負(fù)載耐受性乳腺癌抗原的DC在乳腺癌裸鼠中的研究初探
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【摘要】:目的探討負(fù)載耐受性乳腺癌抗原的樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)對乳腺癌裸鼠的抑瘤效果。方法以原代乳腺癌組織制備單細(xì)胞懸液,體外藥敏檢測化療藥物,獲取藥物的IC50值,并漸次用其1/10IC50、1/5IC50、1/2IC50、1IC50、2IC50值濃度沖擊處理腫瘤細(xì)胞,直至穩(wěn)定生長于2IC50值的培養(yǎng)基中。使用白細(xì)胞單采術(shù),從患者外周血中獲取外周血單個核細(xì)胞(PBMCs),通過GM-CSF和IL-4誘導(dǎo)貼壁細(xì)胞產(chǎn)生DCs,并分別負(fù)載耐藥株細(xì)胞裂解復(fù)合物和未經(jīng)耐藥處理的癌細(xì)胞裂解復(fù)合物,前者獲得負(fù)載耐受性乳腺癌抗原的成熟DCs。建立耐受性乳腺癌裸鼠模型,隨機(jī)分為三組:注射負(fù)載耐受性癌抗原的DC為實驗組(a),注射負(fù)載未經(jīng)耐受性乳腺癌抗原DC為對照組(b),注射同體積生理鹽水的為空白組(c),觀察荷瘤變化并繪制生長曲線。結(jié)果a組(實驗組)小鼠癌瘤體積(v)在第0 d和第14 d已有統(tǒng)計學(xué)差異(t=3.35,p0.05);第28 d以及第35 d癌瘤體積(v)均明顯小于第0 d小鼠癌瘤體積(t=5.21,6.37,P0.01);b組(對照組)小鼠癌瘤體積(v)在第28 d已明顯小于第0 d(t=4.17,p0.01),第35差異更加明顯(t=5.18,p0.01);c組(空白組)小鼠在第14 d、28 d與第0 d比較,癌瘤體積(v)增大(t=2.85,3.97),第35d顯著增大(t=4.57,P0.01);治療后第35d的癌瘤體積(v):a與c、b與c、a與b相比較,均有顯著差異,a組最小,c組最大,abc(F=9.65,P0.01);治療后第35d的癌瘤重量:a、b、c三組瘤質(zhì)量,組間兩兩比較差異顯著(F=8.95,P0.01)。結(jié)論負(fù)載耐受性乳腺癌抗原的DC對乳腺癌裸鼠模型的抑瘤效果顯著,抑瘤能力最強(qiáng)。
【關(guān)鍵詞】:樹突狀細(xì)胞 耐受性 乳腺癌 裸鼠
【學(xué)位授予單位】:青島大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R737.9;R730.43
【目錄】:
- 摘要2-4
- Abstract4-8
- 引言8-10
- 第一章 實驗材料和方法10-16
- 1.1 實驗材料10-11
- 1.1.1 原代乳腺癌細(xì)胞10
- 1.1.2 實驗試劑10
- 1.1.3 實驗儀器10-11
- 1.1.4 選用藥物11
- 1.1.5 實驗動物11
- 1.2 研究方法11-15
- 1.2.1 乳腺腫瘤組織消化11-12
- 1.2.2 體外藥敏檢測12
- 1.2.3 耐受性乳腺腫瘤細(xì)胞制取12-13
- 1.2.4 DC體外誘導(dǎo)培養(yǎng)13
- 1.2.5 負(fù)載耐受性抗原13
- 1.2.6 流式細(xì)胞儀檢測DC表型13-14
- 1.2.7 荷瘤裸鼠模型建立14-15
- 1.2.8 預(yù)實驗15
- 1.2.9 荷瘤鼠體內(nèi)殺瘤實驗15
- 1.3 統(tǒng)計處理和分析15-16
- 第二章 結(jié)果16-20
- 2.1 藥敏檢測判定標(biāo)準(zhǔn)16
- 2.2 IC50值的測定及藥物劑量曲線16-17
- 2.3 DC表型測定17
- 2.4 荷瘤鼠癌瘤體積變化及荷瘤質(zhì)量17-20
- 第三章 討論20-22
- 第四章 結(jié)論22-23
- 參考文獻(xiàn)23-25
- 文獻(xiàn)綜述25-39
- 參考文獻(xiàn)36-39
- 攻讀學(xué)位期間的研究成果39-40
- 致謝40-41
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本文編號:1024447
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