目的:鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)在全球范圍內(nèi)被廣泛應(yīng)用,常用于化妝品、香水等護理產(chǎn)品、驅(qū)蚊油、清漆和包裝袋、塑料薄膜等塑料制品中。在水體、土壤、大氣中都能檢測到DMP,其經(jīng)由大氣、水、食物等進入生物體中,對機體健康產(chǎn)生威脅。目前,在國內(nèi)外尚未見DMP對小鼠的生殖毒性作用研究,本實驗對C57小鼠連續(xù)灌胃DMP,分別在20和40天觀察小鼠卵巢、睪丸各項指標的變化,探討DMP對小鼠生殖毒作用,以期為DMP的毒理檢測和預防提供資料,為其安全應(yīng)用提供依據(jù)。方法:選擇80只健康C57小鼠,劑量分組為4組,每組20只,雌雄各半,即雌、雄性陰性對照組(玉米油)、低0.5g·kg~(-1)DMP組、中1.0 g·kg~(-1)DMP組、高2.0g·kg~(-1)DMP組,每天灌胃1次。分別于20和40天后,眶靜脈竇取血后脫臼處死,觀察雄性小鼠血清性激素水平(T、FSH、LH)、睪丸組織標志酶活性(LDH、SDH、G-6-PD)、ATP酶、脂質(zhì)過氧化損傷(SOD、CAT、GSH-PX、MDA)、精子計數(shù)及畸形率、睪丸細胞周期及凋亡率;雌性小鼠血清性激素水平(P、E_2、FSH、LH)、卵巢細胞凋亡率指標的變化情況。結(jié)果:1.各組小鼠體重、肛殖距、睪丸臟器系數(shù)和卵巢臟器系數(shù)的變化雄鼠染毒20天,1.0g·kg~(-1)DMP組睪丸臟器系數(shù)明顯高于對照組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組睪丸臟器系數(shù)明顯低于0.5和1.0g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。染毒40天,1.0和2.0g·kg~(-1)DMP組小鼠肛殖距明顯低于其他各組(P0.05)。各染毒組的睪丸臟器系數(shù)明顯低于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加睪丸臟器系數(shù)呈降低趨勢。雌鼠染毒20天,各染毒組卵巢臟器系數(shù)明顯高于對照組(P0.05);1.0g·kg~(-1)DMP組卵巢臟器系數(shù)明顯低于0.5 g·kg~(-1)DMP組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組卵巢臟器系數(shù)明顯高于0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。染毒40天,0.5g·kg~(-1)DMP組卵巢臟器系數(shù)明顯高于對照組(P0.05);1.0和2.0g·kg~(-1)DMP組卵巢臟器系數(shù)明顯低于其他各組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組卵巢臟器系數(shù)明顯低于1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。2.各組小鼠血清中性激素水平變化雄鼠染毒20天,0.5 g·kg~(-1)DMP組T含量明顯高于對照組(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP組T含量明顯低于0.5 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。2.0 g·kg~(-1)DMP組FSH含量明顯高于對照組和1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。各染毒組LH含量均低于對照組(P0.05)。染毒40天,各染毒組T含量均明顯低于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加T含量變化呈升高趨勢。各染毒組FSH含量均低于對照組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組FSH含量明顯高于0.5 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。雌鼠染毒40天,各染毒組小鼠血清中E_2含量明顯高于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加E_2含量變化呈降低趨勢。2.0 g·kg~(-1)DMP組小鼠FSH含量明顯低于其他組(P0.05)。2.0 g·kg~(-1)DMP組小鼠LH含量明顯高于其他組(P0.05)。3.各組小鼠睪丸組織酶活性變化染毒20天,各染毒組LDH含量均高于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加LDH含量變化呈升高趨勢。0.5和2.0 g·kg~(-1)DMP組G-6-PD含量明顯低于其他各組(P0.05)。0.5 g·kg~(-1)DMP組SDH含量明顯低于對照組(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP組含量明顯高于其他各組(P0.05)。染毒40天,1.0和2.0g·kg~(-1)DMP組的LDH含量明顯低于其他各組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組的LDH含量明顯低于1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。各染毒組睪丸勻漿中的G-6-PD含量明顯高于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加G-6-PD含量變化呈升高趨勢。2.0 g·kg~(-1)DMP組SDH含量明顯高于對照組和1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。4.各組雄性小鼠睪丸組織中Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase、Na~+-K~+-ATPase活性變化染毒20天,1.0和2.0g·kg~(-1)DMP組Na~+-K~+-ATPase活性明顯低于其他各組(P0.05);2g·kg~(-1)DMP組Na~+-K~+-ATPase活性明顯低于1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。各劑量組Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性明顯低于對照組(P0.05);2g·kg~(-1)DMP組Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性明顯低于0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。染毒40天,0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP組Na~+-K~+-ATPase活性明顯低于其他各組(P0.05)。