【摘要】：化學(xué)污染物的存在給生物體和生態(tài)環(huán)境的健康發(fā)展造成了巨大的壓力,其經(jīng)生物體吸收后可產(chǎn)生不同程度的毒性效應(yīng)。環(huán)境中的污染物數(shù)量龐大、種類繁雜,并且每年還有很多新化合物不斷流入環(huán)境中,對(duì)這些化合物的生物毒性效應(yīng)進(jìn)行快速檢測(cè)和監(jiān)測(cè)是十分必要的。因此本文采用一種體外急性暴污模式,研究了4種金屬離子和4種溴代阻燃劑對(duì)羅非魚離體肝臟抗氧化系統(tǒng)的影響,并探討抗氧系統(tǒng)相關(guān)指標(biāo)成為生物標(biāo)志物的可能性；同時(shí),應(yīng)用彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了金屬離子、合成色素、溴酸鹽等多個(gè)典型污染物對(duì)THP-1細(xì)胞的單一/復(fù)合DNA損傷毒性效應(yīng),研究其體外遺傳毒性效應(yīng),具體研究工作如下： (1)對(duì)抗氧化系統(tǒng)中3個(gè)指標(biāo)(GSH、GST和SOD)檢測(cè)方法進(jìn)行了優(yōu)化,將其與微孔板檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)合,獲得了簡(jiǎn)單、快速、靈敏的檢測(cè)方法,并大大提高了樣品檢測(cè)數(shù)量。將優(yōu)化方法成功用于四種重金屬離子和四種溴代阻燃劑對(duì)羅非魚離體肝臟抗氧化系統(tǒng)影響的檢測(cè)。結(jié)果表明,GSH對(duì)重金屬暴污響應(yīng)靈敏,GSH響應(yīng)隨金屬暴污濃度升高先升高后下降,呈“鐘型”趨勢(shì),GST活性則隨金屬暴污濃度升高不斷下降,且具有較好的劑量-效應(yīng)線性關(guān)系,因此GSH和GST有望共同成為金屬污染物的潛在生物標(biāo)志物。四種溴代阻燃劑(BFRs)脅迫下,較于高溴含量的HBCD和BDE-209,低溴含量的BDE-47和TBBPA誘導(dǎo)GSH含量和SOD活性均上升程度更大,表明低溴含量的溴代阻燃劑具有更強(qiáng)的生物干擾效應(yīng)；并且酶類指標(biāo)(GST和SOD)表現(xiàn)出了較好的靈敏性和劑量-效應(yīng)線性關(guān)系,GST對(duì)除TBBPA外的3個(gè)BFRs最低響應(yīng)濃度均≤1ng/L,SOD對(duì)所有被試BFRs最低響應(yīng)濃度均≤10ng/L,且與多個(gè)BFRs在較寬的濃度范圍內(nèi)存在良好的劑量-效應(yīng)線性關(guān)系,因此,GST和SOD有望共同成為BFRs的潛在生物標(biāo)志物。 (2)對(duì)單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)(彗星實(shí)驗(yàn))進(jìn)行了優(yōu)化,并將優(yōu)化方法用于多個(gè)污染物的單一暴污體外DNA損傷毒性檢測(cè)。結(jié)果顯示金屬離子對(duì)THP-1細(xì)胞DNA損傷毒性最強(qiáng),其次是合成色素類化合物,然后是丙烯酰胺,溴酸鹽化合物表現(xiàn)出了最弱的體外DNA損傷毒性效應(yīng)。 (3)污染物復(fù)合暴污試驗(yàn)中,彗星實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,堿性橙Ⅱ的存在能夠顯著提高其他化合物的DNA損傷毒性,而丙烯酰胺的共存則對(duì)大多數(shù)化合物的毒性沒有顯著影響,表明復(fù)合暴污是一個(gè)十分復(fù)雜的過程,易受多重外在因素的影響,因此,在制定相關(guān)污染物的環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)時(shí),應(yīng)充分考慮復(fù)合污染的影響。 (4)單一和復(fù)合暴污試驗(yàn)中,THP-1細(xì)胞DNA損傷響應(yīng)與暴露濃度之間均存在劑量-效應(yīng)關(guān)系,表明彗星實(shí)驗(yàn)是一種快速、有效的體外DNA損傷檢測(cè)方法。 (5)本文采用體外暴污模式研究了多個(gè)化學(xué)污染物對(duì)羅非魚肝臟抗氧化系統(tǒng)的影響以及對(duì)THP-1細(xì)胞的DNA損傷毒性效應(yīng)。較于體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn),體外實(shí)驗(yàn)方法具有較好的靈敏性,且體外培養(yǎng)條件易于控制,能夠盡量減小個(gè)體差異的影響,因此重復(fù)性好,同時(shí),針對(duì)不同的化合選擇對(duì)應(yīng)的靶器官和細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),因而具有良好的專一性和靈活性,另外,體外實(shí)驗(yàn)更易達(dá)到快速靈敏、高通量檢測(cè)水平,這對(duì)于環(huán)境中大量污染物的初步毒性檢測(cè)和篩查具有重要的意義。本文中體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)中體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有一定的一致性,因此體外實(shí)驗(yàn)是一個(gè)有潛力的方法,可與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)共同用于環(huán)境毒理學(xué)領(lǐng)域的研究中。
【學(xué)位授予單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R114

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7 周R，

本文編號(hào)：2515580