【摘要】：目的:明確褪黑素(Melatonin,MLT)對(duì)氰戊菊酯(Fenvalerate,FEN)胚胎期暴露所致斑馬魚發(fā)育毒性的抑制作用。方法:(1)體視顯微鏡下觀察和計(jì)算斑馬魚存活率和畸形率;(2)自發(fā)運(yùn)動(dòng)活性檢測(cè)行為;(3)試劑盒檢測(cè)脂質(zhì)過氧化物丙二醛(MDA),抗氧化酶銅-鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX,GPx)和過氧化氫酶(CAT)活性;(4)AO染色檢測(cè)凋亡;(5)實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)神經(jīng)相關(guān)基因(Dlx2、Shha、Ngn1、Elavl3、Gfap),氧化應(yīng)激相關(guān)基因(Cu/Zn SOD、GPx、CAT、Nrf2、HO-1)和凋亡相關(guān)基因(Bax、Bcl-2、Fas、caspase 8、caspase 9、caspase3)的表達(dá)。結(jié)果:(1)100μg/L FEN處理至120 hpf時(shí),斑馬魚存活率為43.33%(P0.05),畸形率為58.24%(P0.05);10-9 mol/L MLT可使斑馬魚存活率、畸形率恢復(fù)至對(duì)照組水平(P0.05)。(2)100μg/L FEN暴露可減弱斑馬魚的運(yùn)動(dòng)能力(P0.05),下調(diào)斑馬魚神經(jīng)相關(guān)基因(Dlx2、Shha、Ngn1、Elavl3、Gfap)的水平(P0.05);MLT可恢復(fù)斑馬魚的運(yùn)動(dòng)能力及神經(jīng)相關(guān)基因水平(P0.05)。(3)FEN暴露可升高M(jìn)DA、Cu/Zn SOD、GPx、CAT的活性,以及上調(diào)氧化應(yīng)激相關(guān)基因(Cu/Zn SOD、GPx、CAT、Nrf2、HO-1)的m RNA表達(dá)水平,MLT顯著緩解FEN所致的氧化應(yīng)激反應(yīng)(P0.05)。(4)AO染色表明FEN暴露至120 hpf可顯著增加斑馬魚頭部凋亡,增加凋亡相關(guān)基因(Bax、Fas、caspase 8、caspase 9、caspase 3)的表達(dá),減少抗凋亡基因Bcl-2的表達(dá)(P0.05)。MLT可顯著緩解FEN導(dǎo)致的凋亡,使凋亡相關(guān)基因m RNA水平恢復(fù)至對(duì)照組水平(P0.05)。結(jié)論:1.氰戊菊酯胚胎期暴露可致斑馬魚發(fā)育毒性,褪黑素可抑制氰戊菊酯所致的發(fā)育毒性;2.褪黑素抑制氰戊菊酯所致斑馬魚發(fā)育毒性的機(jī)制可能與抑制斑馬魚體內(nèi)氧化應(yīng)激水平,降低凋亡相關(guān)。
【圖文】：

大約為對(duì)照組的50%（P<0.001）；當(dāng) FEN 濃度為 150 μg/L 時(shí)，斑馬魚存活率為 7.41%。120 hpf（圖1 F）可知，F(xiàn)EN 濃度小于 100 μg/L 時(shí)，斑馬魚畸形率與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；FEN 濃度為 100 μg/L 時(shí)，，斑馬魚畸形率為 58.24%（P<0.001）。因此，F(xiàn)EN 處理最適時(shí)間為 120 hpf，最適濃度為 100 μg/L。

與單獨(dú) FEN 處理組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。圖2B 結(jié)果表明，10-7mol/L 和 10-8mol/L MLT 預(yù)處理后，斑馬魚畸形率與對(duì)照組相比明顯升高（P<0.001），與單獨(dú) FEN 處理組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.001）；10-9
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R114

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本文編號(hào)：2624853