1.0 g·kg~(-1)DMP組Na~+-K~+-ATPase活性明顯低于0.5g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。1.0 g·kg~(-1)DMP組Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性明顯高于其他各組(P0.05)。5.雄性小鼠睪丸組織中脂質(zhì)過氧化水平變化染毒20天,各染毒組睪丸勻漿中MDA含量明顯低于對照組(P0.05);2.0g·kg~(-1)DMP組含量明顯低于0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。各染毒組小鼠的GSH-Px含量明顯高于對照組(P0.05)。1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP組的SOD含量明顯高于其他各組(P0.05)。0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP組的明顯高于對照組(P0.05);1.0 g·kg~(-1)DMP組的CAT含量明顯高于0.5 g·kg~(-1)DMP組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組的CAT含量明顯低于其他組(P0.05)。染毒40天,0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP組MDA含量明顯高于對照組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組MDA含量明顯低于其他組(P0.05)。各染毒組小鼠的GSH-Px含量均明顯低于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加GSH-Px含量變化呈先降低后升高趨勢。6.各組小鼠睪丸細胞凋亡和周期、卵巢細胞凋亡變化雄鼠染毒20天,0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP組G0/G1期明顯高于對照組(P0.05)。各染毒組S期明顯低于對照組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組S期明顯高于0.5g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。各染毒組G2/M期明顯高于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加G2/M期變化呈降低趨勢。各染毒組凋亡率明顯高于對照組(P0.05)。染毒40天,0.5 g·kg~(-1)DMP組G0/G1期明顯高于其他各組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組G0/G1期明顯低于對照組和1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。各染毒組S期明顯低于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加S期變化呈升高趨勢。1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP組G2/M期明顯高于其他各組(P0.05)。各染毒組凋亡率均明顯高于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加凋亡率變化呈先升高后降低趨勢。雌鼠染毒20天,0.5g·kg~(-1)DMP組卵巢細胞凋亡率明顯低于對照組(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP組卵巢細胞凋亡率明顯高于其他各組(P0.05)。染毒40天,0.5g·kg~(-1)DMP組卵巢細胞凋亡率明顯低于對照組(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP組卵巢細胞凋亡率明顯高于其他各組(P0.05)。7.各組雄性小鼠精子相對計數(shù)和精子畸形率的變化染毒20天,各染毒組相對精子數(shù)明顯低于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加相對精子數(shù)變化呈先升高后降低趨勢。1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP組精子畸形率明顯高于其他各組(P0.05);隨著染毒劑量的增加精子畸形率變化呈升高趨勢。染毒40天,0.5 g·kg~(-1)DMP組相對精子數(shù)明顯高于對照組(P0.05);1.0和2.0g·kg~(-1)DMP組相對精子數(shù)明顯低于其他各組(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP組相對精子數(shù)明顯高于1.0 g·kg~(-1)DMP組(P0.05)。各染毒組精子畸形率明顯高于對照組(P0.05);隨著染毒劑量的增加精子畸形率變化呈升高趨勢。結(jié)論:1.DMP可引起雄性小鼠血清中LH和T含量降低,FSH活性升高;雌性小鼠血清中E_2和LH含量增加,FSH活性下降。2.隨著染毒時間延長,DMP可導致小鼠睪丸組織中LDH含量變化呈先增加后減少趨勢;G-6-PD含量變化呈先減少后增加趨勢;高劑量DMP導致SDH含量增加。3.DMP可降低小鼠睪丸組織中Na~+-K~+-ATPase活性,染毒40天,1 g·kg~(-1)DMP組睪丸組織中Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性升高。4.染毒20天,小鼠睪丸勻漿中MDA含量減少;SOD含量增加;0.5和1.0g·kg~(-1)DMP組CAT含量增加,2.0g·kg~(-1)DMP組CAT含量減少。染毒40天,0.5和1.0g·kg~(-1)DMP組MDA含量增加,2.0g·kg~(-1)DMP組MDA含量減少。隨著染毒時間延長,DMP可導致GSH-Px的含量變化呈先增加后減少趨勢。5.DMP影響小鼠睪丸細胞周期變化,并可引起睪丸細胞和卵巢細胞凋亡。6.DMP可導致小鼠精子數(shù)量減少,并使小鼠精子畸形率增加。
【學位單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R114
【部分圖文】：

圖 3.1 DMP 染毒 20 天后睪丸細胞周期變化a:對照組 b:0.5 g·kg-1DMP 組 c:1.0 g·kg-1DMP 組 d:2.0 g·kg-1DMP 組

圖 3.1 DMP 染毒 20 天后睪丸細胞周期變化a:對照組 b:0.5 g·kg-1DMP 組 c:1.0 g·kg-1DMP 組 d:2.0 g·kg-1DMP 組

圖 3.3 DMP 染毒 40 天后睪丸細胞周期變化a:對照組 b:0.5 g·kg-1DMP 組 c:1.0 g·kg-1DMP 組 d:2.0 g·kg-1DMP 組

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本文編號：2819319