【摘要】：目的鉛暴露可影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同組織中鐵的含量的變化,鐵對于維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織的發(fā)育、代謝和功能活動至關重要。而有關鉛暴露仔鼠不同腦組織中鐵轉(zhuǎn)出蛋白的變化研究還未見報道。本研究探討鐵轉(zhuǎn)出蛋白在生長發(fā)育期鉛暴露致神經(jīng)損傷的作用,為進一步闡明鉛暴露致神經(jīng)損傷的機制研究提供理論依據(jù)。方法1實驗動物及分組:20只SD孕鼠隨機分為對照組和鉛暴露組,每組10只。對照組大鼠飲用0.05%醋酸鈉。鉛暴露組大鼠飲用0.05%醋酸鉛。自懷孕1d起孕鼠自由飲用直至仔鼠出生21 d。出生第21 d(post-natal day 21,PND21)的仔鼠離乳后繼續(xù)給予與母鼠相應處理直至出生后42 d。2觀察仔鼠的精神狀況、活動度、飲食、體重變化等一般情況。3應用水迷宮實驗檢測仔鼠學習記憶功能。4應用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法檢測仔鼠海馬、皮質(zhì)中鉛、鐵元素的含量。5應用ELISA方法檢測仔鼠血清中可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體受體及總鐵結合力含量以及海馬、皮質(zhì)中鐵蛋白、膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白(ferroportin1,FPN1),膜鐵轉(zhuǎn)運輔助蛋白(hephaestin,HP),銅藍蛋白(cerμloplasmin,CP)的含量。6 HE染色觀察PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)組織病理變化。7 Perl's鐵染色觀察仔鼠皮質(zhì)、海馬組織中鐵的分布。8 Real-time PCR檢測仔鼠FPN1 m RNA、HP m RNA、CP m RNA表達變化。統(tǒng)計分析:所有數(shù)據(jù)錄入Excel數(shù)據(jù)庫,采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件包進行數(shù)據(jù)處理。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示,組間比較采用t-test,P0.05表示差異有統(tǒng)計學意義,相關性分析應用簡單相關系數(shù)分析。結果1鉛暴露對不同發(fā)育期仔鼠的損傷情況1)與對照組相比,鉛暴露組PND21、PND42仔鼠逃逸潛伏期延長;穿越平臺次數(shù)下降。2)HE染色結果顯示鉛暴露組仔鼠海馬、皮質(zhì)神經(jīng)元細胞數(shù)量減少,部分神經(jīng)元變性壞死,神經(jīng)元細胞排列紊亂。3)鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)內(nèi)鉛含量較同期對照組增高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2鉛暴露對仔鼠海馬及皮質(zhì)鐵含量的影響1)在皮質(zhì)中,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠鐵含量分別為(7.231±1.640)μg/g,(34.285±5.671)μg/g和(47.628±8.741)μg/g,是對照組鐵含量的1.42倍,1.25倍,1.30倍。在海馬中,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠鐵含量分別為(64.23±18.24)μg/g,(103.11±21.35)μg/g和(57.70±9.81)μg/g,是對照組鐵含量的1.53倍,1.22倍,1.53倍。2)鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)組織均較正常對照組有大量鐵沉積,并出現(xiàn)聚集現(xiàn)象。3)鉛暴露組PND1、PND21和PND41仔鼠海馬中鐵蛋白含量分別為(6.98±0.88)mg/g,(5.41±1.06)mg/g和(5.28±0.88)mg/g,均高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。相關性分析結果顯示,鉛暴露后,仔鼠皮質(zhì)及海馬中鐵含量與鉛含量、逃避潛伏期呈正相關。3鉛暴露對仔鼠鐵轉(zhuǎn)出蛋白的影響1)鉛暴露組PND1仔鼠海馬膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白(ferroportin1 FPN1)含量為(4.45±0.82)ng/g,鉛暴露組PND42仔鼠海馬膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白含量為(2.68±0.67)ng/g,均低于對照組,(P0.05)。鉛暴露組PND21仔鼠皮質(zhì)膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白含量為(3.82±0.27)ng/g,低于對照組,(P0.05)。Real-time PCR結果顯示,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)內(nèi)FPN1 m RNA表達均低于正常對照組。2)鉛暴露組PND42仔鼠海馬膜鐵轉(zhuǎn)運輔助蛋白(hephaestin,HP)含量與對照組相比,表達下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。Real-time PCR結果顯示,在仔鼠海馬內(nèi),鉛暴露組PND1、PND21、PND42 HP m RNA表達均低于正常對照組,在仔鼠皮質(zhì)內(nèi),PND1、PND42 HP m RNA表達均低于正常對照組。3)鉛暴露組PND1、PND21和PND41仔鼠海馬中銅藍蛋白(ceruloplasmin,CP)含量分別為(49.05±13.29)ng/g,(45.91±7.52)ng/g,(32.33±8.61)ng/g,與對照組相比,表達下降,(P0.05)。Real-time PCR結果顯示,鉛暴露組PND1、PND21、PND42仔鼠海馬、皮質(zhì)內(nèi)CP m RNA表達均低于正常對照組。結論1生長發(fā)育期鉛暴露導致了鐵穩(wěn)態(tài)失調(diào),這影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育。2生長發(fā)育期鉛暴露導致膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白表達下降;膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白參與了鉛暴露對中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的影響。
【學位授予單位】：華北理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R114

【參考文獻】

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1 張琳;鄒時樸;李國林;;高血鉛對幼兒智力發(fā)育的影響[J];南昌大學學報(醫(yī)學版);2014年06期

2 祝高春;伍鳳云;葉薇薇;李桂林;林芬;李耀斌;林雪群;范廣勤;;鉛暴露對N2a細胞SV2C表達的影響[J];毒理學雜志;2011年01期

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本文編號：2552636