本文關(guān)鍵詞：P-糖蛋白與胰腺癌吉西他濱治療敏感性的關(guān)系及機制探討

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【摘要】：目的：(1)研究P-糖蛋白(P-gp)的表達與胰腺癌吉西他濱治療敏感性的關(guān)系。(2)研究腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡配體(TRAIL)聯(lián)合吉西他濱(GEM)對人胰腺癌吉西他濱耐藥細胞株SW1990/GEM的效應(yīng),并探索產(chǎn)生效應(yīng)的可能分子生物學(xué)機制。方法：(1)應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測胰腺癌術(shù)后患者的P-gp的表達水平。(2)應(yīng)用生存分析探討P-gp的表達水平對術(shù)后吉西他濱化療組和非吉西他濱化療組胰腺癌病人總生存期(OS)及無病生存期(DFS)的影響。(3)應(yīng)用CCK8法鑒定人胰腺癌吉西他濱耐藥細胞株SW1990/GEM,確定耐藥指數(shù)。(4)應(yīng)用CCK8法篩選腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體對人胰腺癌細胞株SW1990/GEM的亞毒性劑量。(5)應(yīng)用CCK8法及金氏公式篩選亞毒性劑量TRAIL與GEM的最佳聯(lián)合方案。(6)應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測TRAIL和GEM單獨或聯(lián)合干預(yù)SW1990/GEM后的細胞凋亡率。(7)用Western Blot法檢測TRAIL和GEM單獨或聯(lián)合干預(yù)SW1990/GEM后, P-gp、 Bcl-2、Bax 及 Cleaved-caspase3的表達情況。結(jié)果：(1)P-gp在胰腺癌術(shù)后組織中的陽性表達率為56.96%(45/79),其陽性表達主要表現(xiàn)在細胞膜或細胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。此外,P-gp的表達與胰腺癌術(shù)后病人的臨床病理參數(shù)均無相關(guān)性。(2)生存分析結(jié)果顯示,針對胰腺癌術(shù)后病人的OS及DFS, P-gp陽性表達組與陰性表達組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,P-gp的表達可能是胰腺癌術(shù)后吉西他濱輔助化療患者OS及DFS的獨立預(yù)后因素。(3)SW1990的IC50為5.93±0.08μmol/L, SW1990/GEM的IC50為178.70±20.32μmol/L, SW1990/GEM的耐藥指數(shù)為30.13。(4)CCK8結(jié)果顯示：亞毒性劑量TRAIL聯(lián)合GEM對SW1990/GEM細胞的生長抑制率超過兩者單獨使用(P0.05),兩藥具有協(xié)同作用。GEM為100μmol/L時協(xié)同指數(shù)最高。(5)流式細胞術(shù)結(jié)果顯示：GEM聯(lián)合TRAIL組細胞凋亡較單藥組顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(6)Western Blot結(jié)果顯示：與單藥組比較,GEM聯(lián)合TRAIL組Bcl-2、P-gp的表達下降,Bax、Cleaved-caspase3的表達上升,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：(1)P-gp的表達可能是胰腺癌術(shù)后吉西他濱療效的獨立預(yù)后因素之一。(2)TRAIL與GEM聯(lián)合具有協(xié)同抑制胰腺癌細胞株SW1990/GEM活性、顯著增加凋亡率的作用。(3)TRAIL在體外具有提高人胰腺癌細胞株SW1990/GEM對吉西他濱的敏感性的作用；(4)TRAIL可能是通過上調(diào)Bax、Cleaved-caspase3的表達、下調(diào)Bcl-2、P-gp的表達來提SW1990/GEM對GEM敏感性。
【關(guān)鍵詞】：胰腺癌 P-糖蛋白 耐藥 吉西他濱
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.9
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-13
• 第一部分 P-gP與胰腺癌吉西他濱治療敏感性的關(guān)系13-21
• 1 臨床資料13
• 1.1 病例來源13
• 1.2 病例納入標準13
• 1.3 病例排除標準13
• 1.4 病例分組13
• 2 研究方法13-14
• 2.1 病例臨床資料及隨訪資料整理13-14
• 2.2 免疫組化法測P-gp表達14
• 2.3 P-gp免疫組化實驗結(jié)果判定14
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)分析14
• 3 結(jié)果14-19
• 3.1 入組病例臨床病理特征分析14-15
• 3.2 P-gp的表達與胰腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系15-17
• 3.3 P-gp的表達與胰腺癌術(shù)后吉西他濱輔助化療患者OS及DFS的關(guān)系17
• 3.4 P-gp蛋白表達和胰腺癌術(shù)后患者OS及DFS的相關(guān)性分析17-19
• 4 分析與討論19-20
• 4.1 P-gp在胰腺癌組織中的表達特點19
• 4.2 P-gp與術(shù)后胰腺癌吉西他濱敏感性的關(guān)系19-20
• 5 結(jié)論20-21
• 第二部分 TRAIL聯(lián)合吉西他濱殺傷SW1990/GEM的研究21-30
• 1 實驗材料21
• 1.1 實驗細胞株21
• 1.2 實驗試劑及實驗儀器21
• 2 實驗方法21-22
• 2.1 細胞培養(yǎng)21
• 2.2 CCK8法體外檢測細胞的增殖抑制作用21
• 2.3 流式細胞儀檢測細胞凋亡率21
• 2.4 Western Blot檢測TRAIL干預(yù)對細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響21
• 2.5 兩藥相互作用指數(shù)計算21-22
• 2.6 統(tǒng)計學(xué)分析22
• 3 實驗結(jié)果22-27
• 3.1 胰腺癌吉西他濱耐藥細胞SW1990/GEM的耐藥指數(shù)鑒定22-23
• 3.2 SW1990/GEM細胞對不同濃度TRAIL的敏感程度23
• 3.3 TRAIL聯(lián)合吉西他濱干預(yù)對SW1990/GEM細胞增殖的影響23-24
• 3.4 TRAIL聯(lián)合吉西他濱干預(yù)SW1990/GEM對細胞凋亡的影響24-25
• 3.5 TRAIL聯(lián)合吉西他濱提高SW1990/GEM對GEM敏感性的可能機制25-27
• 4 分析與討論27-29
• 4.1 GEM和TRAIL對SW1990/GEM細胞的體外抗腫瘤作用27-28
• 4.2 TRAIL和GEM聯(lián)合提高SW1990/GEM對GEM敏感性的可能機制28-29
• 5 結(jié)論29-30
• 參考文獻30-32
• 附錄32-43
• 致謝43-44
• 文獻綜述44-49
• 參考文獻46-49
• 作者簡歷49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：1007711