【摘要】：目的：探討乙醇對小鼠生育力的影響，間接反映酒精對男性生育力的影響，為男性不育的預防和治療提供科學依據(jù)。 方法：實驗選用7～12周齡雄性健康昆明小鼠50只，體重25g～30g，隨機分為5組，每組10只，分別為對照組，試驗組(4組)。根據(jù)每天灌喂乙醇的量，將試驗組分成0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml四組。小鼠預飼1周后開始灌喂給藥，每日1次。試驗于小鼠灌胃的第4，第8，第12天進行切片制作、HE染色、生精細胞凋亡的凝膠電泳法檢測、TUNEL法定量檢測生精細胞凋亡、以及Bc1-2/Bax免疫組織化學試驗。 結果: ⑴對照組和0.1ml/kg組小鼠睪丸組織結構發(fā)育正常，生精上皮完整。0.2ml/kg組曲精小管上皮細胞層數(shù)未見顯著減少，初級生精細胞和次級生精細胞結構疏松，但生精上皮基本能保持完整。0.3ml/kg組曲精小管上皮細胞層數(shù)亦未見減少，初級生精細胞和次級生精細胞結構被破壞，精原細胞數(shù)目極度減少，核形態(tài)不規(guī)則。0.4ml/kg組睪丸組織結構已出現(xiàn)嚴重受損，曲精小管生精上皮已從基膜上脫落、與結締組織分離，初級生精細胞和次級生精細胞的結構完全被破壞，上皮細胞分層不可辨；精原細胞消失，次級精母細胞和精子細胞細胞核體積明顯減小，形態(tài)不規(guī)則，管腔中無精子。 ⑵睪丸組織生精細胞凋亡DNA特征性梯狀帶的檢測在第4d和8d時，對照組、0.1ml/kg組、0.2ml/kg組、0.3ml/kg組、0.4ml/kg組均未見凋亡的特征性梯狀條帶；而在第12d時，對照組和0.1ml/kg組沒有檢測出特征性梯狀條帶，溶劑組檢測出明顯的特征性梯狀條帶。 ⑶T UNEL法定量檢測生精細胞凋亡，第4天時，0.3ml/kg組、0.4ml/kg組的生精細胞凋亡指數(shù)較對照差異顯著（P＜0.05）；第8天時0.2ml/kg組和0.3ml/kg組的生精細胞凋亡指數(shù)較對照組差異顯著（P＜0.05），0.4ml/kg組的生精細胞凋亡指數(shù)較正常組和陰性組差異極顯著（P＜0.01）；第12天時，0.3ml/kg組、0.4ml/kg組較正常組的生精細胞凋亡指數(shù)差異顯著（P＜0.05），其中第8天0.4ml/kg組在所得實驗數(shù)據(jù)中最高達到0.4，，為實驗數(shù)據(jù)中最大值。 ⑷乙醇對雄性小鼠睪丸生精細胞凋亡調控基因Bax和Bcl-2蛋白表達，隨著乙醇濃度的升高陽性表達面積增大，呈現(xiàn)一定的劑量－效應關系，隨著乙醇濃度的增加灰度值降低。隨著乙醇濃度的增加陽性表達面積比降低，乙醇各濃度組灰度值均比對照組低，但是比較差異不顯著（P＞0.05），說明高劑量的乙醇會使Bcl-2蛋白的表達濃度減少。 結論：持續(xù)高劑量的乙醇能夠誘導促凋亡基因Bax蛋白的表達，阻止抑制凋亡基因Bcl-2蛋白的表達，持續(xù)高劑量的乙醇能夠誘發(fā)睪丸生殖細胞的凋亡，以致?lián)p傷小鼠的生殖能力。
【圖文】：

圖 2-1 對照組 8d 睪丸組織（×400） 圖 2-2 0.1ml/kg 組 8d 睪丸組織（×400）Fig.2-1 Tissues of 8d testicle from control group（×400） Fig.2-2 Tissues of 8d testicle from 0.1ml/kggroup（×400）圖2-3 0.2ml/kg組8d睪丸組織（×400） 圖2-4 0.3ml/kg組8d睪丸組織（×400）Fig.2-3 Tissues of 8d testicle from 0.2ml/kg group（×400） Fig.2-4 Tissues of 8d testicle from 0.3ml/kg group（×400）

圖 2-1 對照組 8d 睪丸組織（×400） 圖 2-2 0.1ml/kg 組 8d 睪丸組織（×400）Fig.2-1 Tissues of 8d testicle from control group（×400） Fig.2-2 Tissues of 8d testicle from 0.1ml/kggroup（×400）圖2-3 0.2ml/kg組8d睪丸組織（×400） 圖2-4 0.3ml/kg組8d睪丸組織（×400）Fig.2-3 Tissues of 8d testicle from 0.2ml/kg group（×400） Fig.2-4 Tissues of 8d testicle from 0.3ml/kg group（×400）
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R114

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本文編號：2538649