本文關(guān)鍵詞：硒對鎘暴露大鼠肝、睪丸毒性的劑量選擇性保護作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【背景】由于地質(zhì)污染、工礦業(yè)排污和廢舊鎳鎘電池的處置不當(dāng),我國多數(shù)地區(qū)水體和土壤遭受鎘污染,目前已經(jīng)報道的有30余處,涉及全國16個省市自治區(qū)。這些鎘污染區(qū)域的稻米、水產(chǎn)品和飲用水中鎘的含量嚴重超標(biāo),導(dǎo)致鎘污染的暴露人群數(shù)量巨大,鎘暴露導(dǎo)致的骨代謝異常(痛痛病)、腎臟毒性和生殖毒性都嚴重威脅人類的健康,目前還沒有治療鎘暴露導(dǎo)致疾病的有效手段,如何解決鎘暴露對健康的危害已經(jīng)成為刻不容緩的醫(yī)學(xué)難題。目前已對鎘毒性進行了廣泛研究,其中較多研究集中在骨代謝異常,鎘暴露引起的睪丸毒性、肝毒性也有不少報道。但是,鎘致睪丸毒性以及肝毒性的確切機制,仍不清楚。有研究提示,鎘致臟器毒性的機制可能與氧化應(yīng)激損傷相關(guān)。硒是人體的必需微量元素,作為一種自由基清除劑,具有抗氧化和抗衰老功能。硒也是多種含硒蛋白的活性成分,在抗氧化中起著重要作用,除了可能抑制鎘誘導(dǎo)的氧化損傷,硒還可能與鎘直接進行化學(xué)性結(jié)合而降低鎘的毒性。因此探討硒拮抗鎘誘導(dǎo)的抗氧化作用以及劑量效應(yīng)關(guān)系,對于進一步采用人群適量補硒以發(fā)揮對鎘的解毒作用,可能是一條比較理想和可行的途徑�！灸康摹垦芯挎k暴露大鼠肝臟、睪丸氧化損傷作用及硒干預(yù)的劑量效應(yīng)關(guān)系,尋找有效的保護劑量,以初步闡明作用機制�！痉椒ā恳訠rl-3A(大鼠肝細胞)、Sertoli(大鼠睪丸支持細胞)細胞和SD大鼠為研究對象,實驗分為:陰性對照組、硒對照組、鎘暴露組、硒干預(yù)組。研究鎘造成的肝臟、睪丸氧化損傷,鎘誘導(dǎo)細胞凋亡,硒對鎘毒性的拮抗作用機制。1.動物水平實驗:主要研究鎘毒性及氧化損傷,硒對其拮抗作用的劑量效應(yīng)關(guān)系。采用SD大鼠作為研究對象,通過灌胃氯化鎘誘導(dǎo)大鼠肝臟、睪丸慢性氧化損傷,并同時在硒對照組和硒干預(yù)組灌胃給予亞硒酸鈉處理,陰性對照組只給予生理鹽水。采用免疫熒光研究硒對鎘損傷的肝細胞、睪丸細胞中活性氧(ROS)水平的影響。蛋白免疫印跡法研究硒對鎘誘導(dǎo)肝、睪丸細胞凋亡的保護作用。測定鎘中毒大鼠肝臟、睪丸組織中硒對其氧化損傷的影響。主要的觀察指標(biāo)有大鼠睪丸和肝組織的病理變化,全血中氧化、抗氧化酶活力的變化,Nrf-2等抗氧化分子蛋白表達、細胞凋亡等指標(biāo)的變化。2.細胞水平實驗:主要研究鎘致細胞氧化損傷、適當(dāng)劑量硒對鎘毒性的拮抗機制。在動物實驗研究的基礎(chǔ)上,采用Brl-3A細胞、Sertoli細胞作為研究對象,預(yù)先給細胞硒處理,再給予鎘暴露,以進一步研究硒對鎘損傷的保護作用機制。采用熒光標(biāo)記法測定細胞中ROS的水平,Annexin V/PI法檢測硒對鎘暴露致細胞凋亡的保護作用。