發(fā)布時(shí)間：2019-07-23 05:12

【摘要】：目的:玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA),是一種非甾體類(lèi)霉菌毒素,它具有雌激素樣作用。它廣泛的存在于各種谷物及谷物制品中,在全球范圍內(nèi)數(shù)十個(gè)國(guó)家收集的谷物樣本中均發(fā)現(xiàn)污染存在,而且因?yàn)槠湫再|(zhì)比較穩(wěn)定,甚至可以在加熱后的食物中仍有殘存。ZEA能夠干擾雌激素信號(hào)通路的正常運(yùn)轉(zhuǎn),進(jìn)而影響小鼠、豬、馬等生物的生殖能力。此前研究表明,大劑量的玉米赤霉烯酮(高于無(wú)顯著作用濃度,No-Observed Effect Level,NOEL)暴露能夠降低雄性小鼠的精液品質(zhì),增加生精細(xì)胞的凋亡率,阻礙精子發(fā)生過(guò)程,損傷精子DNA完整性,并最終引起雌性受孕率的下降。對(duì)于玉米赤霉烯酮來(lái)講,目前對(duì)其對(duì)雄性生殖能力作用的研究都是針對(duì)大劑量的毒性作用,且暴露方式選擇均為非自然方式,針對(duì)模擬小劑量(低于無(wú)顯著作用濃度,No-Observed Effect Level,NOEL)玉米赤霉烯酮在自然條件下暴露對(duì)雄性生殖能力影響的研究卻未見(jiàn)報(bào)道。因此,為了研究既往認(rèn)為安全的小劑量的ZEA在自然條件下的暴露對(duì)雄性小鼠生殖能力的影響,本研究評(píng)估了小劑量的ZEA暴露后小鼠精子發(fā)生、精液品質(zhì)的變化趨勢(shì),以及相關(guān)的作用機(jī)制。方法:1、90只出生后21天的CD-1雄性小鼠,應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表法,以每組30只的方式隨機(jī)分成3組,分別被定義為0μg/(kg·d)組、20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組。2、各組分別暴露于0μg/kg b.w.,20μg/kg b.w.和40μg/kg b.w.濃度的ZEA,在處理14天、28天、42天后觀察相關(guān)指標(biāo)的變化。3、應(yīng)用計(jì)算機(jī)輔助精液質(zhì)量分析明確精子運(yùn)動(dòng)能力的變化,以及精子密度,超激活率等指標(biāo)的變化。4、應(yīng)用吉姆薩染色后光鏡下計(jì)數(shù),分析各組之間精子畸形率的變化。5、測(cè)量各組小鼠睪丸的質(zhì)量和體積。6、應(yīng)用試劑盒處理后在熒光顯微鏡下觀察,分析各組小鼠精子存活率的變化。7、應(yīng)用免疫組化染色方法,對(duì)單位面積曲精小管內(nèi)生精細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并測(cè)量直徑。8、應(yīng)用免疫熒光染色方法,觀察第一次減數(shù)分裂期間生精細(xì)胞中DNA雙鏈損傷的發(fā)生率。結(jié)果:1、與0μg/(kg·d)組相比,20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組小鼠的精子活力、活動(dòng)性精子、精子濃度、超激活率在處理14天、28天、42天后,均表現(xiàn)出與濃度相關(guān)的下降趨勢(shì),在處理42天后20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組的各項(xiàng)指標(biāo)與0μg/(kg·d)組相比,差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、與0μg/(kg·d)組相比,20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組的畸形精子率呈現(xiàn)與濃度相關(guān)的上升趨勢(shì),且差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、與0μg/(kg·d)組相比,20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組的死亡精子率呈現(xiàn)與濃度相關(guān)的上升趨勢(shì),且差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組小鼠睪丸與0μg/(kg·d)組的相比,小鼠睪丸體積呈現(xiàn)與濃度相關(guān)的下降趨勢(shì),在處理42天后,下降存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5、20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組小鼠睪丸與0μg/(kg·d)組的相比,小鼠睪丸質(zhì)量呈現(xiàn)與濃度相關(guān)的下降趨勢(shì),在處理42天后,下降存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6、在ZEA處理14天后,20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組小鼠單位面積的曲精小管內(nèi)生精細(xì)胞計(jì)數(shù)與0μg/(kg·d)組相比,僅呈現(xiàn)出與濃度無(wú)關(guān)的不明顯的下降趨勢(shì)。但在處理28天后,20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組小鼠單位面積的曲精小管的各級(jí)生精細(xì)胞計(jì)數(shù)均表現(xiàn)出與濃度相關(guān)的下降趨勢(shì),差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。7、在處理14天,28天,42天后,20μg/(kg·d)組和40μg/(kg·d)組與0μg/(kg·d)組相比,以γH2AX為標(biāo)記的DNA雙鏈斷裂陽(yáng)性的生精細(xì)胞占所有生精細(xì)胞的比例出現(xiàn)與濃度相關(guān)的上升趨勢(shì),且差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1、既往認(rèn)為安全的小劑量的玉米赤霉烯酮暴露能夠降低雄性小鼠的精液品質(zhì)。2、既往認(rèn)為安全的小劑量的玉米赤霉烯酮暴露干擾精子發(fā)生。3、既往認(rèn)為安全的小劑量的玉米赤霉烯酮暴露影響睪丸發(fā)育。4、既往認(rèn)為安全的小劑量的玉米赤霉烯酮暴露導(dǎo)致DNA雙鏈斷裂。5、既往認(rèn)為安全的小劑量的玉米赤霉烯酮暴露導(dǎo)致的DNA雙鏈斷裂可能是精子發(fā)生受阻的原因之一。
【圖文】：

結(jié) 果影響精液品質(zhì)和精子發(fā)生 對(duì)精液品質(zhì)的影響A 對(duì)精子活力的影響露對(duì)精子質(zhì)量的影響，我們使用 Comput的精子活力。根據(jù)圖 1 我們發(fā)現(xiàn)，在 ZEA小鼠精子活力與 0μg/（kg·d）組相比，呈現(xiàn)，該下降趨勢(shì)沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在處理 28 0μg/（kg·d）組相比，呈現(xiàn)顯著的下降（Pg·d）組與 0μg/（kg·d）組和 20μg/（kg·d）于 0.05）。

第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文量 ZEA 對(duì)活動(dòng)性精子的影響，在活動(dòng)性精子方面，20μg/（kg·d）組和 40μg/（kg·d）組相比，同樣呈現(xiàn)濃度相關(guān)的下降趨勢(shì)。其中，在處計(jì)學(xué)意義；在處理 28 天后，20μg/（kg·d）組和 40μg/（，呈現(xiàn)顯著的下降（P 值均小于 0.05），，處理 42 天后，）組與 0μg/（kg·d）組相比，下降趨勢(shì)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義未發(fā)現(xiàn)顯著關(guān)聯(lián)。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 鄧友田;袁慧;;玉米赤霉烯酮毒性機(jī)理研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2007年02期

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1 朱麗;袁莉蕓;鄔靜;李榮芳;文利新;袁慧;;ZEA誘導(dǎo)豬卵巢顆粒細(xì)胞凋亡機(jī)理的研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家畜內(nèi)科學(xué)分會(huì)第七屆代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上冊(cè)）[C];2011年

本文編號(hào)：2517932