【摘要】：目的:我國是農(nóng)藥生產(chǎn)和使用大國,有機(jī)磷農(nóng)藥(organophosphate pesticides,OPs)是目前國內(nèi)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用廣泛、使用量大的農(nóng)藥。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)發(fā)現(xiàn),宮內(nèi)或生命早期OPs暴露可影響后代的神經(jīng)行為發(fā)育。但目前,國內(nèi)外有關(guān)出生前及出生后OPs暴露和兒童神經(jīng)行為發(fā)育的相關(guān)性研究并不多見且研究結(jié)論不一致,可能與人群易感性有關(guān),而對(duì)氧磷酶1(paraoxonase 1,PON1)作為OPs的解毒酶,在人群對(duì)OPs的易感性中的作用越來越受到關(guān)注。本研究通過測(cè)定孕婦及24個(gè)月幼兒尿樣中OPs的非特異性代謝產(chǎn)物水平,分析出生前后OPs暴露對(duì)幼兒神經(jīng)行為發(fā)育的影響。圍繞與神經(jīng)行為發(fā)育密切相關(guān)的腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF),探討OPs暴露對(duì)幼兒神經(jīng)行為發(fā)育影響的機(jī)制。并且通過檢測(cè)孕婦的PON1基因型和表觀遺傳學(xué)改變,探討PON1在人群對(duì)OPs的神經(jīng)發(fā)育毒性易感性中的作用。方法:本研究依托于一個(gè)建立在中國山東省渤海萊州灣南岸的出生隊(duì)列研究(Laizhou Wan Birth Cohort,LWBC)。于2010年9月至2013年12月期間,經(jīng)過初篩在當(dāng)?shù)匚ㄒ灰患揖哂挟a(chǎn)科病房的二甲醫(yī)院分娩的孕婦,共有773名孕晚期婦女同意并入選為本研究對(duì)象。對(duì)準(zhǔn)備在該醫(yī)院分娩的孕婦進(jìn)行問卷調(diào)查,收集孕婦靜脈血、尿液和新生兒臍血;并隨訪至24個(gè)月,收集24個(gè)月幼兒的尿液進(jìn)行OPs暴露水平檢測(cè),運(yùn)用格塞爾發(fā)育量表(Gesell Developmental Schedules,Gesell)從粗動(dòng)作能、精細(xì)動(dòng)作能、應(yīng)物能、言語能、應(yīng)人能5個(gè)方面進(jìn)行神經(jīng)行為發(fā)育評(píng)估。采用氣相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)檢測(cè)孕婦(436例)及24個(gè)月幼兒(427例)尿液中OPs的非特異性代謝產(chǎn)物,采用酶聯(lián)免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)臍血清BDNF含量(n=364),采用DNA測(cè)序技術(shù)檢測(cè)母血PON1_(-108)、PON1_(192)、PON1_(55)位點(diǎn)的基因型(n=244),采用焦磷酸測(cè)序法檢測(cè)PON1 94953970、94953956、94954153、94954144位點(diǎn)甲基化程度(n=244)。運(yùn)用線性回歸模型定量評(píng)價(jià)OPs暴露對(duì)幼兒神經(jīng)行為發(fā)育的影響,評(píng)價(jià)出生前OPs暴露對(duì)臍血清BDNF含量的影響,并采用Sobel檢驗(yàn)進(jìn)一步探討B(tài)DNF在出生前OPs暴露對(duì)幼兒神經(jīng)行為發(fā)育影響中的介導(dǎo)作用。探討PON1在人群對(duì)OPs的神經(jīng)發(fā)育毒性易感性中的作用。結(jié)果:(1)孕婦尿樣中四種非特異性二烷基磷酸酯化合物(dialkylphosphate,DAP)代謝物,即磷酸二甲酯(dimethylphosphate,DMP)、二甲基硫代磷酸酯(dimethylthiophosphate,DMTP)、磷酸二乙酯(diethylphosphate,DEP)、二乙基硫代磷酸酯(diethylthiophosphate,DETP)肌酐校正后的中位數(shù)水平分別為:21.42、2.24、11.41、1.93μg/g,本研究中孕婦尿樣中主要的DAP代謝物(DMP和DEP)水平均高于發(fā)達(dá)國家的報(bào)道水平。(2)出生前總磷酸二乙酯類(diethylphosphate metabolites,DEs)水平(DEs=DEP+DETP)與24個(gè)月幼兒應(yīng)人能之間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)(β= 2.59,95%CI, 4.71 to 0.46,p=0.017),出生前總二烷基磷酸酯化合物(total dialkylphosphate metabolites,DAPs)水平(DAPs=DMP+DMTP+DEP+DETP)與24個(gè)月幼兒應(yīng)人能之間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)(β= 2.49,95%CI, 4.85 to 0.14,p=0.038)。出生前DAPs水平(β= 0.05,95%CI, 0.11 to 0.00,p=0.037)和出生前DEs水平(β= 0.06,95%CI, 0.10 to 0.01,p=0.016)與臍血清BDNF含量負(fù)相關(guān)。但未發(fā)現(xiàn)BDNF在出生前OPs暴露對(duì)24個(gè)月幼兒神經(jīng)行為發(fā)育影響中的介導(dǎo)作用。(3)24個(gè)月幼兒尿樣中四種非特異性DAP代謝物(DMP、DMTP、DEP、DETP)肌酐校正后中位數(shù)水平分別為:32.55、3.74、14.81、3.93μg/g。與國外發(fā)達(dá)國家相比,本研究中幼兒尿樣中DMP、DEP中位數(shù)水平較高。(4)出生后24個(gè)月的總磷酸二甲酯類(dimethylphosphate metabolites,DMs)水平(DMs=DMP+DMTP)與24個(gè)月幼兒應(yīng)物能之間呈現(xiàn)顯著正相關(guān)(β=2.05,95%CI,0.41 to 3.69,p=0.014)。(5)在母PON1基因型為PON1_(-108)CC、PON1_(192)QQ、PON1_(55)LM的幼兒中,出生前OPs暴露與24個(gè)月幼兒神經(jīng)行為發(fā)育呈顯著負(fù)相關(guān):在母PON1_(-108)CC的幼兒中,出生前DMs水平與應(yīng)人能之間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)(β= 5.72,95%CI, 11.29 to 0.16,p=0.044);在母PON1_(192)QQ的幼兒中,出生前DMs水平(β= 7.68,95%CI, 13.91 to 1.46,p=0.019)、出生前DAPs水平(β= 7.67,95%CI, 15.06 to 0.27,p=0.043)與粗動(dòng)作能之間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān),出生前DMs水平(β= 7.52,95%CI, 15.01 to 0.02,p=0.050)、出生前DEs水平(β= 9.07,95%CI, 17.51 to 0.63,p=0.037)、出生前DAPs水平(β= 9.60,95%CI, 17.92 to 1.29,p=0.027)與應(yīng)人能之間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān);在母PON1_(55)LM的幼兒中,出生前DMs水平與精細(xì)動(dòng)作能之間呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)(β= 6.94,95%CI, 13.54 to 0.35,p=0.040)。但在母PON1基因型為PON1_(-108)TT/CT、PON1_(192)RR/QR、PON1_(55)MM的幼兒中未發(fā)現(xiàn)出生前OPs暴露與24個(gè)月幼兒的神經(jīng)行為發(fā)育的相關(guān)性。(6)PON1甲基化程度與基因型有關(guān),高甲基化基因型有PON1_(-108)TT、PON1_(192)RR、PON1_(55)MM;中度甲基化基因型有PON1_(-108)CT、PON1_(192)QR;低甲基化基因型有PON1_(-108)CC、PON1_(192)QQ、PON1_(55)LM。(7)甲基化程度增高是否可能會(huì)增加出生前OPs暴露對(duì)后代神經(jīng)行為發(fā)育影響的易感性,結(jié)果不一致。結(jié)論:中國山東省渤海萊州灣南岸的孕婦及幼兒OPs暴露水平遠(yuǎn)高于歐美等發(fā)達(dá)國家的報(bào)道水平。出生前OPs暴露與24個(gè)月幼兒神經(jīng)行為發(fā)育顯著負(fù)相關(guān),并且在母PON1 108CC、PON1_(192)QQ、PON1_(55)LM的24個(gè)月幼兒中,這種影響更為明顯,提示在OPs暴露的神經(jīng)行為發(fā)育影響的研究中,需考慮人群的易感性。出生前OPs暴露可降低臍血清BDNF含量,但未發(fā)現(xiàn)BDNF在出生前OPs暴露對(duì)24個(gè)月幼兒神經(jīng)行為發(fā)育影響中的介導(dǎo)作用。
【圖文】：