采用Mito-SOXTM熒光探針檢測線粒體中ROS的水平以及線粒體膜電位的變化對線粒體的影響。蛋白免疫印跡法,分析細胞中凋亡、氧化還原相關(guān)蛋白,如Bcl-2、Bax、Nrf-2蛋白水平變化。進一步探討硒拮抗鎘毒性的相關(guān)機制。3.綜合分析:將動物實驗和細胞水平實驗進行比對研究,尋找共同點與差異點,以提出初步硒對鎘毒性拮抗的新思路。【結(jié)果】1.動物實驗結(jié)果表明,鎘暴露條件下,大鼠肝、睪丸細胞中ROS水平升高,丙二醛(MDA)水平升高,還原性谷胱甘肽(GSH)水平降低,細胞氧化水平升高。同時,鎘暴露后,大鼠肝、睪丸細胞中Nrf-2及其調(diào)控的抗氧化酶GPx-1、SOD-2和CAT活力及蛋白水平表達降低,表明肝、睪丸細胞抗氧化能力下降,這些結(jié)果說明鎘暴露條件下大鼠的肝臟、睪丸處于明顯的氧化應(yīng)激狀態(tài)。2.在ROS作用下,鎘可以使肝、睪丸組織中促凋亡蛋白Bax水平上調(diào),而抗凋亡蛋白Bcl-2水平下調(diào),導(dǎo)致細胞發(fā)生凋亡。細胞的氧化應(yīng)激與凋亡導(dǎo)致血清中ALT、AST的水平升高,睪酮水平降低,肝功能、睪丸功能嚴重受損。3.細胞實驗結(jié)果表明,鎘暴露誘導(dǎo)ROS水平升高,可以使Brl-3A和Sertoli細胞活力降低,總的凋亡率升高說明鎘暴露誘導(dǎo)細胞凋亡,線粒體膜電位降低表明細胞內(nèi)外的質(zhì)子濃度梯度發(fā)生改變,提示線粒體的氧化損傷可能與鎘誘導(dǎo)細胞凋亡相關(guān)。4.給予硒干預(yù)后,大鼠肝、睪丸細胞中ROS水平降低,MDA水平顯著降低,GSH水平升高;Nrf-2及其調(diào)控的抗氧化酶活力升高,蛋白表達水平升高;Bax水平下調(diào),Bcl-2水平上調(diào);表明硒可有效拮抗鎘誘導(dǎo)的大鼠肝臟、睪丸的氧化損傷,且具有一定的劑量選擇性。5.在Brl-3A、Sertolie細胞中,給予硒預(yù)處理,Brl-3A和Sertoli細胞ROS水平均降低,細胞凋亡率也降低,線粒體膜電位升高,Nrf-2等抗氧化分子蛋白水平升高,表明給予硒預(yù)處理能夠有效抑制細胞中鎘損傷�！窘Y(jié)論】1.鎘暴露可導(dǎo)致大鼠肝臟、睪丸細胞凋亡、壞死和氧化應(yīng)激。2.線粒體可能是鎘誘導(dǎo)細胞凋亡的重要靶點,線粒體的氧化損傷在鎘誘導(dǎo)細胞凋亡、壞死中起著關(guān)鍵作用;3.硒可有效抑制鎘誘導(dǎo)的臟器損傷、細胞氧化損傷,但具有一定的劑量范圍和劑量選擇性,即0.1mg Se/kg以下劑量實驗動物模型安全、有效;4.0.2mg Se/kg單純硒灌胃干預(yù)對大鼠是安全的,但用此劑量進行干預(yù)存在肝臟、睪丸細胞損傷加重的風(fēng)險;5.抗氧化應(yīng)激的關(guān)鍵分子Nrf-2參與硒抑制鎘誘導(dǎo)的大鼠肝臟、睪丸損傷。
【關(guān)鍵詞】：鎘中毒 硒 氧化應(yīng)激 凋亡
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R114
【目錄】：

