目的:壬基酚（Nonylphenol,NP）是壬基酚聚氧乙烯醚（nonylphenol polyethoxylate,NPE）的一種主要分解產(chǎn)物。NPE在工、農(nóng)業(yè)中被廣泛用作分散劑、乳化劑和表面活性劑等。NPE在生產(chǎn)和使用的過程中,以及排放到環(huán)境中后容易分解為NP,分解出的NP會造成水體、底泥、土壤,甚至空氣的污染,使人和生物體暴露在NP中。發(fā)育期的神經(jīng)系統(tǒng)對NP敏感,已有研究證實,發(fā)育期暴露于NP可致小腦功能出現(xiàn)異常,然而其機制尚不明確。本研究構建了孕哺期NP暴露動物模型,研究NP暴露對仔鼠小腦軸突和髓鞘發(fā)育的影響,并深入探討其可能的分子機制。研究方法:建立孕哺期NP暴露動物模型。對妊娠第0天至生育后第21天（postnatal day 21,PD 21）的母鼠通過灌胃的方式分別給與10、50和100 mg/kg的NP（溶于玉米油中）,對照組母鼠只給予玉米油。仔鼠出生后,母鼠對仔鼠進行自然哺乳直至仔鼠PD 21斷奶。以PD 14、PD 21和PD 80的雄性仔鼠小腦為研究對象,用Luxol fast blue染色的方法觀察PD 14仔鼠小腦髓鞘的發(fā)育情況;用免疫熒光的方法檢測軸突髓鞘... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 孕哺期壬基酚暴露對仔鼠小腦髓鞘發(fā)育的影響及其機制的研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和器材
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要器材
        2.2 主要試劑的配制
            2.2.1 4%多聚甲醛的配制
            2.2.2 10%SDS的配制
            2.2.3 10%APS的配制
            2.2.4 TBST的配制
            2.2.5 電泳緩沖液的配制
            2.2.6 轉(zhuǎn)膜液的配制
            2.2.7 封閉液的配制
            2.2.8 Luxol fast blue染色液的配制
            2.2.9 PBS的配制
            2.2.10 抗原修復液的配制
        2.3 動物模型的建立
        2.4 組織收集和處理
        2.5 western blot檢測
        2.6 Luxol fast blue染色
        2.7 免疫熒光
        2.8 統(tǒng)計分析
    3 結果
        3.1 孕哺期NP暴露致仔鼠小腦髓鞘發(fā)育遲緩
        3.2 孕哺期NP暴露致仔鼠小腦中成熟少突膠質(zhì)細胞減少
        3.3 孕哺期NP暴露致仔鼠小腦星形膠質(zhì)細胞增加
        3.4 孕哺期NP暴露致仔鼠小腦BMP4通路激活
    4 討論
    5 結論
第二部分 孕哺期壬基酚暴露致仔鼠小腦軸突損傷及其機制的研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要器材
        2.2 主要試劑的配制
            2.2.1 4%多聚甲醛的配制
            2.2.2 10%SDS的配制
            2.2.3 10%APS的配制
            2.2.4 TBST的配制
            2.2.5 電泳緩沖液的配制
            2.2.6 轉(zhuǎn)膜液的配制
            2.2.7 封閉液的配制
            2.2.8 PBS的配制
            2.2.9 抗原修復液的配制
        2.3 研究對象和分組
            2.3.1 實驗動物模型的構建和組織處理
            2.3.2 PC12細胞系的培養(yǎng)與模型的建立
            2.3.3 小腦的免疫熒光檢測
            2.3.4 小腦的western blot檢測
            2.3.5 PC12 細胞western blot檢測
            2.3.6 PC12細胞免疫熒光檢測
            2.3.7 統(tǒng)計分析
    3 結果
        3.1 孕哺期NP暴露抑制仔鼠小腦軸突發(fā)育
        3.2 孕哺期NP暴露使仔鼠小腦浦肯野細胞的軸突產(chǎn)生腫脹
        3.3 孕哺期NP暴露致仔鼠小腦中ROCK2 的表達增加,ROCK2 通路激活
        3.4 NP致 PC12 細胞中ROCK2 表達量增加,ROCK2 通路激活
        3.5 NP抑制PC12細胞的神經(jīng)突生長
        3.6 NP通過激活ROCK2 通路抑制PC12 細胞神經(jīng)突生長
    4 討論
    5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Effects of chronic exposure to nonylphenol on locomotor activity and social behavior in zebrafish（Danio rerio）[J]. Jigang Xia,Cuijuan Niu ,Xuejiao Pei Ministry of Education Key Laboratory of Biodiversity Science and Ecological Engineering,College of Life Sciences,Beijing Normal University,100875 Beijing,China..  Journal of Environmental Sciences. 2010(09)
[2]性早熟女童血清中雙酚A、辛基酚、4-壬基酚測定和分析[J]. 喬麗麗,鄭力行,蔡德培.  衛(wèi)生研究. 2010(01)
[3]性早熟患兒血清中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的測定和分析[J]. 蘆軍萍,鄭力行,蔡德培.  中華預防醫(yī)學雜志. 2006(02)



本文編號：3173608