本文關(guān)鍵詞：氯乙烯作業(yè)工人代謝酶基因甲基化與染色體損傷

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【摘要】：氯乙烯(Vinyl chloride monomer, VCM)是一種重要的化工原料,主要用于合成聚氯乙烯(Polyvinyl chloride, PVC),在全世界有大量的職業(yè)接觸人群。截至2013年12月,我國(guó)PVC年產(chǎn)量己達(dá)到1529.54萬(wàn)噸,己成為世界第一大生產(chǎn)國(guó)和第一大消費(fèi)國(guó)。VCM是確定的人類致癌物,是多系統(tǒng)、多器官致癌劑。目前認(rèn)為其致癌機(jī)制主要是VCM活性代謝產(chǎn)物使遺傳物質(zhì)損傷,進(jìn)而啟動(dòng)致癌過(guò)程。世界各國(guó)對(duì)其相應(yīng)的職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了調(diào)整,目前西方發(fā)達(dá)國(guó)家的VCM的職業(yè)接觸限值多為1ppm(2.79mg/m3),而我國(guó)自2002年起VCM時(shí)間加權(quán)平均容許濃度(PC-TWA)修訂為10mg/m3,仍是西方發(fā)達(dá)國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的數(shù)倍。在我國(guó)現(xiàn)行職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)下,對(duì)氯乙烯能否誘發(fā)接觸工人的遺傳損傷進(jìn)行探討十分必要。目前研究發(fā)現(xiàn)化學(xué)致癌物可致遺傳損傷和表觀遺傳改變。表觀遺傳是DNA序列不變,但功能發(fā)生可遺傳變化,在調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因表達(dá)方面發(fā)揮重要作用,日益受到關(guān)注。對(duì)DNA CpG島甲基化狀態(tài)的分析將有助于闡明VCM的毒性作用機(jī)制。本研究應(yīng)用作業(yè)場(chǎng)所空氣氯乙烯濃度測(cè)定評(píng)估VCM作業(yè)工人個(gè)體接觸劑量,應(yīng)用胞質(zhì)分裂阻滯微核試驗(yàn)(CBMN)檢測(cè)氯乙烯所致的染色體損傷,研究氯乙烯接觸與遺傳損傷的劑量-反應(yīng)關(guān)系,應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(MSP, methylation-specific PCR)檢測(cè)VCM作業(yè)工人代謝酶基因位點(diǎn)甲基化狀態(tài),探索VCM職業(yè)接觸及其致染色體損傷、代謝酶基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化之間的關(guān)系,探尋有效的生物標(biāo)志以篩選高危人群,為VCM致遺傳損傷的早期預(yù)警、早期發(fā)現(xiàn)和早期干預(yù)提供有價(jià)值的線索,并為氯乙烯職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的修訂提供依據(jù)。本次調(diào)查的某工廠自1990年起大部分空氣樣本氯乙烯濃度低于我國(guó)職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),以2007年為界,1990年至2007年總超標(biāo)率為3.60%,2007年至今總超標(biāo)率為1.55%。本研究現(xiàn)況調(diào)查的研究對(duì)象是該化工廠139名VCM作業(yè)工人,以95名無(wú)職業(yè)接觸VCM及其他有毒有害物質(zhì)的健康志愿者為對(duì)照組,根據(jù)歷年車間空氣中VCM濃度檢測(cè)結(jié)果、實(shí)際接觸時(shí)間和工齡以及擴(kuò)散生活氯乙烯接觸計(jì)算累積劑量,將研究對(duì)象分為高劑量接觸組(累積接觸劑量12622.16mg)、中劑量接觸組(775.36mmg累積接觸劑量≤12622.16mg)、低劑量接觸組(累積接觸劑量≤775.36rng)和對(duì)照組。對(duì)VCM接觸工人進(jìn)行胞質(zhì)分裂阻滯微核實(shí)驗(yàn)調(diào)查其染色體損傷狀況。結(jié)果顯示,氯乙烯作業(yè)工人外周血淋巴細(xì)胞微核率顯著高于對(duì)照組,FR=2.39(95%CI：2.08-2.71),P0.05。與對(duì)照組相比,低、中、高劑量組的微核率均顯著增高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(FR=2.04,95%CI：1.72-2.41,P0.05)；(FR=2.02,95%CI：1.75-2.33,P0.05);(FR=2.86,95%CI：2.39-3.23,P0.05),說(shuō)明氯乙烯累積接觸劑量組的微核率存在趨勢(shì)關(guān)系,即隨著VCM暴露量的增加,微核率升高。同時(shí)多因素Poisson回歸發(fā)現(xiàn)年齡為微核率升高的危險(xiǎn)因素,FR=1.01(95%CI：1.01-1.02),P0.05。本研究提示外周血淋巴細(xì)胞微核率作為評(píng)價(jià)低濃度VCM暴露的效應(yīng)指標(biāo)具備一定的推廣應(yīng)用價(jià)值。應(yīng)用甲基化特異性PCR (MSP)法檢測(cè)研究VCM作業(yè)工人的代謝酶基因GSTP1、GSTM1、GSTM3、CYPIAI啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀況。甲基化率的比較采用χ2檢驗(yàn),應(yīng)用Poisson回歸分析代謝酶基因甲基化及相關(guān)因素對(duì)微核率的影響。在139例VCM作業(yè)工人和95例對(duì)照組中檢測(cè)到GSTP1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化率分別為39.6%(55/139),13.7%(13/95)；GSTM1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化率分別為48.2%(67/139),,35.8%(34/95)；GSTM3基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化率分別為28.8%(40/139),15.8%(15/95)；CYPIAI基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化率分別為15.8%(22/139),22.1%(21/95)。二分類Logistic分析結(jié)果顯示,在校正性別、年齡、吸煙、飲酒等因素后,VCM接觸組GSTP1基因甲基化率顯著高于對(duì)照組,OR=5.60(95%CI：2.67-11.75),P0.05,而GSTM1、GSTM3、CYP1A1甲基化率在暴露組和對(duì)照組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,在本樣本量和實(shí)驗(yàn)研究條件下,尚不能認(rèn)為氯乙烯接觸是GSTM1、GSTM3、CYP1A1甲基化率升高的危險(xiǎn)因素。對(duì)接觸組GSTP1甲基化進(jìn)行χ2檢驗(yàn),發(fā)現(xiàn)年齡35歲是VCM作業(yè)工人GSTP1基因甲基化率升高的危險(xiǎn)因素,OR=3.18(95%CI：1.56-6.48),P0.05。中劑量組、高劑量組分別與低劑量組甲基化率進(jìn)行比較,未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,尚不能確定氯乙烯累積接觸劑量與GSTP1甲基化率之間存在劑量-反應(yīng)關(guān)系。以CBMN作為評(píng)價(jià)染色體損傷的指標(biāo),我們?cè)?39例VCM作業(yè)工人中發(fā)現(xiàn),GSTMI基因啟動(dòng)子非甲基化者72例,微核率為(6.54±3.26)‰,甲基化者67例,微核率為(8.52±4.15)‰,微核率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,FR值為1.30(95%CI：1.15-1.47),表明GSTM1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化可能與VCM致染色體損傷有關(guān)。多元Poisson回歸分析結(jié)果顯示年齡35歲、VCM暴露以及GSTM1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化是微核率升高的危險(xiǎn)因素(FR=1.01,95%CI:1.01-1.02,P0.05)；(FR=2.32,95%CI：2.02-2.66,P0.05)；(FR=1.22,95%CI：1.09-1.37,P0.05)。綜上所述,在我國(guó)當(dāng)前職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)下,職業(yè)接觸VCM可造成作業(yè)工人的染色體損傷；VCM接觸和VCM相關(guān)代謝酶基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化的綜合作用可能影響染色體損傷的發(fā)生與發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：氯乙烯 染色體損傷 胞質(zhì)阻滯雙核微核試驗(yàn) 代謝酶基因甲基化
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R135
【目錄】：