• 縮略語表4-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-14
• 前言14-15
• 文獻回顧15-23
• 1 環(huán)境中的鎘污染及來源15-16
• 2 鎘暴露導(dǎo)致臟器毒性16-18
• 3 鎘與氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的細胞凋亡18-20
• 4 鎘毒性與抗氧化作用20-23
• 第一部分 硒對鎘致大鼠臟器損傷的保護作用23-47
• 1 實驗材料23-24
• 2 實驗方法24-31
• 3 結(jié)果31-44
• 4 討論44-47
• 第二部分 硒對鎘暴露細胞損傷的保護作用47-63
• 1 實驗材料47-48
• 2 實驗方法48-51
• 3 結(jié)果51-60
• 4 討論60-63
• 小結(jié)63-65
• 參考文獻65-72
• 個人簡歷和研究成果72-73
• 致謝73

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李煒修;喬季;顏丙玉;許青;;環(huán)境鎘暴露與腫瘤危險性[J];國外醫(yī)學(xué)(醫(yī)學(xué)地理分冊);2007年04期

2 姚志麒;血鎘作為城市人口鎘蓄積暴露的指標(biāo)[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);1987年06期

3 陳龍;高偉;周娟;;亞急性鎘暴露大鼠血液免疫細胞和介質(zhì)變化[J];中國公共衛(wèi)生;2006年01期

4 彭珊茁;;接鎘居民發(fā)生骨疾病的機制:血清1α,25-二羥基維生素D水平下降[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);1988年01期

5 倪玲玲;童世廬;陶芳標(biāo);;孕期鎘暴露對子代中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育影響的研究進展[J];衛(wèi)生研究;2014年04期

6 周少磊;尚琪;張文麗;;中國非環(huán)境鎘暴露區(qū)人群尿鎘正常值的研究狀況[J];衛(wèi)生研究;2012年01期

7 張文麗;韓京秀;孫嘉龍;姚丹成;尚琪;;重金屬污染區(qū)人群鎘暴露水平的估算[J];衛(wèi)生研究;2013年04期

8 譚淼;許金嬋;何愛桃;賀棟梁;讓蔚清;;湖南省某市居民經(jīng)大米途徑鎘暴露的風(fēng)險概率評估[J];中華疾病控制雜志;2014年08期

9 趙永成,張亞利,王繼先,范亞光,劉慶芬,王耐芬,趙金輝;環(huán)境鎘暴露對妊娠結(jié)局和胎兒生長發(fā)育的影響[J];中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

10 蔣英子,陳龍,高偉,周娟,季吟秋,朱善良;鎘暴露大鼠血中白細胞介素-2和皮質(zhì)醇水平及白細胞免疫功能的變化[J];環(huán)境與健康雜志;2002年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 湯柳英;高燕紅;王晶;許瑛華;陳文才;梁旭霞;楊杏芬;;環(huán)境鎘暴露人群尿液中特異性小分子代謝物表征[A];中國毒理學(xué)會第六屆全國毒理學(xué)大會論文摘要[C];2013年

2 劉建博;潘登;江安娜;黃曉亮;應(yīng)雪萍;;鎘暴露對文蛤雄性生殖細胞的影響[A];浙江省動物學(xué)會第十二屆會員代表大會暨學(xué)術(shù)討論會論文摘要集[C];2013年

3 任緒義;張建鵬;馮偉華;焦炳華;;鎘暴露大鼠睪丸生精細胞calmegin mRNA表達的時相研究[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)會2003年學(xué)術(shù)交流會論文摘要集[C];2003年

4 姬艷麗;王華;趙顯鋒;王群;劉萍;張瑩;徐德祥;;急性鎘暴露誘導(dǎo)小鼠睪丸生殖細胞凋亡分子機制[A];全國自由基醫(yī)學(xué)與毒理學(xué)學(xué)術(shù)交流大會論文（摘要）集[C];2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 姬艷麗;生命不同階段鎘暴露對雄性小鼠生殖發(fā)育的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

2 王波;低劑量鎘對肝臟組織遠期影響的實驗研究[D];吉林大學(xué);2012年

3 李爽;鎘脈沖暴露對大型n灥淖饔肹D];東北師范大學(xué);2014年

4 翟齊嘯;乳酸菌減除鎘危害的作用及機制研究[D];江南大學(xué);2015年

5 陳曉;鎘致骨毒效應(yīng)及預(yù)后[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 傅晗;硒對鎘暴露大鼠肝、睪丸毒性的劑量選擇性保護作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 湯柳英;環(huán)境鎘暴露人群尿液中小分子代謝產(chǎn)物表征差異研究[D];暨南大學(xué);2014年

3 王佳月;急性鎘中毒對雄性鵪鶉（Coturnix japonica）生殖毒理影響的初步研究[D];華東師范大學(xué);2007年

4 盧茜;TEF-1δ表達改變作為新的鎘暴露特異標(biāo)志物的體內(nèi)研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

5 賈聞婧;某地區(qū)環(huán)境鎘污染及人體內(nèi)鎘暴露指標(biāo)的研究[D];北京交通大學(xué);2015年

6 王潔;鎘對雌性鵪鶉（Coturnix coturnix japonica）生殖影響的初步研究[D];華東師范大學(xué);2006年

7 李紅;蘭坪鉛鋅礦區(qū)環(huán)境鎘污染及其對兒童生長發(fā)育影響的研究[D];大理學(xué)院;2011年

8 鄒存國;環(huán)境鎘污染區(qū)人群鎘暴露水平與腎損傷間的關(guān)系[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2012年

9 劉燕;母鼠微量鎘暴露對雄性子代性腺分化發(fā)育的影響及其機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

10 杜雨倩;云南某礦區(qū)普米族居民鉛、鎘暴露評估的初步研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：硒對鎘暴露大鼠肝、睪丸毒性的劑量選擇性保護作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：425238