 4.2.4 HPLC檢測的條件35
• 4.3 結(jié)果與討論35-39
• 4.3.1 四種嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品的 HPLC 檢測35-38
• 4.3.2 3T3、MCF-7 和 B16 三種細(xì)胞的高效液相檢測38-39
• 4.4 小結(jié)39-40
• 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-49
• 致謝49-50
• 英文縮寫50-51
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文51

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 何澤涌;;從分子水平看細(xì)胞的腫瘤化[J];山西醫(yī)藥雜志;1981年02期

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本文編號(hào)：1026448