【摘要】：背景/目的:環(huán)境毒物的暴露對(duì)人類健康構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅,生命早期砷暴露會(huì)顯著增加子代成年患動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)。DNA甲基化是表觀遺傳學(xué)的主要機(jī)制之一。研究顯示ABCA1甲基化的改變可以增加患動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn),但在砷導(dǎo)致的子代動(dòng)脈粥樣硬化中的作用尚不清楚。本文以Apo E-knockout(Apo E~(-/-))小鼠為研究對(duì)象,探究孕期飲水型砷暴露誘導(dǎo)雄性子代動(dòng)脈粥樣硬化與ABCA1甲基化的關(guān)系。方法:將妊娠期的Apo E~(-/-)小鼠分為對(duì)照組和砷暴露組,對(duì)照組給予普通飲水,砷暴露組于妊娠8-15天給予含85ppm NaAsO_2的砷飲水,含砷飲用水2-3天更換一次以減少氧化。妊娠小鼠自由分娩后,子代小鼠在出生21天后斷奶,給予普通標(biāo)準(zhǔn)飲食。子代出生8周和24周時(shí),油紅O、HE和Masson染色檢測(cè)主動(dòng)脈斑塊的形成和肝臟中脂質(zhì)蓄積情況;Elisa檢測(cè)雄性子代血清中脂質(zhì)水平變;放射性元素[~3H]標(biāo)記原代腹腔巨噬細(xì)胞后,液體閃爍計(jì)數(shù)儀檢測(cè)細(xì)胞中膽固醇的流出情況;RT-PCR和WB檢測(cè)肝臟中ABCA1基因的表達(dá);生化比色法測(cè)定氧化應(yīng)激水平;MethylFlash~(TM) Methylated DNA定量試劑盒檢測(cè)全基因組DNA甲基化水平;BSP法檢測(cè)肝臟中ABCA1基因啟動(dòng)子區(qū)DNA甲基化狀態(tài)。結(jié)果:通過R語言篩選和分析DEGs與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的數(shù)據(jù)后,發(fā)現(xiàn)ABC超家族成員的表達(dá)水平發(fā)生了變化,尤其是ABCA1基因。孕期砷暴露能導(dǎo)致8和24周齡雄性子代脂質(zhì)代謝異常,并促進(jìn)24周齡子代Apo E~(-/-)小鼠肝臟中脂質(zhì)蓄積,腹腔巨噬細(xì)胞中膽固醇的流出下降,肝臟ABCA1基因mRNA和蛋白水平的表達(dá)下調(diào)及動(dòng)脈粥樣硬化的形成。并且進(jìn)一步探討其作用后發(fā)現(xiàn),孕期砷暴露能夠誘導(dǎo)雄性子代氧化應(yīng)激,促進(jìn)其全基因組高甲基化,但對(duì)ABCA1基因啟動(dòng)子區(qū)的甲基化的影響不明顯。結(jié)論:1、孕期砷暴露可以通過增強(qiáng)雄性子代氧化應(yīng)激來促進(jìn)全基因組DNA高甲基化,增加動(dòng)脈粥樣硬化的風(fēng)險(xiǎn)。2、孕期砷暴露可以下調(diào)雄性子代小鼠肝臟中ABCA1表達(dá),抑制膽固醇流出,引起脂質(zhì)代謝紊亂,最終動(dòng)脈粥樣硬化的形成。
【圖文】：

腳趾標(biāo)號(hào)

引物設(shè)計(jì)
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2629714