砷、鋅對雄性大鼠生殖功能的聯(lián)合作用
本文關鍵詞:砷、鋅對雄性大鼠生殖功能的聯(lián)合作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的 觀察亞慢性飲水砷暴露對雄性大鼠睪丸組織的毒性作用,,以及不同劑量的鋅與砷聯(lián)合,對大鼠生殖毒性的拮抗作用。探討鋅拮抗砷的生殖毒性可能的作用機制。 方法 將40只4周齡的SPF(specific pathogen free)級雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠分成五組,每組8只,分別為:①對照組:雙蒸水;②單純?nèi)旧榻M:4mg/kg NaAsO2;③砷加低鋅組:4mg/kg NaAsO2+8mg/kg ZnSO4;④砷加中鋅組:4mg/kg NaAsO2+20mg/kg ZnSO4;⑤砷加高鋅組:4mg/kg NaAsO2+50mg/kg ZnSO4。連續(xù)灌胃染毒60天,取血和雙側(cè)睪丸,蘇木精伊紅染色(hematoxylin eosin,HE)觀察睪丸組織形態(tài)學改變,放射免疫法測定血清中睪酮(testosterone,T)的含量,免疫組織化學法測定睪丸中Fas蛋白的表達,酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測睪丸組織丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和乳酸脫氫酶(lactic dehydrogenase,LDH)的活性,RT-PCR法檢測睪丸中CuZn-SOD mRNA的表達,火焰原子吸收法測定睪丸組織中鋅元素的含量。 結(jié)果 與對照組相比單純?nèi)旧榻M大鼠體重明顯降低,三個加鋅組與單純?nèi)旧榻M相比體重正常,單純?nèi)旧榻M睪丸組織重量也明顯降低(P0.05)。中鋅與高鋅組與單純?nèi)旧榻M比較,睪丸重量正常(P0.05)。與單純?nèi)旧榻M比較,低鋅組睪丸重量差異無統(tǒng)計學意義,睪丸臟器系數(shù)也無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 HE染色結(jié)果顯示:單純?nèi)旧榻M各級的生精細胞都減少且排列疏松,管腔中只有少量精子;低鋅組生精細胞和成熟精子數(shù)量均較少,管腔內(nèi)出現(xiàn)脫落細胞;中鋅組和高鋅組各級生精細胞都有增加,管腔中成熟精子增多,形態(tài)結(jié)構正常。 免疫組化結(jié)果:單純?nèi)旧榻M睪丸組織中的Fas蛋白表達量顯著高于對照組,三個加鋅組Fas蛋白的表達都明顯降低。砷加低鋅組和高鋅組Fas蛋白表達高于對照組(P0.05)。砷加中鋅組Fas蛋白表達與對照組無統(tǒng)計學差異(P0.05)。 放射免疫測定結(jié)果:與對照組比較,單純?nèi)旧榻M的血清睪酮含量顯著下降,低鋅、中鋅及高鋅組與單純?nèi)旧榻M比較都顯著上升(P0.05),而高鋅組的睪酮含量與中鋅組比較,反而出現(xiàn)下降。 火焰原子吸收法結(jié)果:和對照組相比,單純?nèi)旧榻M大鼠睪丸鋅含量明顯降低,低鋅組也明顯比對照組低,高鋅組則明顯比對照組高(P0.05)。中鋅組睪丸鋅含量與對照組比差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 PCR結(jié)果:與對照組相比,單純?nèi)旧榻MCuZn-SOD mRNA表達量降低,高鋅組表達升高(P0.05),低鋅和中鋅組與對照組相比無統(tǒng)計學意義(P0.05);中、高鋅組與單純?nèi)旧榻M比較CuZn-SOD mRNA表達均升高(P0.05)。 ELISA結(jié)果:與對照組相比,單純?nèi)旧榻M和砷加低、高鋅組的MDA含量都明顯的上調(diào),而中鋅組卻明顯的下調(diào);中、高鋅組睪丸MDA都明顯低于單純?nèi)旧榻M(P0.05)。與對照組比較,單純?nèi)旧榻M和砷加低、高鋅組的睪丸組織的LDH和SOD活力都有明顯的下降,中鋅組的SOD比對照組則明顯上升(P0.05),而中鋅組LDH與對照組比差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);與單純?nèi)旧榻M比較,中鋅組和高鋅組的LDH和SOD活性明顯上升(P0.05)。 結(jié)論 飲水砷暴露可以引起雄性大鼠睪丸組織病理學改變,睪酮分泌減少,睪丸鋅含量下降,F(xiàn)as蛋白表達增多,出現(xiàn)脂質(zhì)過氧化損傷,影響CuZn-SOD mRNA的表達,對大鼠的睪丸組織和生殖功能造成損害。適當劑量的鋅可以拮抗這種毒性損傷作用,為砷中毒的防治提供實驗依據(jù)。
【關鍵詞】:亞砷酸鈉 硫酸鋅 睪丸 脂質(zhì)過氧化
【學位授予單位】:重慶醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R114
【目錄】:
- 英漢縮略語名詞對照5-7
- 摘要7-10
- ABSTRACT10-14
- 前言14-16
- 1 材料與方法16-26
- 2 結(jié)果26-32
- 3 討論32-36
- 4 結(jié)論36-37
- 參考文獻37-42
- 附圖42-45
- 文獻綜述45-52
- 參考文獻49-52
- 致謝52-53
- 攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況53-54
【參考文獻】
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本文編號:395944
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