發(fā)布時間：2017-04-07 08:19

  本文關(guān)鍵詞：苦蕎麥對高脂血癥大鼠的降脂作用及其機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的心腦血管疾病是我國第一位死因的慢性病,其中以高脂血癥為代表的脂質(zhì)代謝紊亂是心腦血管病的重要誘因,控制高脂血癥的發(fā)生發(fā)展對于預(yù)防心腦血管疾病有著重要意義�？嗍w麥?zhǔn)俏覈鴤鹘y(tǒng)的谷類食物之一,含有較多的蘆丁、槲皮素等類黃酮物質(zhì),被認(rèn)為具有降脂、降糖、抗氧化等作用。我們從四川省涼山出產(chǎn)的苦蕎麥中提取苦蕎黃酮,建立測定大鼠血清和臟器組織中蘆丁和槲皮素的高效液相色譜法,研究苦蕎麥及苦蕎黃酮對實驗性高脂血癥大鼠的降血脂作用及其機(jī)制,為苦蕎麥?zhǔn)称返暮侠響?yīng)用提供理論基礎(chǔ)。方法1.以90%乙醇在65℃水浴條件下從苦蕎麥中提取苦蕎黃酮。采用ODS-SPC18色譜柱(4.6 mm×250 mm,粒徑5um),以乙腈(B)和0.5%磷酸緩沖液(A)為流動相梯度洗脫(25%B 0～6min,25%～50%B 6～10min,50%B 10-17min, 50%～25%B 17～20min,25%B 20-25min):流速1ml/min;柱溫40℃,檢測波長360 nm,測定苦蕎麥及苦蕎黃酮、血清和組織中蘆丁和槲皮素含量。2.SPF級SD成年雄性大鼠70只,10只喂飼基礎(chǔ)飼料作為正常對照組,其余60只喂飼高脂飼料制作高脂血癥模型。一周后,高脂血癥模型大鼠按體重和TC隨機(jī)分為6組：模型組、藥物對照組、苦蕎黃酮高劑量組、苦蕎黃酮低劑量組、苦蕎麥高劑量組、苦蕎麥低劑量組。藥物對照組灌胃給予2mg/kg·bw辛伐他汀(喂飼高脂飼料),苦蕎黃酮低、高劑量組分別灌胃給予91.300mg/kg·bw苦蕎黃酮(喂飼高脂飼料),正常對照組(喂飼基礎(chǔ)飼料)、模型組(喂飼高脂飼料)灌胃給予等量蒸餾水�？嗍w麥高劑量組喂飼含10%苦蕎麥粉的高脂飼料,苦蕎麥低劑量組喂飼含3.33%苦蕎麥粉的高脂飼料,連續(xù)4w。每周觀察大鼠體重,實驗期末心臟取血并處死大鼠,離心分離血清,測定血清TG. TC.HDL-C、LDL-C。取肝臟稱重,留取部分肝臟組織制備勻漿測定肝TG.TC,用RT-PCR法檢測大鼠肝臟HMG-CoA還原酶(HMG-CoA reductase).膽固醇7a羥化酶(cholesterol 7a-hydroxylase,CYP7A1)和低密度脂蛋白受體(lowdensity lipoprotein receptor,LDL-R)mRNA的表達(dá)量。結(jié)果1.經(jīng)HPLC檢測,苦蕎麥樣品含蘆丁1.8%,槲皮素0.2%；苦蕎黃酮含蘆丁60%,槲皮素6.67%。血清蘆丁在0.08-25μg/ml,槲皮素在0.016～10μ∥ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)為0.9999；蘆丁和槲皮素的檢測限分別為0.016μg/ml和0.004μg/ml;日內(nèi)RSD分別小于7.4%和8.1%,日間RSD小于9.1%和9.0%。組織蘆丁和槲皮素在0.05-8μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)為0.9999,肝組織蘆丁和槲皮素的檢測限分別為0.012μg/ml和0.004μg/ml,日內(nèi)RSD分別小于7.9%和8.9%,日間RSD分別小于8.9%和7.2%,腎臟組織和小腸的蘆丁和槲皮素檢測限均為0.02μg/ml;血清和組織中蘆丁和槲皮素的回收率均在72%以上。2.降脂動物實驗結(jié)果顯示,與正常對照組相比,模型對照組大鼠的體重增重,肝臟指數(shù),血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C),肝臟TG均顯著升高(P0.05)。與模型組比較,苦蕎黃酮及苦蕎麥各劑量組大鼠血清TG. TC. LDL-C和肝臟TG值降低,血清高密低脂蛋白(HDL-C)升高,差異均具有顯著性(P0.05)。與正常對照組相比,模型組動物肝臟組織中HMG-CoA mRNA表達(dá)水平顯著增加,CYP7A1、LDL-RmRNA表達(dá)水平明顯減少(P0.05)；與模型組比較,苦蕎黃酮、苦蕎麥和藥物對照組能抑制HMG-CoA mRNA的表達(dá),增加CYP7A1、LDL-RmRNA的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論1.苦蕎麥中苦蕎黃酮含量豐富,以蘆丁、槲皮素為主。HPLC方法靈敏度較高、重復(fù)性良好,操作簡單、快速,可用于血清和組織中蘆丁和槲皮素的分析測定。2.苦蕎麥可降低高脂血癥模型大鼠的血脂和肝脂水平,其作用機(jī)制可能與苦蕎黃酮抑制肝臟組織中HMG-CoA mRNA的表達(dá),上調(diào)CYP7A1、LDL-R mRNA表達(dá)水平有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：苦蕎麥 高效液相色譜法 蘆丁 槲皮素 血清 組織勻漿 苦蕎黃酮 血脂 肝脂 HMG-CoA CYP7A1 LDL-R mRNA
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R151
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 英文縮略詞表9-10
• 前言10-13
• 第一部分 高效液相色譜法測定大鼠血清和組織中蘆丁和槲皮素13-27
• 1. 材料與方法13-14
• 2. 結(jié)果14-21
• 3. 討論21-27
• 第二部分 苦蕎黃酮對高脂血癥大鼠的降脂作用及其機(jī)制27-41
• 1. 材料與方法27-31
• 2. 結(jié)果31-37
• 3. 討論37-41
• 參考文獻(xiàn)41-47
• 綜述47-59
• 參考文獻(xiàn)54-59
• 論文發(fā)表情況59-60
• 致謝60-61

【參考文獻(xiàn)】

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1 王敏;魏益民;高錦明;;苦蕎麥總黃酮對高脂血大鼠血脂和抗氧化作用的影響[J];營養(yǎng)學(xué)報;2006年06期

  本文關(guān)鍵詞：苦蕎麥對高脂血癥大鼠的降脂作用及其機(jī)制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：290028