本文關(guān)鍵詞：前列腺癌中GATA2調(diào)控c-Myc表達(dá)機(jī)制的初步研究

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【摘要】：目的1.研究轉(zhuǎn)錄因子GATA2在良性前列腺增生組織與前列腺癌組織以及前列腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況,并進(jìn)一步分析GATA2在前列腺癌中的表達(dá)水平與其臨床相關(guān)性。2.初步探討GATA2是否作為雄激素受體AR的輔助因子協(xié)同調(diào)控c-Myc的表達(dá),促進(jìn)前列腺癌的發(fā)生進(jìn)展。方法收集天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院泌尿外科2004年1月至2014年1月的80例良性前列腺組織和120例前列腺癌組織標(biāo)本,所有標(biāo)本都經(jīng)過病理診斷明確,且前列腺癌患者術(shù)前未行放化療及內(nèi)分泌治療。應(yīng)用RT-qPCR技術(shù),初步研究GATA2 mRNA在良性前列腺增生組織和前列腺癌組織中的表達(dá)情況,統(tǒng)計(jì)并分析GATA2 mRNA表達(dá)水平與前列腺癌的臨床相關(guān)性。培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞系PC3、DU145、LNCaP及C4-2和正常前列腺細(xì)胞RWPE-1,運(yùn)用RT-qPCR及Western Blotting技術(shù),檢測GATA2 mRNA和蛋白在前列腺癌細(xì)胞系及正常前列腺細(xì)胞中的表達(dá)水平,篩選出高表達(dá)GATA2的細(xì)胞系。運(yùn)用免疫共沉淀技術(shù),驗(yàn)證GATA2與AR之間能夠相互作用。運(yùn)用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù),驗(yàn)證AR與c-Myc增強(qiáng)子的相互作用;構(gòu)建GATA2低表達(dá)質(zhì)粒,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染前列腺癌細(xì)胞LNCaP細(xì)胞,聯(lián)合染色質(zhì)免疫共沉淀與qPCR技術(shù),比較GATA2低表達(dá)組與對照組中AR在c-Myc增強(qiáng)子區(qū)域的結(jié)合量的變化,并運(yùn)用Western blotting技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證兩組中c-Myc下游蛋白HSPC111的表達(dá)的變化。結(jié)果1.GATA2 mRNA在前列腺癌組織中的表達(dá)水平明顯高于良性前列腺增生組織,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),且在前列腺癌患者中,GATA2的高表達(dá)與術(shù)前血清前列腺特異性抗原(PSA)、Gleason評分及淋巴結(jié)侵襲有關(guān)(P0.05),與患者年齡、手術(shù)切緣及精囊是否侵犯無關(guān)(P0.05);2.GATA2在前列腺癌細(xì)胞PC3與DU145及正常前列腺細(xì)胞RWPE-1中表達(dá)較低或幾乎不表達(dá),而在LNCaP及C4-2細(xì)胞中表達(dá)水平較高;3.免疫共沉淀結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了GATA2與雄激素受體AR之間具有相互作用;4.與正常對照組比較,GATA2低表達(dá)后,AR與c-Myc增強(qiáng)子區(qū)域的結(jié)合量減少,致使c-Myc的表達(dá)水平降低,且c-Myc下游蛋白HSPC111的表達(dá)減少。結(jié)論1.GATA2在前列腺癌組織中高表達(dá),且與患者的PSA水平、Gleason評分及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),表明GATA2的表達(dá)增高參與了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。2.GATA2可能作為AR的輔因子協(xié)同轉(zhuǎn)錄調(diào)控c-Myc的表達(dá),促進(jìn)前列腺癌的惡性發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：前列腺癌 GATA2 臨床病理特征 AR c-Myc 免疫共沉淀
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 縮略語/符號說明9-11
• 前言11-16
• 研究現(xiàn)狀、成果11-14
• 研究目的、方法14-16
• 對象和方法16-37
• 結(jié)果37-47
• 討論47-52
• 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-59
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明59-60
• 綜述 轉(zhuǎn)錄因子GATA2的研究進(jìn)展60-77
• 綜述參考文獻(xiàn)69-77
• 致謝77-78
• 個(gè)人簡歷78

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本文編號：1000968