SIAH2在胃癌中的表達(dá)及其對(duì)胃癌細(xì)胞移行侵襲能力的影響研究
發(fā)布時(shí)間:2017-10-09 21:16
本文關(guān)鍵詞:SIAH2在胃癌中的表達(dá)及其對(duì)胃癌細(xì)胞移行侵襲能力的影響研究
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【摘要】:目的:測(cè)定SIAH2在胃癌組織中的表達(dá)情況,分析其相關(guān)的臨床參數(shù)。通過(guò)干擾抑制胃癌AGS細(xì)胞中SIAH2的表達(dá),研究其對(duì)胃癌細(xì)胞遷移侵襲能力的影響,進(jìn)一步研究SIAH2作為胃癌早期診斷和治療的靶基因的潛在可能性。方法:1.采取人胃癌標(biāo)本,使用免疫組化檢測(cè)胃癌組織及癌旁組織中SIAH2的表達(dá)。2.通過(guò)統(tǒng)計(jì)病例參數(shù)研究SIAH2表達(dá)與腫瘤各項(xiàng)參數(shù)的相關(guān)性。3.使用FAM熒光標(biāo)記的siRNA配合脂質(zhì)體(Lipofectamine)轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞,使用熒光顯微鏡以及流式細(xì)胞儀挑選轉(zhuǎn)染率最高的細(xì)胞株。4.轉(zhuǎn)染siRNA干擾SIAH2的表達(dá),使用熒光定量PCR(qPCR)以及Western blot方法檢測(cè)SIAH2及其下游PHD3以及HIF-1a的表達(dá)變化,研究及驗(yàn)證SIAH2影響移行、侵襲的機(jī)制。5.轉(zhuǎn)染siRNA干擾SIAH2的表達(dá),對(duì)轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn)以及Transwell侵襲實(shí)驗(yàn),觀察對(duì)AGS細(xì)胞株增殖、移行、侵襲的作用。結(jié)果:1.SIAH2在胃癌組織中的表達(dá)水平明顯高于癌旁正常組織(P0.001)。2.SIAH2在胃癌組織中的表達(dá)與腫瘤大小(P0.001)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P0.001)及TNM分期(P=0.034)呈正相關(guān)。3.選取AGS、SGC-7901、MGC-803、MKN-45胃癌細(xì)胞株,其中AGS細(xì)胞SIAH2表達(dá)最高。4.選取AGS細(xì)胞,轉(zhuǎn)染熒光標(biāo)記siRNA,轉(zhuǎn)染后熒光顯微鏡可見(jiàn)綠色熒光,轉(zhuǎn)染效率達(dá)95.7%。4.轉(zhuǎn)染siRNA后AGS細(xì)胞SIAH2表達(dá)量顯著下降,PHD3 mRNA及蛋白表達(dá)均上調(diào),HIF-1αmRNA表達(dá)上調(diào)但HIF-1α蛋白表達(dá)量顯著下降。5.干擾SIAH2表達(dá)后AGS細(xì)胞的移行和侵襲能力較陰性對(duì)照和空白組顯著下降。結(jié)論:SIAH2在胃癌組織中的表達(dá)高于癌旁正常組織的表達(dá)。SIAH2在腫瘤中的陽(yáng)性率與腫瘤的大小、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)。轉(zhuǎn)染siRNA后胃癌細(xì)胞的SIAH2表達(dá)量顯著下降,且下游因子HIF-1α表達(dá)量顯著下降。抑制SIAH2的表達(dá)可有效抑制胃癌細(xì)胞的移行和侵襲能力。以上結(jié)果均提示SIAH2在胃癌的發(fā)生中起到作用,SIAH2可成為胃癌早期檢測(cè)或分子靶向治療的新靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】:胃癌 SIAH2 移行 侵襲 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R735.2
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-8
- 前言8-9
- 材料和方法9-19
- 結(jié)果19-25
- 討論25-28
- 結(jié)論28-29
- 參考文獻(xiàn)29-31
- 綜述31-36
- 參考文獻(xiàn)33-36
- 中英文對(duì)照縮略詞表36-37
- 致謝37-38
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,本文編號(hào):1002449
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