本文關(guān)鍵詞：細(xì)胞自噬在精氨酸酶治療頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中作用及機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： 重組人精氨酸酶 細(xì)胞自噬 頭頸部鱗狀細(xì)胞癌 細(xì)胞毒性

【摘要】：目的：頭頸部鱗狀細(xì)胞癌是威脅人類健康的常見的惡性腫瘤之一,每年新發(fā)病例在持續(xù)增加,我國(guó)是世界上高發(fā)國(guó)家。盡管對(duì)頭頸部腫瘤的治療方法如手術(shù)治療、放化療不斷改善,其五年生存率并未得到明顯的提高。因此,有必要為頭頸部腫瘤的治療尋找新方法。有研究報(bào)道,精氨酸剝奪可以作為惡性實(shí)體瘤的治療手段。重組人精氨酸酶(rhArg)是一種可以在人體內(nèi)降解精氨酸的酶,有報(bào)道顯示,它可以治療某些精氨酸缺陷型的腫瘤,例如肝癌、肺癌和黑色素瘤。然而,它對(duì)于頭頸部腫瘤的作用未見報(bào)道。自噬是通過降解損傷的細(xì)胞器和蛋白質(zhì),將降解產(chǎn)物循環(huán)利用的一個(gè)過程,以此來維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞形態(tài)的完整性。研究表明,當(dāng)細(xì)胞遭受缺氧、代謝紊亂以及細(xì)胞應(yīng)激壓力時(shí)可以誘導(dǎo)自噬的發(fā)生。自噬在腫瘤的形成及發(fā)展過程中起著復(fù)雜的作用。自噬既可以在腫瘤發(fā)展中起保護(hù)性的作用,也有研究報(bào)道稱,自噬可以在肝癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞及卵巢癌細(xì)胞中導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生自噬性細(xì)胞死亡。自噬在rhArg作用于頭頸部腫瘤的作用未見報(bào)道。方法：我們利用MTT法檢測(cè)rhArg對(duì)頭頸部惡性腫瘤細(xì)胞如鼻咽癌細(xì)胞系(C666-1)、喉癌細(xì)胞系(Tu212)以及下咽癌細(xì)胞系(FaDu)的細(xì)胞毒性；單獨(dú)作用及聯(lián)合自噬抑制劑CQ和Baf Al對(duì)喉癌細(xì)胞系Tu212細(xì)胞的殺傷作用。利用透射電子顯微鏡(TEM)觀察rhArg誘導(dǎo)Tu212細(xì)胞的自噬體產(chǎn)生。以Western blot法檢測(cè)在C666-1、FaDu及Tu212細(xì)胞中ASS和OTC的表達(dá)情況；檢測(cè)rhArg聯(lián)合CQ和Baf Al對(duì)喉癌細(xì)胞系Tu212細(xì)胞的殺傷作用及自噬特異性蛋白LC3-Ⅱ的表達(dá)。利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)聯(lián)合自噬抑制劑CQ和rhArg對(duì)下咽癌FaDu細(xì)胞凋亡的影響。采用激光共聚焦顯微鏡(Confocal microscopy)檢測(cè)自噬流的產(chǎn)生情況。還對(duì)自噬相關(guān)信號(hào)通路進(jìn)行初步解析。結(jié)果：本課題首次發(fā)現(xiàn)了rhArg對(duì)C666-1細(xì)胞、FaDu細(xì)胞及Tu212細(xì)胞的細(xì)胞毒性,因?yàn)檫@三種細(xì)胞OTC表達(dá)的缺失。首次發(fā)現(xiàn)了rhArg誘導(dǎo)了喉癌細(xì)胞Tu212發(fā)生自噬,并且同時(shí)檢測(cè)到了自噬流的產(chǎn)生。自噬在rhArg作用于Tu212細(xì)胞中起著保護(hù)性作用,抑制自噬可以增強(qiáng)rhArg對(duì)Tu212細(xì)胞的毒性。Akt/mTOR信號(hào)通路和Erk1/2信號(hào)通路可能參與了rhArg誘導(dǎo)的Tu212細(xì)胞產(chǎn)生的自噬中的分子調(diào)控機(jī)制。RhArg可能作為一種對(duì)頭頸部腫瘤的潛在治療藥物,聯(lián)合應(yīng)用自噬抑制劑和rhArg能增強(qiáng)rhArg對(duì)Tu212細(xì)胞的敏感性,提高其殺傷作用,為頭頸部腫瘤的治療提供了一條新思路。結(jié)論：1.rhArg對(duì)C666-1細(xì)胞、FaDu細(xì)胞及Tu212細(xì)胞的細(xì)胞毒性,因?yàn)檫@三種細(xì)胞OTC表達(dá)的缺失。2.rhArg誘導(dǎo)了喉癌細(xì)胞Tu212發(fā)生自噬和自噬流,抑制自噬可以增強(qiáng)rhArg對(duì)Tu212細(xì)胞的毒性。
【關(guān)鍵詞】：重組人精氨酸酶 細(xì)胞自噬 頭頸部鱗狀細(xì)胞癌 細(xì)胞毒性
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.91
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞表9-10
• 第一章 引言10-15
• 第二章 RhArg對(duì)頭頸部腫瘤細(xì)胞毒性的研究15-24
• 一、實(shí)驗(yàn)材料及儀器15-16
• 二、實(shí)驗(yàn)方法16-18
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果18-22
• 四、討論22-23
• 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論23-24
• 第三章 細(xì)胞自噬在rhArg殺傷喉癌Tu212細(xì)胞中的作用研究24-40
• 一、實(shí)驗(yàn)材料及儀器24-25
• 二、實(shí)驗(yàn)方法25-28
• 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果28-37
• 四、討論37-39
• 五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論39-40
• 綜述40-45
• 參考文獻(xiàn)45-52
• 在讀期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況52-53
• 致謝53

【參考文獻(xiàn)】

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1 Kuang-Rong Wei;Xia Yu;Rong-Shou Zheng;Xia-Biao Peng;Si-Wei Zhang;Ming-Fang Ji;Zhi-Heng Liang;Zhi-Xiong Ou;Wan-Qing Chen;;Incidence and mortality of liver cancer in China, 2010[J];Chinese Journal of Cancer;2014年08期

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本文編號(hào)：1003533