發(fā)布時間：2017-10-09 21:16

  本文關鍵詞：SIAH2在胃癌中的表達及其對胃癌細胞移行侵襲能力的影響研究

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【摘要】：目的:測定SIAH2在胃癌組織中的表達情況,分析其相關的臨床參數(shù)。通過干擾抑制胃癌AGS細胞中SIAH2的表達,研究其對胃癌細胞遷移侵襲能力的影響,進一步研究SIAH2作為胃癌早期診斷和治療的靶基因的潛在可能性。方法:1.采取人胃癌標本,使用免疫組化檢測胃癌組織及癌旁組織中SIAH2的表達。2.通過統(tǒng)計病例參數(shù)研究SIAH2表達與腫瘤各項參數(shù)的相關性。3.使用FAM熒光標記的siRNA配合脂質(zhì)體(Lipofectamine)轉(zhuǎn)染胃癌細胞,使用熒光顯微鏡以及流式細胞儀挑選轉(zhuǎn)染率最高的細胞株。4.轉(zhuǎn)染siRNA干擾SIAH2的表達,使用熒光定量PCR(qPCR)以及Western blot方法檢測SIAH2及其下游PHD3以及HIF-1a的表達變化,研究及驗證SIAH2影響移行、侵襲的機制。5.轉(zhuǎn)染siRNA干擾SIAH2的表達,對轉(zhuǎn)染后的細胞進行劃痕實驗以及Transwell侵襲實驗,觀察對AGS細胞株增殖、移行、侵襲的作用。結(jié)果:1.SIAH2在胃癌組織中的表達水平明顯高于癌旁正常組織(P0.001)。2.SIAH2在胃癌組織中的表達與腫瘤大小(P0.001)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P0.001)及TNM分期(P=0.034)呈正相關。3.選取AGS、SGC-7901、MGC-803、MKN-45胃癌細胞株,其中AGS細胞SIAH2表達最高。4.選取AGS細胞,轉(zhuǎn)染熒光標記siRNA,轉(zhuǎn)染后熒光顯微鏡可見綠色熒光,轉(zhuǎn)染效率達95.7%。4.轉(zhuǎn)染siRNA后AGS細胞SIAH2表達量顯著下降,PHD3 mRNA及蛋白表達均上調(diào),HIF-1αmRNA表達上調(diào)但HIF-1α蛋白表達量顯著下降。5.干擾SIAH2表達后AGS細胞的移行和侵襲能力較陰性對照和空白組顯著下降。結(jié)論:SIAH2在胃癌組織中的表達高于癌旁正常組織的表達。SIAH2在腫瘤中的陽性率與腫瘤的大小、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況呈正相關。轉(zhuǎn)染siRNA后胃癌細胞的SIAH2表達量顯著下降,且下游因子HIF-1α表達量顯著下降。抑制SIAH2的表達可有效抑制胃癌細胞的移行和侵襲能力。以上結(jié)果均提示SIAH2在胃癌的發(fā)生中起到作用,SIAH2可成為胃癌早期檢測或分子靶向治療的新靶點。
【關鍵詞】：胃癌 SIAH2 移行 侵襲 預后
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 前言8-9
• 材料和方法9-19
• 結(jié)果19-25
• 討論25-28
• 結(jié)論28-29
• 參考文獻29-31
• 綜述31-36
• 參考文獻33-36
• 中英文對照縮略詞表36-37
• 致謝37-38

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1 李曉智;韓雪;李昊怡;;Siah2在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的作用[J];中醫(yī)臨床研究;2011年11期

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2 陳恒峰;SIAH2在胃癌中的表達及其對胃癌細胞移行侵襲能力的影響研究[D];蘇州大學;2016年

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本文編號：1002449