本文關(guān)鍵詞：毛蘭素聯(lián)合5-Fu對(duì)人胃癌細(xì)胞株MGC-803增殖凋亡的影響

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【摘要】：目的:觀察毛蘭素(Erianin)與5-Fu單藥及聯(lián)合用藥對(duì)胃癌細(xì)胞株MGC-803增殖、凋亡的影響,并探討兩藥是否可通過(guò)調(diào)控Bax、Bcl-2、Caspase-3基因的表達(dá)誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡,為尋找胃癌新藥或優(yōu)化5-Fu化療方案提供新的理論依據(jù)。方法:(1)以胃癌細(xì)胞株MGC-803為研究對(duì)象,用不同濃度的Erianin(0.977-250ng/ml)及5-Fu(781.250-200000ng/ml)處理胃癌細(xì)胞不同時(shí)間(24h,48h,72h),CCK-8法檢測(cè)吸光值并計(jì)算抑制率;(2)分別用五個(gè)不同濃度的Erianin和5-Fu單藥及固定比例聯(lián)合(Erianin0.977ng/ml+5-Fu 781.250ng/ml,Erianin 3.906ng/ml+5-Fu 3125ng/ml,Erianin15.625ng/ml+5-Fu 12500ng/ml,Erianin 62.500ng/ml+5-Fu 50000ng/ml,Erianin 250ng/ml+5-Fu 200000ng/ml)處理胃癌細(xì)胞48h,利用中效原理計(jì)算單藥組與聯(lián)合組IC50濃度及聯(lián)合用藥指數(shù)(CI);(3)根據(jù)中效原理計(jì)算出聯(lián)合組IC50濃度為4329.044ng/ml(Erianin 5.404ng/ml+5-Fu4323.640ng/ml),用此濃度作為后續(xù)所有實(shí)驗(yàn)濃度且均處理48h,各實(shí)驗(yàn)設(shè)單藥組(Erianin 5.404ng/ml、5-Fu 4323.640ng/ml)、聯(lián)合組(Erianin5.404ng/ml+5-Fu 4.324ug/ml)、對(duì)照組;(4)流式技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期阻滯情況;(5)AO/EB染色觀察細(xì)胞凋亡現(xiàn)象;(6)RT-PCR及Western Blot檢測(cè)Bcl-2、Bax、Caspase-3基因表達(dá)情況。結(jié)果:(1)Erianin及5-Fu單藥隨藥物濃度增大及作用時(shí)間延長(zhǎng)抑制胃癌細(xì)胞增殖作用增強(qiáng)(p0.05)。由中效原理計(jì)算可知,兩藥小劑量聯(lián)合時(shí)聯(lián)合指數(shù)(CI)1,大劑量聯(lián)合時(shí)聯(lián)合指數(shù)(CI)1;(2)流式技術(shù)可知Erianin主要阻滯胃癌細(xì)胞于G2/M期,5-Fu主要阻滯胃癌細(xì)胞于S期,聯(lián)合用藥時(shí)被阻滯于S期的細(xì)胞較單用5-Fu時(shí)少,被阻滯于G2/M期的細(xì)胞較單用Erianin時(shí)少;(3)AO/EB染色發(fā)現(xiàn),單藥組細(xì)胞凋亡現(xiàn)象較對(duì)照組明顯,而聯(lián)合組細(xì)胞凋亡現(xiàn)象又較單藥組明顯;(4)RT-PCR證實(shí)兩藥均可使胃癌細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bax、Bcl-2、Caspase-3的m RNA出現(xiàn)表達(dá),Western Blot進(jìn)一步證實(shí)兩藥可增加Bax、Caspase-3,減少Bcl-2蛋白的表達(dá),聯(lián)合用藥時(shí)增加Bax、Caspase-3,減少Bcl-2蛋白表達(dá)的作用較單藥組明顯(p0.05)。結(jié)論:(1)一定濃度范圍內(nèi)Erianin及5-Fu對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制作用呈時(shí)間及濃度依賴(lài)性;(2)兩藥小劑量聯(lián)合時(shí)具有拮抗作用,大劑量聯(lián)合時(shí)具有協(xié)同作用;(3)Erianin及5-Fu可通過(guò)調(diào)控Bax、Bcl-2、Caspase-3因子的表達(dá)促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：毛蘭素 5-Fu 胃癌 增殖 凋亡
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-10
• 主要英文縮略語(yǔ)索引10-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 材料與方法15-27
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法17-25
• 2.3 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析25-27
• 第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-37
• 第4章 討論37-43
• 第5章 結(jié)論43-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 文獻(xiàn)綜述49-59
• 參考文獻(xiàn)55-59
• 碩士在讀期間發(fā)表的文章目錄59-61
• 致謝61

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