目的利用煤焦瀝青煙提取物（Coal tar pitch extracts,CTPE）構建的體外永生化人支氣管上皮細胞（Immortalized human bronchial epithelial,BEAS-2B）惡性轉化模型,研究ENST00000501520在細胞惡性轉化中對細胞功能的影響,以及可能的靶向基因,為從LncRNAs水平探討惡性轉化發(fā)生發(fā)展機制提供理論支持。方法1.UCSC數(shù)據(jù)庫檢索ENST00000501520轉錄基因基因信息和臨近基因情況。編碼潛能預測器（Coding potential calculator,CPC）、編碼潛能預測軟件（Coding PotentialAssessmentTool,CPAT）預測 ENST00000501520 蛋白質翻譯能力。細胞核質分離技術分離細胞核質RNA,qRT-PCR檢測細胞核、質中ENST00000501520相對表達含量,計算核質百分比,明確其亞細胞定位。qRT-PCR 檢測 CTPE15、20、25、30、35 代細胞中 ENST00000501520 相對含量隨細胞代數(shù)變化的變化情況。2.小干擾 RNA（Small... 

【文章來源】：鄭州大學河南省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

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ENST00000501520的轉錄基因定位及其臨近基因情況

３．２．２各組ＣＴＰＥ染毒細月包中ＥＮＳＴ０００００５０１５２０表達情況??分別提�。茫裕校牛保�、２０、２５、３０、３５代細胞總ＲＮＡ，并通過ｑＲＴ－ＰＣＲ檢??測各代數(shù)細胞中ＥＮＳＴ０００００５０１５２０的相對表達量。結果如表３．３和圖３．３所??示，在ＣＴＰＥ３０代及以前，ＥＮＳＴ０００００５０１５２０的相對表達量隨著細胞代數(shù)的增??加逐漸增加。ＣＴＰＥ３０代與ＣＴＰＥ１５、２０、２５代比較，差異具有統(tǒng)計學意義??（均Ｐ＜０．０５）。ＣＴＰＥ３０和ＣＴＰＥ３５代比較，差異無統(tǒng)計學意義（Ｐ＝０．８０４）。??表３．?３各組細胞ＥＮＳＴ０００００５０１５２０的相對表達量情況（ｎ＝８，?ｆ±ｓ）??組別?ＥＮＳＴ０００００５０１５２０相對表達量?Ｆ?Ｐ??ＣＴＰＥ１５?０．２７８±〇．〇７７??ＣＴＰＥ２０?０．８７５±０．３１４??ＣＴＰＥ２５?１．１５１±０．３６３?１９?６４７?＜０００１??ＣＴＰＥ３０?１．８６１±０．３８５＊??ＣＴＰＥ３５?１．９１６±０．７６５???注：＊表示與３０代前細胞組相比，ＣＴＰＥ３０組差異具有統(tǒng)計學意義，Ｐ＜０．０５？??１８??

分別配置５０ｎＭ、１００ｎＭ、１５０ｎＭ轉染濃度的ｓｉＲＮＡ干擾溶液對ＣＴＰＥ３０??代細胞干預培養(yǎng)４８ｈ，然后提取總ＲＮＡ進行ｑＲＴ－ＰＣＲ檢測ＥＮＳＴ０００００５０１５２０??的相對表達量，并計算干擾效率。結果如表３．４和圖３．４所示，與ＣＴＰＥ３０組比??較，不同干擾濃度組ＥＮＳＴ０００００５０１５２０的相對表達量明顯下降（均Ｐ＜０．０５），??其中５０ｎＭ干擾組減少５２．２８４％，ｌＯＯｎＭ干擾組減少６９．３７１％，１５０ｎＭ干擾組??減少２５．７３４％。選用丨ＯＯｎＭ為最佳干擾濃度，同時設立Ｍｏｃｋ組、ＮＣ組和無??任何處理的ＣＴＰＥ３０組。結果如表３．５和圖３．５所示，Ｍｏｃｋ組和ＮＣ組比較差??異無統(tǒng)計學意義（Ｐ＝０．４７８），且均與ＣＴＰＥ３０組比較差異無統(tǒng)計學意義（分別??／ＭＸ７１８，尸＝０．７２３）。１００ｎＭ?組相比?Ｍｏｃｋ、ＮＣ?和?ＣＴＰＥ３０?組，??ＥＮＳＴ０００００５０１５２０相對表達量明顯下降（均Ｐ＜０．００１?），轉染試劑和ｓｉＲＮＡ陰??性對照均不影響ＥＮＳＴ０００００５０１５２０的表達水平

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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