目的:觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)移植對HD中毒大鼠神經(jīng)組織神經(jīng)絲表達(dá)的影響。方法:選用100只成年SPF級雄性SD大鼠,采用隨機(jī)數(shù)字法進(jìn)行分組,分別為正常對照組(Control)、干細(xì)胞對照組(BMSCs)、染毒組(HD)、自身修復(fù)組(HD-NS)、干細(xì)胞修復(fù)組(HD-BMSCs),每組20只。以無菌生理鹽水稀釋過的HD溶液對實驗組大鼠進(jìn)行染毒,染毒方式為腹腔注射,劑量為400 mg/kg,對照組以同等劑量的無菌生理鹽水進(jìn)行注射。每天染毒1次,持續(xù)時間為5周。染毒模型成功后,經(jīng)尾靜脈注射BMSCs建立干細(xì)胞修復(fù)組,另一組給予相同劑量的無菌生理鹽水建立自身修復(fù)組,持續(xù)5周。全程對各組大鼠拍照記錄一般情況,記錄各組大鼠步態(tài)評分。干細(xì)胞修復(fù)模型建立成功后,各組分別取2只實驗動物以4%多聚甲醛灌流處死,提取脊髓、坐骨神經(jīng)組織備用;各組其余的動物斷頭處死,低溫下快速提取脊髓、坐骨神經(jīng)組織置于-80℃冰箱中保存。采用q RT-PCR檢測神經(jīng)絲各亞型(NF-L、NF-M、NF-H)基因表達(dá)的變化;應(yīng)用Western Blot方法檢測NF-L、NF-M、NF-H蛋白表達(dá)的變化。采用免疫熒光染色,...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1各組大鼠神經(jīng)行為學(xué)表現(xiàn)注：Control組為正常大鼠;BMSCs組為只注射BMSCs大鼠;HD組為暴露HD大鼠;HD-BMSCs組為暴露HD5周后，再注射BMSCs大鼠

（三）結(jié)果1.BMSCs移植對HD暴露大鼠神經(jīng)行為學(xué)的影響各組大鼠的神經(jīng)行為狀態(tài)見圖1，Control組大鼠在整個實驗過程中，行動敏捷，發(fā)育正常，無異常體征出現(xiàn)。給予HD染毒5周后，大鼠精神狀態(tài)差，皮毛粗糙灰暗，攝食飲水明顯減少，消瘦，無法站立，匍匐前行，雙后肢后拖,足....

圖2各組大鼠步態(tài)評分值隨時間變化結(jié)果

大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16各組大鼠步態(tài)評分如圖2所示，Control組大鼠的步態(tài)評分為1，且隨著時間的增加，步態(tài)評分保持不變。HD組大鼠的步態(tài)評分很高，屬于嚴(yán)重的步態(tài)異常，且隨著時間的延長，步態(tài)評分始終保持在高水平。HD中毒后的大鼠從注射BMSCs后的第2周開始步態(tài)評分顯著降低....

圖3各組大鼠脊髓組織NF-L免疫熒光強(qiáng)度注：a表示P<0.05，與Control組相比；b表示P<0.05，與HD組相比

17圖3各組大鼠脊髓組織NF-L免疫熒光強(qiáng)度注：a表示P<0.05，與Control組相比；b表示P<0.05，與HD組

圖4各組大鼠脊髓組織NF-L蛋白表達(dá)注：a表示P<0.05，與Control組相比；b表示P<0.05，與HD組相比

18圖4各組大鼠脊髓組織NF-L蛋白表達(dá)注：a表示P<0.05，與Control組相比；b表示P<0.05，與HD組相比。PCR檢測各組大鼠脊髓組織NF-L的基因表達(dá)結(jié)果如圖5所示。HD組N基因表達(dá)低于Control組，差異有統(tǒng)....

本文編號：4019842