[目的]探討蛋白激酶C（PKC）/細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）信號通路在百草枯（PQ）調(diào)控人胚胎神經(jīng)干細(xì)胞增殖中的作用。[方法]以永生化的人胚胎神經(jīng)干細(xì)胞系（Re Ncell CX）為細(xì)胞模型,以終濃度為0、5、25、50、100μmol/L的百草枯處理細(xì)胞24 h,采用間接免疫熒光法檢測巢蛋白（Nestin）、β-微管蛋白III（β-tubulin III）和膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）;采用四甲基偶氮唑鹽（MTT）法檢測細(xì)胞存活率;分光光度法檢測培養(yǎng)上清中乳酸脫氫酶（LDH）活性;5-溴-2-脫氧尿嘧啶（Brd U）摻入法檢測細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞儀檢測熒光強(qiáng)度,以此反映細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度,免疫印跡法檢測細(xì)胞膜PKCα和細(xì)胞p ERK1/2蛋白表達(dá)。[結(jié)果]與對照組比較,25、50、100μmol/L百草枯染毒組的細(xì)胞活力出現(xiàn)明顯抑制作用,且細(xì)胞存活率與百草枯濃度對數(shù)值呈負(fù)相關(guān)（r=-0.96,P<0.05）;50、100μmol/L百草枯染毒組的細(xì)胞上清中LDH水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;免疫熒光染色顯示,隨著百草枯染毒濃度的增加,Brd U陽性細(xì)胞... 

【文章來源】：環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2017年01期 第42-48頁 北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑與儀器
    1.2 Re Ncell CX細(xì)胞培養(yǎng)與特征鑒定
    1.3 Re Ncell CX細(xì)胞的分化潛能鑒定
    1.4 細(xì)胞損傷
        1.4.1 細(xì)胞相對存活率
        1.4.2 LDH活性測定
    1.5 細(xì)胞增殖
    1.6 細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度
    1.7 PKCα、p ERK1/2蛋白表達(dá)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 Re Ncell CX細(xì)胞特性鑒定
    2.2 百草枯對Re Ncell CX細(xì)胞損傷的影響
    2.3 百草枯對Re Ncell CX細(xì)胞增殖的影響
    2.4 百草枯對Re Ncell CX細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的影響
    2.5 百草枯對Re Ncell CX細(xì)胞膜PKCα表達(dá)的影響
    2.6 百草枯對Re Ncell CX細(xì)胞p ERK1/2表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]百草枯對體外培養(yǎng)小鼠胚胎神經(jīng)干細(xì)胞增殖的影響[J]. 呂文,常秀麗,吳慶,周志俊.  環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué). 2011(01)



本文編號：2910838