【摘要】：目的鉛暴露可影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同組織中鐵的含量的變化,鐵對于維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織的發(fā)育、代謝和功能活動(dòng)至關(guān)重要。而有關(guān)鉛暴露仔鼠不同腦組織中鐵轉(zhuǎn)出蛋白的變化研究還未見報(bào)道。本研究探討鐵轉(zhuǎn)出蛋白在生長發(fā)育期鉛暴露致神經(jīng)損傷的作用,為進(jìn)一步闡明鉛暴露致神經(jīng)損傷的機(jī)制研究提供理論依據(jù)。方法1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組:20只SD孕鼠隨機(jī)分為對照組和鉛暴露組,每組10只。對照組大鼠飲用0.05%醋酸鈉。鉛暴露組大鼠飲用0.05%醋酸鉛。自懷孕1d起孕鼠自由飲用直至仔鼠出生21 d。出生第21 d(post-natal day 21,PND21)的仔鼠離乳后繼續(xù)給予與母鼠相應(yīng)處理直至出生后42 d。2觀察仔鼠的精神狀況、活動(dòng)度、飲食、體重變化等一般情況。3應(yīng)用水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測仔鼠學(xué)習(xí)記憶功能。4應(yīng)用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法檢測仔鼠海馬、皮質(zhì)中鉛、鐵元素的含量。5應(yīng)用ELISA方法檢測仔鼠血清中可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體受體及總鐵結(jié)合力含量以及海馬、皮質(zhì)中鐵蛋白、膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ferroportin1,FPN1),膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)輔助蛋白(hephaestin,HP),銅藍(lán)蛋白(cerμloplasmin,CP)的含量。6 HE染色觀察PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)組織病理變化。7 Perl's鐵染色觀察仔鼠皮質(zhì)、海馬組織中鐵的分布。8 Real-time PCR檢測仔鼠FPN1 m RNA、HP m RNA、CP m RNA表達(dá)變化。統(tǒng)計(jì)分析:所有數(shù)據(jù)錄入Excel數(shù)據(jù)庫,采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用t-test,P0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,相關(guān)性分析應(yīng)用簡單相關(guān)系數(shù)分析。結(jié)果1鉛暴露對不同發(fā)育期仔鼠的損傷情況1)與對照組相比,鉛暴露組PND21、PND42仔鼠逃逸潛伏期延長;穿越平臺(tái)次數(shù)下降。2)HE染色結(jié)果顯示鉛暴露組仔鼠海馬、皮質(zhì)神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量減少,部分神經(jīng)元變性壞死,神經(jīng)元細(xì)胞排列紊亂。3)鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)內(nèi)鉛含量較同期對照組增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2鉛暴露對仔鼠海馬及皮質(zhì)鐵含量的影響1)在皮質(zhì)中,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠鐵含量分別為(7.231±1.640)μg/g,(34.285±5.671)μg/g和(47.628±8.741)μg/g,是對照組鐵含量的1.42倍,1.25倍,1.30倍。在海馬中,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠鐵含量分別為(64.23±18.24)μg/g,(103.11±21.35)μg/g和(57.70±9.81)μg/g,是對照組鐵含量的1.53倍,1.22倍,1.53倍。2)鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)組織均較正常對照組有大量鐵沉積,并出現(xiàn)聚集現(xiàn)象。3)鉛暴露組PND1、PND21和PND41仔鼠海馬中鐵蛋白含量分別為(6.98±0.88)mg/g,(5.41±1.06)mg/g和(5.28±0.88)mg/g,均高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示,鉛暴露后,仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵含量與鉛含量、逃避潛伏期呈正相關(guān)。3鉛暴露對仔鼠鐵轉(zhuǎn)出蛋白的影響1)鉛暴露組PND1仔鼠海馬膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ferroportin1 FPN1)含量為(4.45±0.82)ng/g,鉛暴露組PND42仔鼠海馬膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量為(2.68±0.67)ng/g,均低于對照組,(P0.05)。鉛暴露組PND21仔鼠皮質(zhì)膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白含量為(3.82±0.27)ng/g,低于對照組,(P0.05)。Real-time PCR結(jié)果顯示,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)內(nèi)FPN1 m RNA表達(dá)均低于正常對照組。2)鉛暴露組PND42仔鼠海馬膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)輔助蛋白(hephaestin,HP)含量與對照組相比,表達(dá)下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Real-time PCR結(jié)果顯示,在仔鼠海馬內(nèi),鉛暴露組PND1、PND21、PND42 HP m RNA表達(dá)均低于正常對照組,在仔鼠皮質(zhì)內(nèi),PND1、PND42 HP m RNA表達(dá)均低于正常對照組。3)鉛暴露組PND1、PND21和PND41仔鼠海馬中銅藍(lán)蛋白(ceruloplasmin,CP)含量分別為(49.05±13.29)ng/g,(45.91±7.52)ng/g,(32.33±8.61)ng/g,與對照組相比,表達(dá)下降,(P0.05)。Real-time PCR結(jié)果顯示,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)內(nèi)CP m RNA表達(dá)均低于正常對照組。結(jié)論1生長發(fā)育期鉛暴露導(dǎo)致了鐵穩(wěn)態(tài)失調(diào),這影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育。2生長發(fā)育期鉛暴露導(dǎo)致膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)下降;膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白參與了鉛暴露對中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的影響。
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2552636