本文關鍵詞：前列腺癌中GATA2調控c-Myc表達機制的初步研究

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【摘要】：目的1.研究轉錄因子GATA2在良性前列腺增生組織與前列腺癌組織以及前列腺癌細胞系中的表達情況,并進一步分析GATA2在前列腺癌中的表達水平與其臨床相關性。2.初步探討GATA2是否作為雄激素受體AR的輔助因子協(xié)同調控c-Myc的表達,促進前列腺癌的發(fā)生進展。方法收集天津醫(yī)科大學第二醫(yī)院泌尿外科2004年1月至2014年1月的80例良性前列腺組織和120例前列腺癌組織標本,所有標本都經過病理診斷明確,且前列腺癌患者術前未行放化療及內分泌治療。應用RT-qPCR技術,初步研究GATA2 mRNA在良性前列腺增生組織和前列腺癌組織中的表達情況,統(tǒng)計并分析GATA2 mRNA表達水平與前列腺癌的臨床相關性。培養(yǎng)前列腺癌細胞系PC3、DU145、LNCaP及C4-2和正常前列腺細胞RWPE-1,運用RT-qPCR及Western Blotting技術,檢測GATA2 mRNA和蛋白在前列腺癌細胞系及正常前列腺細胞中的表達水平,篩選出高表達GATA2的細胞系。運用免疫共沉淀技術,驗證GATA2與AR之間能夠相互作用。運用染色質免疫共沉淀技術,驗證AR與c-Myc增強子的相互作用;構建GATA2低表達質粒,穩(wěn)定轉染前列腺癌細胞LNCaP細胞,聯(lián)合染色質免疫共沉淀與qPCR技術,比較GATA2低表達組與對照組中AR在c-Myc增強子區(qū)域的結合量的變化,并運用Western blotting技術進一步驗證兩組中c-Myc下游蛋白HSPC111的表達的變化。結果1.GATA2 mRNA在前列腺癌組織中的表達水平明顯高于良性前列腺增生組織,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),且在前列腺癌患者中,GATA2的高表達與術前血清前列腺特異性抗原(PSA)、Gleason評分及淋巴結侵襲有關(P0.05),與患者年齡、手術切緣及精囊是否侵犯無關(P0.05);2.GATA2在前列腺癌細胞PC3與DU145及正常前列腺細胞RWPE-1中表達較低或幾乎不表達,而在LNCaP及C4-2細胞中表達水平較高;3.免疫共沉淀結果進一步驗證了GATA2與雄激素受體AR之間具有相互作用;4.與正常對照組比較,GATA2低表達后,AR與c-Myc增強子區(qū)域的結合量減少,致使c-Myc的表達水平降低,且c-Myc下游蛋白HSPC111的表達減少。結論1.GATA2在前列腺癌組織中高表達,且與患者的PSA水平、Gleason評分及淋巴結轉移相關,表明GATA2的表達增高參與了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。2.GATA2可能作為AR的輔因子協(xié)同轉錄調控c-Myc的表達,促進前列腺癌的惡性發(fā)展。
【關鍵詞】：前列腺癌 GATA2 臨床病理特征 AR c-Myc 免疫共沉淀
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 縮略語/符號說明9-11
• 前言11-16
• 研究現狀、成果11-14
• 研究目的、方法14-16
• 對象和方法16-37
• 結果37-47
• 討論47-52
• 結論52-53
• 參考文獻53-59
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明59-60
• 綜述 轉錄因子GATA2的研究進展60-77
• 綜述參考文獻69-77
• 致謝77-78
• 個人簡歷78

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本文編號：1000968