技術(shù)路線

z = ab/ = 0.39，│z│< 0.97，p > 0.05*p < 0.05圖2. BNDF在出生前DAPs水平對(duì)24個(gè)月幼兒應(yīng)人能影響中的介導(dǎo)作用 2. Mediator effect of BDNF in the association between maternal DAPs lesocial domain DQs in 24-month-old childrenDNF在出生前DEs水平對(duì)24個(gè)月幼兒應(yīng)人能影響中的介導(dǎo)作用一步分析：出生前DEs水平（X）與24個(gè)月幼兒應(yīng)人能之間（Y，回歸系數(shù)c = 2.59（p = 0.017）（見表5、圖3），繼續(xù)進(jìn)入第二二步分析：臍血清BDNF含量（M）對(duì)出生前DEs水平（X）的回?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p = 0.120）（見圖3），回歸系數(shù)a的標(biāo)準(zhǔn)誤Sa為三步分析： 24個(gè)月幼兒應(yīng)人能（Y）對(duì)臍血清BDNF含量（M1.13，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p = 0.639）（見圖3）�；貧w系數(shù)b的標(biāo)準(zhǔn)誤）。
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R174

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 鄭雨錢;雷遠(yuǎn);龔健楊;鐘興;潘天榮;;對(duì)氧磷酶1基因多態(tài)性與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性研究[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2012年10期

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本文編號(hào)：2683058