發(fā)布時(shí)間：2019-08-19 09:16

【摘要】：研究背景：糖尿病是全世界嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題，相關(guān)流行病學(xué)及實(shí)驗(yàn)研究表明，有機(jī)磷農(nóng)藥暴露可以增加糖尿病的患病率和死亡率。急慢性有機(jī)磷中毒患者會(huì)出現(xiàn)尿糖并伴有高血糖癥等。氧樂(lè)果是有機(jī)磷農(nóng)藥中應(yīng)用較多的殺蟲(chóng)劑，毒性較強(qiáng)，大鼠經(jīng)口半數(shù)致死量（LD_(50)）為500mg/kg，對(duì)人體的最小致死量為15-30mg/kg，而國(guó)家有機(jī)磷農(nóng)藥氧樂(lè)果暴露的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)小于0.5mg/kg。急性氧樂(lè)果中毒作用機(jī)制主要是抑制膽堿酯酶活性，產(chǎn)生嚴(yán)重的神經(jīng)毒作用。氧樂(lè)果暴露除產(chǎn)生神經(jīng)毒作用外，也可產(chǎn)生其他毒作用。有機(jī)磷農(nóng)藥可以導(dǎo)致機(jī)體血糖血脂紊亂，并產(chǎn)生嚴(yán)重的氧化應(yīng)激，導(dǎo)致胰島β細(xì)胞凋亡，產(chǎn)生胰島素抵抗效應(yīng)。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于致糖尿病效應(yīng)的有機(jī)磷農(nóng)藥主要是馬拉松、樂(lè)果、二嗪磷、敵敵畏等少數(shù)幾種，而國(guó)內(nèi)氧樂(lè)果應(yīng)用量較大，因此本研究采用氧樂(lè)果作為誘導(dǎo)劑觀察其對(duì)大鼠的前糖尿病效應(yīng)，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討。 目的：本研究選用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大鼠，采用灌胃的途徑進(jìn)行染毒，氧樂(lè)果染毒8周后，通過(guò)檢測(cè)大鼠血糖、血脂、氧化應(yīng)激以及胰島素信號(hào)傳導(dǎo)途徑的改變，探討有機(jī)磷農(nóng)藥氧樂(lè)果誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的糖尿病前效應(yīng)以及發(fā)生機(jī)制。 方法：50只雄性wistar大鼠隨機(jī)分為5組：正常組（Control），溶媒組（Vehicle），低劑量組（L-dose），中劑量組（M-dose）和高劑量組（H-dose）。氧樂(lè)果染毒量為：L-dose，1/40LD_(50)；M-dose，1/20LD_(50)；H-dose，1/10LD_(50)。連續(xù)染毒8周，取血、取材處死大鼠。通過(guò)血糖儀檢測(cè)大鼠空腹血糖（FBG）含量；放射免疫法檢測(cè)大鼠空腹胰島素(FINS)含量；硫代巴比妥酸（TBA）法檢測(cè)大鼠血清、胰腺、肝臟和肌肉丙二醛（MDA）含量；羥胺法檢測(cè)大鼠血清、胰腺、肝臟和肌肉超氧化物歧化酶（SOD）活性；比色法檢測(cè)大鼠血清、胰腺、肝臟和肌肉谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性；鉬酸銨法檢測(cè)大鼠血清、胰腺、肝臟和肌肉過(guò)氧化氫酶（CAT）活性；HE染色觀察大鼠胰腺、肝臟、肌肉、脂肪和脾臟的病理改變；Ellman法檢測(cè)大鼠全血中乙酰膽堿酯酶（AChE）和丁酰膽堿酯酶（BChE）活性；Western blot法檢測(cè)大鼠胰腺Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)，檢測(cè)大鼠骨骼肌胰島素受體底物-1（IRS-1）和p38MAPK的表達(dá)。 結(jié)果：1.大鼠FBG、FINS水平：各組大鼠FBG水平?jīng)]有差異；Control組、Vehicle組、L-dose組和M-dose組大鼠FINS水平?jīng)]有差異,與Control組和Vehicle組相比，，H-dose組大鼠FINS水平明顯降低（P0.05）。2.大鼠血液AChE、BChE活性：Control組和Vehicle組大鼠血液AChE和BChE活性沒(méi)有差異；與Control組相比，L-dose組、M-dose組和H-dose組大鼠血液AChE和BChE活性明顯下降（P0.05），H-dose組AChE和BChE活性下降最大。3.大鼠血脂水平：與Control組相比,L-dose組和H-dose組組大鼠血清甘油三酯（TG）含量無(wú)顯著變化，Vehicle組和L-dose組大鼠血清TG含量明顯升高（P0.05）；與Control組相比，Vehicle組和H-dose組大鼠血清膽固醇（TC）含量無(wú)顯著變化，L-dose組和M-dose組大鼠血清TC含量明顯降低（P0.05）；與Control組相比，Vehicle組大鼠血清低密度脂蛋白（LDL）含量無(wú)明顯變化，L-dose組、M-dose組和H-dose組大鼠血清LDL含量明顯增高（P0.05）；各組大鼠血清高密度脂蛋白含量（HDL）沒(méi)有差異。4.大鼠血清、胰腺和骨骼肌氧化應(yīng)激：與Control組相比，L-dose組、M-dose組和H-dose組大鼠血清、胰腺和骨骼肌MDA含量明顯升高（P0.05）；與Control相比，氧樂(lè)果暴露各組大鼠血清CAT活性明顯下降（P0.05）,大鼠胰腺、骨骼肌CAT活性明顯升高（P0.05）；與Control組相比，氧樂(lè)果暴露各組大鼠血清、骨骼肌GSH-Px活性明顯升高（P0.05），大鼠胰腺GSH-Px活性明顯降低（P0.05）；與Control組和Vehicle組相比，氧樂(lè)果暴露各組大鼠血清、胰腺SOD活性明顯升高（P0.05），大鼠骨骼肌SOD活性明顯降低（P0.05）。5.大鼠胰腺、骨骼肌、脾臟、腎臟和肝臟病理：與Control組相比，Vehicle組、L-dose組、M-dose組和H-dose組大鼠胰腺、骨骼肌、脾臟、腎臟和肝臟病理均未發(fā)生明顯改變。6.大鼠胰腺Bax與Bcl-2比值：與Control組相比，氧樂(lè)果暴露各組大鼠Bax與Bcl-2比值明顯升高（P0.05），且H-dose組Bax與Bcl-2比值改變最明顯。7.大鼠骨骼肌IRS-1表達(dá)：與Control組相比，氧樂(lè)果暴露各組大鼠骨骼肌IRS-1表達(dá)明顯降低（P0.05），且H-dose組IRS-1蛋白表達(dá)變化最明顯。8.大鼠骨骼肌p38MAPK表達(dá)：與Control組相比，氧樂(lè)果暴露各組大鼠骨骼肌p38MAPK表達(dá)明顯升高（P0.05），且H-dose組變化最顯著。 結(jié)論：1.氧樂(lè)果暴露可導(dǎo)致大鼠血液AChE和BChE活性降低。 2.氧樂(lè)果暴露可導(dǎo)致大鼠發(fā)生氧化應(yīng)激、血脂紊亂，從而造成胰腺組織損傷。 3.氧樂(lè)果暴露可導(dǎo)致大鼠產(chǎn)生糖尿病前效應(yīng)，并導(dǎo)致胰島素信號(hào)傳導(dǎo)通路障礙。
【圖文】：

