本文關(guān)鍵詞：表達CCL20的重組腺病毒聯(lián)合熱療對大腸癌的免疫治療及機制

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【摘要】：腫瘤的免疫治療作為全球科技十大進展之首,近年來受到了廣泛的關(guān)注,探索新的免疫治療模式是腫瘤學(xué)研究的熱點之一。近年來以樹突狀細胞為基礎(chǔ)的腫瘤治療性疫苗取得了較好的進展,但由于腫瘤抗原的易變性、需在體外致敏樹突狀細胞后回輸?shù)炔僮鞯膹?fù)雜性,使得大部分樹突狀細胞疫苗仍處于實驗和臨床前期研究階段。本研究擬探索采用體內(nèi)致敏樹突狀細胞的方法,誘導(dǎo)抗腫瘤免疫應(yīng)答。我們采用了重組腺病毒載體與趨化因子CCL20 cDNA進行重組,將表達CCL20的重組腺病毒Ad5-CCL20體外轉(zhuǎn)染大腸癌細胞CT-26,Elisa檢測轉(zhuǎn)染后不同時間段CCL20的表達情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)已轉(zhuǎn)染病毒的CT-26細胞可高表達趨化因子CCL20,并且表達含量與轉(zhuǎn)染時間成正比,表達的CCL20可以顯著地趨化未成熟樹突狀細胞。將CT-26細胞經(jīng)42℃誘導(dǎo)后,檢測休克蛋白表達情況,Western blot檢測結(jié)果提示熱誘導(dǎo)后的CT-26細胞中HSP70、Gp96表達明顯增加,對熱休克蛋白與樹突狀細胞、T淋巴細胞之間的生物學(xué)效應(yīng)研究表明,熱誘導(dǎo)后的CT-26可明顯上調(diào)樹突狀細胞成熟表型MHC-II、CD80、CD86、CCR6的表達,并大量地分泌細胞因子TNF-α、IL-1α、IL-2、IL-6,誘導(dǎo)后的細胞上清也表現(xiàn)出對T淋巴細胞的明顯趨化作用及促進其高分泌IFN-γ的能力。通過瘤內(nèi)注射重組腺病毒Ad5-CCL20聯(lián)合體外熱療,荷瘤小鼠的腫瘤生長明顯受到抑制,且生存時間要顯著延長。本實驗證明了表達趨化因子CCL20的重組腺病毒與熱療相結(jié)合,可以有效抑制小鼠結(jié)腸癌的生長并延長生存時間,為后續(xù)的腫瘤治療提供了一條新的途徑。
【關(guān)鍵詞】：腺病毒 樹突狀細胞 趨化因子CCL20 熱療 大腸癌
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.34
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 詳細摘要7-14
• 縮略詞表14-15
• 前言15-20
• 第一部分 重組腺病毒載體Ad5-CCL20的構(gòu)建及鑒定20-39
• 一、材料和方法20-32
• 二、結(jié)果32-37
• 三、討論37-39
• 第二部分 體外熱療對轉(zhuǎn)染重組Ad5-CCL20小鼠結(jié)腸癌癌細胞株CT-26 的生物學(xué)功能影響的研究39-57
• 一、材料和方法39-48
• 二、結(jié)果48-54
• 三、討論54-57
• 全文小結(jié)57-59
• 參考文獻59-64
• 綜述 樹突狀細胞誘導(dǎo)的腫瘤免疫治療研究進展64-73
• 參考文獻69-73
• 在讀期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文73-74
• 致謝74

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本文編號：1008522