評估陽離子膜吸附-洗脫法和陰離子膜吸附-洗脫法在富集水源性諾如病毒(NV)過程中的病毒回收效果、消耗時(shí)間及使用成本,可以獲得更適用于水源性諾如病毒實(shí)際監(jiān)測工作的較優(yōu)富集方法.以無錫市疾病預(yù)防控制中心保存的諾如病毒陽性標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒為模板,采用熒光定量RT-PCR(反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈反應(yīng))方法繪制病毒定量標(biāo)準(zhǔn)曲線,并應(yīng)用于病毒的絕對定量.將含諾如病毒的糞便懸液先稀釋成3個(gè)不同濃度,并加入滅菌水中,分別經(jīng)過陰離子膜(硝酸纖維素濾膜)或陽離子膜(Nanoceram膜)吸附洗脫,最終相同體積洗脫液提取核酸后用熒光定量RT-PCR方法進(jìn)行絕對定量,并進(jìn)一步計(jì)算最終病毒回收率.結(jié)果表明:①樣本病毒濃度為8×10¹～8×10¹⁰copies/μL時(shí),病毒拷貝數(shù)的lg對數(shù)值與Ct(熒光定量PCR中達(dá)到設(shè)定閾值所經(jīng)過的循環(huán)數(shù))呈線性關(guān)系.②隨著樣本病毒濃度的增加,陰離子膜法和陽離子膜法的病毒回收率都相應(yīng)增加.③當(dāng)檢測樣本中病毒濃度分別為8×10¹、4×10²copies/μL時(shí),陰離子膜法回收率分別為22. 2%±4. 1...

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