• 中文摘要7-10
• Abstract10-13
• 前言13-16
• 技術(shù)路線16-17
• 第一部分 氯乙烯作業(yè)工人職業(yè)接觸評(píng)估和染色體損傷研究17-31
• 第一節(jié) 氯乙烯作業(yè)工人職業(yè)接觸評(píng)估17-23
• 1 材料和方法17-18
• 2 結(jié)果18-22
• 3 討論22-23
• 第二節(jié) 氯乙烯作業(yè)工人染色體損傷研究23-30
• 1 對(duì)象和方法23-26
• 2 結(jié)果26-28
• 3 討論28-30
• 小結(jié)30-31
• 第二部分 代謝酶基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與染色體損傷風(fēng)險(xiǎn)研究31-54
• 第一節(jié) 代謝酶基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)檢測(cè)31-48
• 1 對(duì)象和方法34-38
• 2 結(jié)果38-43
• 3 討論43-48
• 第二節(jié) 代謝酶基因甲基化與氯乙烯致染色體損傷風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系48-53
• 1 對(duì)象和方法48-49
• 2 結(jié)果49-51
• 3 討論51-53
• 小結(jié)53-54
• 總結(jié)54-56
• 參考文獻(xiàn)56-63
• 致謝63-64
• 附錄一：碩士期間發(fā)表論文64-65
• 附錄二：綜述65-72
• 參考文獻(xiàn)70-72

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 Yoshihiro Nakata;;β-catenin accumulation in nuclei of hepatocellular carcinoma cells up-regulates glutathione-s-transferase M3 mRNA[J];World Journal of Gastroenterology;2011年13期

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本文編號(hào)：917338