第 3 章 結(jié)果第 3 章 結(jié) 果3.1 大鼠體重及進(jìn)食量變化隨著氧樂(lè)果暴露時(shí)間的持續(xù)，L-dose 組、M-dose 組和 H-dose 組大鼠體重增加量減少。染毒 8 周后，L-dose 組、M-dose 組和 H-dose 組大鼠體重明顯低于Control 組和 Vehicle 組（P<0.05）；L-dose 組與 M-dose 組大鼠體重變化沒(méi)有差異；H-dose 組大鼠體重明顯低于 L-dose 組和 M-dose 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。各組大鼠體重變化如圖 3.1 所示。

圖 3.2 各組大鼠血清 MDA 含量、SOD 活性、GSH-Px 活性和 CAT 活性比較Fig 3.2 MDA level,SOD activity,GSH-Px activity and CAT activity in serum*P<0.05 vs Control;#P<0.05 vs L-dose;≠P<0.05 vs M-dose3.7 大鼠胰腺 MDA 含量、SOD、GSH-Px 和 CAT 活性大鼠胰腺 MDA 含量、SOD 活性、GSH-Px 活性和 CAT 活性結(jié)果見(jiàn)圖 3.7。L-dose 組，M-dose 組和 H-dose 組大鼠胰腺 MDA 含量高于 Control 組、Vehicle組，且 H-dose 組胰腺 MDA 含量高于 L-dose 組和 M-dose 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。L-dose 組，M-dose 組和 H-dose 組大鼠胰腺 SOD 活性高于 Control組、Vehicle 組，且 M-dose 組大鼠胰腺 SOD 活性高于 L-dose 組和 H-dose 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。L-dose 組、M-dose 組和 H-dose 組大鼠胰腺 GSH-Px活性低于Control組和Vehicle組，且H-dose組大鼠胰腺GSH-Px活性低于M-dose
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 何軍山,盧新華,曹慧芳,李軍,周志雄;有機(jī)磷農(nóng)藥中毒對(duì)小鼠糖代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2003年01期

本文編號(hào)：2528156